发酵对中药减毒增效的研究进展

在当今中国,应用毒性中药治疗疑难病症已经非常普遍,但是毒性中药的毒性严重限制了其临床应用。这一难题通常可以通过中药炮制这项独特的技术来解决。发酵技术也是重要的传统中药炮制方法之一。发酵炮制与现代生物技术相结合,正影响着中药的各个领域。作者在大量文献调研的基础上,从动物、植物、矿物药三方面分别综述了发酵炮制在中药减毒增效方面的应用和发展。发酵炮制有毒中药不仅可以保护中药成分活性中心免遭破坏,还可以对其中的毒性成分进行结构修饰,产生新成分,从而扩大毒性中药的适应症。发酵炮制为毒性中药减毒增效提供了一个崭新的途径。

银翘散传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂的比较研究

目的:比较银翘散传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂的高效液相色谱指纹图谱、浸出物、相对密度的异同,为临床应用提供实验依据。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),浸出物及相对密度测定法,对两种汤剂进行测定。结果:银翘散传统饮片汤剂和配方颗粒汤剂的质量存在较大差异。结论:需要加强传统中药饮片和配方颗粒的生产工艺研究以及等效性研究,建立和完善中药饮片和配方颗粒的行业标准或国家标准,保证两种饮片形式都能更好的服务于中医临床。

忍冬藤药材HPLC指纹图谱的研究

本研究通过高效液相色谱法,建立忍冬藤高效液相色谱指纹图谱,并通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统对其进行分析,建立对照指纹图谱,从而为区别其他品种及忍冬藤的质量控制提供依据。1材料Shimadzu LC-20AD高效液相色谱系统（日本岛津公司）,包括岛津LC-Solusion工作站、在线脱气机、SIL-20A自动进样器、SPD-20A紫外-可见光检测器、CTO-20A柱温箱；BS2242S电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；KQ5200DA型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

ICP-AES法检测硫磺熏蒸前后金银花中金属元素及微量元素

目的测定硫磺熏蒸前后中药金银花中金属元素和微量元素。方法采用微波消解法进行样品前处理,再经电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)法测定金属元素及微量元素。结果中药金银花中Al、Fe、Mn、Zn、Cu等元素含有量丰富,硫磺熏蒸后金银花中S、Al元素的含量有显著升高(P<0.05),并伴有铬残留量的增加。结论硫磺熏蒸工艺能导致金银花中S元素量升高和铬残留的增加,测定金银花中金属元素及微量元素对于全面和客观评价其质量具有积极现实的意义。

GC／MS法分析硫磺熏蒸对杭白菊挥发油成分的影响

分析杭白菊通风晾干品和硫磺熏蒸品的挥发油成分,为其质量评价提供科学依据。采用水蒸气蒸馏法提取7个杭白菊样品挥发油,用GC毛细管色谱柱进行分离,归一化法测定其相对百分含量,GC/MS法分析鉴定其化学成分。初步分离鉴定出64种成分,其挥发油组成皆以单萜类和倍半萜类化合物为主要成分,但所含化合物的具体种类有很大差异。经硫磺熏蒸后,样品中蒎烯、合成右旋龙脑、香芹酚、石竹烯氧化物等活性成分含量明显降低,而香树烯、γ-芹子烯等成分含量升高。实验结果表明,应严格控制硫磺熏蒸在杭白菊加工过程中的应用。

大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的影响

目的探讨大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的影响。方法 45只雄性SD大鼠随机分为三组:正常组、模型组、大黄附子汤组,每组15只。各组大鼠按造模后处置时间分为3,6,12 h等3个亚组,每亚组5只。采用5%牛黄胆酸钠胰胆管注射法制备SAP大鼠模型,实验前1 h分别灌胃给予生理盐水或大黄附子汤,分别于术后3,6,12 h取血,检测血中内毒素水平,处死大鼠,取胰腺,小肠行HE染色检测组织病理改变。结果大黄附子汤能显著降低SAP大鼠血浆内毒素水平,减轻胰腺组织及小肠组织炎细胞浸润及组织损伤。结论保护肠黏膜屏障,减少内毒素进入体内是大黄附子汤治疗SAP的重要机制。

透皮促渗中药挥发油的化学成分与中药药性关联性研究

前期研究发现中药挥发油的透皮促渗效果与来源中药的药性存在关联性。化学成分是中药药性的物质基础,该文进一步考察了透皮促渗中药挥发油的化学成分与中药药性之间的关联性。采用水蒸气蒸馏法制备中药挥发油,测定了其相对密度和折光率等理化参数,采用GC-MS分析了20种中药挥发油的组成成分,将其按照骨架特征和官能团的不同分成12种类别,然后通过逐步Logistic回归分析,研究药性与成分类别之间的规律。结果表明,五味、四气以及归经均与挥发油中不同类别的成分存在关联性(P<0.05),来源中药药性与挥发油的成分类别存在明显的相关性和规律性。

不同医疗机构细辛饮片质量评价

目的调查不同医疗机构的细辛饮片质量。方法从全国不同医疗机构收集12批次的细辛饮片样品,参照《中国药典》2010年版Ⅰ部细辛检查和含量测定项下的方法,采用高效液相色谱法测定收集到的细辛饮片样品中指标成分细辛脂素的含量,并对饮片中的马兜铃酸Ⅰ的含量进行限量检查。结果不同医疗机构的细辛饮片质量存在差异,细辛脂素的线性方程为Y=14.82X＋21.87,r=0.999 5,细辛脂素在5.0~250.0μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为97.82%,相对标准偏差（RSD）为1.89%。用高效液相色谱法测定12批细辛饮片,其中6个批次的道地产＂辽细辛＂不仅指标成分（细辛脂素）含量达标,而且限量成分（马兜铃酸Ⅰ）处于相对较低水平。结论不同医疗机构细辛饮片质量存在差异,道地产＂辽细辛＂质量更优。

硫磺熏蒸前后中药菊花中金属元素及微量元素的ICP-AES检测

目的:对硫磺熏蒸前后中药菊花中金属元素和微量元素的含量进行分析研究。方法:采用微波消解法进行前处理,应用电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)法测定含量。结果:中药菊花中Al、Fe、Mn、Zn等金属元素含量丰富,硫磺熏蒸前后S元素和Cu元素的含量有显著性差异。结论:实验室自制硫磺熏蒸菊花药材,测试结果显示含有较多的S元素,推测中药菊花中S元素含量的增加可能与加工过程中使用硫磺熏蒸工艺有关,测定中药菊花中金属元素及微量元素的含量对于全面和客观评价其质量具有重要意义。

硫磺熏蒸前后白芍HPLC-UV特征图谱的比较研究

目的:对白芍硫磺熏蒸前后的HPLC-UV特征图谱进行比较研究,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法:采用RP-HPLC方法,使用Hypersil ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.5%醋酸水溶液,流速为1.0 mL·min-1,二元梯度洗脱,二极管阵列检测器,测定未经硫磺熏蒸和经硫磺熏蒸的白芍各10批,以芍药苷为参照物,检测波长为270 nm。结果:未经硫磺熏蒸的白芍中共有23个共有峰,经硫磺熏蒸的白芍中共有18个共有峰,通过与对照品的保留时间及紫外光谱比较,5、13、16、17号峰的归属分别为没食子酸、儿茶素、白芍苷、芍药苷。结论:白芍经硫磺熏蒸后,其成分发生了比较明显的变化,同时白芍在硫磺熏蒸前后,某些共有成分的含量也有不同程度的改变,硫磺熏蒸确实对白芍的质量有非常大的影响。

大黄附子汤血清药物化学初步研究

目的对大黄附子汤进行血清药物化学初步研究,通过分析入血成分探讨该复方发挥药效的物质基础。方法采用血清药物化学的研究方法,同时建立大黄附子汤及大鼠ig给予大黄附子汤后血清HPLC指纹图谱,通过分析比较分别给予大黄附子汤、单味生药所得血清样品,初步鉴定大黄附子汤在大鼠血清中的移行成分。结果大鼠ig给予大黄附子汤后,血清中发现18个入血成分,其中14个为代谢产物;4个为原型成分。结论大黄附子汤入血成分主要来自大黄和附子,复方血清药物化学研究为深入阐述大黄附子汤药效物质基础提供依据。

傅里叶变换红外光谱快速鉴别当归与硫磺熏蒸当归的研究

目的:利用傅里叶变换红外(FTIR)光谱法并结合二阶导数谱对当归与硫磺熏蒸当归进行快速鉴别。方法:采用傅里叶变换红外光谱法对当归与硫磺熏蒸当归的醇提物和水提物进行对比分析,并结合二阶导数进行进一步放大分析。结果:在红外光谱中非熏当归与硫熏当归的醇提物和水提物均有差异,而通过具有高分辨力的二阶导数光谱对醇提物和水提物进行分析后,区分效果更加明显。红外光谱显示,在醇提物中,硫磺熏蒸后当归吸收峰明显减少,且有新吸收峰出现;水提物中,当归与硫磺熏蒸当归在1 000～400 cm-1波长的"指纹区"变化较明显。二阶导数光谱显示,在醇提物中,硫磺熏蒸当归在约3 578,3 541 cm-1吸收峰减弱和消失,约1 400～1 200 cm-1以及800～600 cm-1两者有较明显变化;水提物中,在约3 900～3 850 cm-1以及3 800～3 750 cm-1附近两者有差异。结论:利用傅里叶变换红外光谱法结合二阶导数可以高效、简便、准确地鉴别当归与硫磺熏蒸当归,为当归药材的质量控制提供鉴别依据。

近红外光谱在中药鉴别和质量控制中的应用

目的:了解近红外光谱在中药鉴别和质量控制中的研究进展。方法:根据文献综述近红外光谱在中药真伪鉴别、掺伪鉴别、产地鉴别、种类分析以及在线质量控制中的研究现状。结果:近红外光谱是一门分析速度快、分析效率高、样品无需预处理,便于在线分析的样品无损失的技术,与传统的方法比较,其具有高效、快速、对样品无损等优点。结论:未来随着化学计量学的不断发展和完善,近红外光谱在中药分析领域的应用前景将越来越广阔,有利于促进和推动中药现代化和国际化进程。

小柴胡颗粒中5种指标性成分的同时含量测定及其特征图谱研究

采用反相高效液相色谱法-二极管阵列检测器,以乙腈-1%磷酸水溶液为流动相线性梯度洗脱,对小柴胡颗粒中5种主要指标性成分的含量进行同时分析测定,并对其特征图谱进行研究。结果显示,5种主要指标性成分(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和甘草次酸)分离良好,线性范围分别为0.518～16.576、0.069～2.197、0.167～5.333、0.009～0.297和0.006～0.270 mg.g-1;相关系数均为0.999 9;加样回收率在95%～105%之间;在特征图谱研究中,以黄芩苷为参照物峰,共标定了12个共有峰,分析的10批小柴胡颗粒与共有模式之间具有良好的相似性,相似度均在0.9以上。所建立的含量测定及特征图谱分析方法灵敏度高、专属性强,可用于小柴胡颗粒的质量控制。

狼毒(月腺大戟)醋制前后化学成分变化规律的研究

目的:研究狼毒(月腺大戟)醋制前后化学成分的变化规律。方法:采用比色法,Kedde显色剂显色,测定醋制前后狼毒饮片中毒性成分总内酯含量的变化;采用高效液相色谱法,Kromasil-ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长290nm,柱温25℃,乙腈-水梯度洗脱,流速1 mL.min-1,同时测定醋制前后狼毒饮片中有效成分狼毒乙素、狼毒丙素的含量变化。结果:狼毒饮片醋制后其毒性成分总内酯含量降低,由0.60降至0.45 mg.g-1。有效成分狼毒乙素、狼毒丙素含量均有不同程度提高;建立的特征图谱信息丰富,可以反映醋制前后化学成分的整体变化规律。结论:狼毒饮片醋制后化学成分发生明显变化,其醋制后降低毒性,增强疗效可能与这些成分变化有关。

ICP-AES法分析硫磺熏蒸前后白芍中有害重金属、硫及主要微量元素的变化

目的:进行硫磺熏蒸前后白芍样品中有害重金属、硫及微量元素的分析。方法:采用湿法消解前处理,电感耦合等离子发射光谱(ICP-AES)法测定。结果:白芍经硫磺熏蒸后Cu,S元素含量增加,Zn元素含量降低,并且在硫磺熏蒸白芍样品中检测到了重金属As,Hg残留。结论:硫磺熏蒸可能会使白芍中残留有害重金属及大量对人体有危害的硫,同时改变部分微量元素的含量。

大黄附子汤含药血清对重症急性胰腺炎小鼠腹腔巨噬细胞JAK2/STAT3信号通路的影响

目的探讨大黄附子汤含药血清对重症急性胰腺炎小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响及其机制。方法制备小鼠重症急性胰腺炎模型,取其腹腔巨噬细胞分成模型组、大黄附子汤含药血清(2.5%、5.0%、10.0%)组、酪氨酸磷酸化抑制剂AG490(10μmol/L)阳性对照组,细胞继续培养2 h后,各给药组给予相应含药血清、对照组给予空白血清0.5 mL,培养24 h,收集上清液。ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,Western blotting法检测pJAK2、pSTAT3基因和蛋白表达水平。结果大黄附子汤能显著减少大鼠腹腔巨噬细胞分泌的IL-6、TNF-α,抑制pJAK2、pSTAT3基因及蛋白的表达。结论大黄附子汤含药血清可能通过降低pJAK2、pSTAT3基因和蛋白的表达,阻断JAK2/STAT3信号转导通路,抑制腹腔巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α,从而减轻机体过度的炎症反应和重症急性胰腺炎的病情。

硫磺熏蒸前后金银花的HPLC指纹图谱比较和聚类分析

目的:建立硫磺熏蒸前后金银花HPLC指纹图谱,为评价硫磺熏蒸前后金银花样品的质量优劣提供依据。方法:采用RP-HPLC方法,色谱柱:Pursuit XRs C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;柱温30℃;检测波长238 nm。结果:建立了硫磺熏蒸前后金银花HPLC指纹图谱共有模式,并指认了其中4个色谱峰。通过与对照品的保留时间比较,4,5,13,14号峰的归属分别为绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷。通过采用相似度计算法结合聚类分析对19批金银花进行比较分析,从而对其质量进行评价。结论:金银花在硫磺熏蒸前后,某些共有成分的含量会有不同程度的改变,硫磺熏蒸对金银花的质量影响较大。

马钱子碱、马钱子总生物碱与马钱子粉在大鼠体内药动学的比较

目的:研究马钱子碱、马钱子砂烫炮制品总生物碱与马钱子粉在大鼠体内的药动学规律,探寻单成分与整体之间的相互影响。方法:给各组大鼠分别灌胃给予马钱子碱溶液、马钱子砂烫炮制品总碱溶液及马钱子粉混悬液,采用高效液相色谱测定大鼠体内马钱子碱的血浆浓度,血药浓度-时间曲线经3P97软件包进行房室模型拟合并计算和比较各组药物动力学参数。结果:马钱子碱在大鼠体内的代谢过程符合二室模型,权重W=1/C2,方差分析结果表明,相同剂量的马钱子碱在3组不同的存在形式中,马钱子碱溶液组与马钱子砂烫炮制品总生物碱组在Cmax,MRT有显著性差异(P<0.05);马钱子碱溶液组与马钱子粉混悬液组在Cmax,AUC0-t,AUC0-∞有显著性差异(P<0.05),其中马钱子粉混悬液组值最小。结论:马钱子砂烫炮制品总生物碱组可相对延长马钱子中有效成分马钱子碱的血浆滞留时间,马钱子粉混悬液组的生物利用度较低。

大黄附子汤对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的:研究大黄附子汤对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法:制备小鼠腹腔巨噬细胞,纯化后以5×105/mL细胞接种于96孔培养板或6孔板中,分为:细胞对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)模型组(10 mg·L-1)、大黄附子汤组(终质量浓度为25,50,100,200,400,800 mg·L-1),在细胞贴壁过夜后,正常组给予不含血清的培养液,其余各组给予LPS(10 mg·L-1),大黄附子汤组同时给予不同浓度药物,48 h后测细胞存活率,ELISA法测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)水平,黄嘌呤氧化酶法(羟氨法)测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活力,硫代巴比妥酸法测丙二醛(MDA)含量,Griess法测一氧化氮(NO)水平。结果:在25～400 mg·L-1内,大黄附子汤对正常细胞代谢MTT活力无显著影响;剂量达50 mg·L-1即能抑制LPS诱导NO的生成(P<0.01),100 mg·L-1时能降低MDA含量(P<0.01),增强SOD酶活力(P<0.05),并能显著抑制LPS诱导TNF-α,IL-6等细胞因子的合成(P<0.01)。结论:大黄附子汤能有效调节BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞免疫及抗氧化功能,改善LPS对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞的诱导作用。