微丝与Sertoli细胞屏障结构关系的研究

本文应用细胞松弛素E和示踪物镧对微丝在维持Sertoli细胞屏障完整性中的作用进行了形态学研究。结果表明,1.睾丸内注射细胞松弛素E(1000μmol/L)6小时后,可使Sertoli细胞外质特化区(ES)的微丝发生不同程度的破坏,微丝与细胞膜排列关系改变,外质特化区的内质网断裂或消失。随着细胞松弛素E浓度的增加(2000μmol/L)和作用时间的延长(14小时),其变化更趋严重。2.注射细胞松弛素E加高渗右旋醣酐后,构成Sertoli细胞屏障的紧密连接在高渗“应力”作用下被拉开,仅保留间断的点状接触,此时生精上皮基底室和管腔室内的生精细胞皱缩,细胞间隙扩大。3.注入细胞松弛素E后,示踪物镧不仅可进入基底室,而且可深入至管腔室,并围绕在精母细胞与精子细胞周围。说明支持细胞屏障的完整性在细胞松弛素E的作用下受到破坏,特别是支持细胞外质特化区中的微丝破坏甚为关键。本文对微丝与支持细胞屏障的紧密连接的关系及其作用机制进行了讨论。

己烯雌酚对未成熟大鼠卵巢卵泡颗粒细胞分化的形态学观察

取出生后21~26天Sprague-Dawley未成熟雌性大鼠,分为实验与对照两组。实验组只/天注射己烯雌酚(DES)0.5mg(溶于芝麻油中),并按注射天数分为2、3、4、5天组;对照组注射等量的芝麻油。注射2天后,逐日取材固定,用光镜和电镜观察两组动物的卵巢和卵泡颗粒细胞。同时从各组卵巢中分离出卵泡颗粒细胞,用无血清McCoy 5a培养基培养,加入不同的激素,分为对照组、FSH组、DES+FSH组、FSH+hCG组。培养3天后,取材固定,用光镜、透射电镜、扫描电镜观察各组的细胞形态,结果为:1.实验组卵巢比对照组的大,卵泡也大。卵泡细胞增多,细胞体积大,分裂象多见。2.注射3天以上DES的卵巢中,闭锁卵泡和退化的卵泡细胞增多。3.电镜下,实验组卵泡细胞中与蛋白质合成有关的细胞器比对照组发达。4.体外培养的卵泡颗粒细胞,对照组细胞排列分散;FSH组细胞集聚成团,细胞表面微绒毛增多;细胞质内与合成蛋白质有关的细胞器比对照组的发达。DES+FSH组的细胞排列和结构与FSH组的相似。FSH+hCG组细胞体积增大,细胞表面微绒毛减少或消失。细胞质内出现滑面内质网,细胞开始黄体化。5.注射2~5天DES的各组细胞形态和结构均相似。从形态学来看,经DES处理的未成熟雌鼠的卵泡颗粒细胞的形态、排列和对不同激素作用下的变化,与文献报道的去垂体雌鼠的同类细胞相似。因此我们认为,未成熟雌鼠的卵泡颗粒细胞也能作为研究细胞分化的一种模型。