长学制中医药拔尖创新人才培养模式中的免疫学教学改革

免疫学是中医、中药、中西医结合等专业的重要基础课程。为了培养具备临床-科研综合能力的长学制中医药拔尖创新人才,我们进行了合理的教学改革,提出如下建议:(1)横向拓宽教学范畴、纵向加深课程难度;(2)突出中医药免疫的特色,注重中医药免疫学应用;(3)综合运用混合教学模式,增强课程教学的灵活性;(4)聚焦免疫学前沿热点问题,关注免疫学最新科研进展;(5)开设多种不同类型的免疫学实验,启发学生科研思维。通过教学改革,能够加深学生对免疫学的理解,锻炼中西医结合思维和实践能力,拓展科研视野,培养具有扎实专业素养和深厚文化底蕴的中医药拔尖创新人才。

补肾促排卵汤促进骨骼肌葡萄糖转运体GLUT4膜转位改善PCOS大鼠胰岛素抵抗的作用研究

目的:探讨补肾促排卵汤改善多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胰岛素抵抗是否与促进骨骼肌细胞葡萄糖转运体(GLUT)4膜转位有关。方法:24只雌性SD大鼠随机分为正常对照组(8只)和PCOS模型组(16只),PCOS模型组连续21 d灌服来曲唑,将造模成功的16只大鼠再随机分为模型组、补肾促排卵汤组,每组8只。补肾促排卵汤组连续14 d灌服补肾促排卵汤。干预结束后,空腹测量各组大鼠体质量,ELISA检测血清睾酮、雌二醇水平及空腹胰岛素水平,生化检测空腹血糖水平,免疫组织化学检测比目鱼肌GLUT4的表达情况,Western blot技术测定比目鱼肌GLUT4、AKT2、p-AKT2、AS160、p-AS160蛋白表达水平及比目鱼肌质膜GLUT4蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠体质量、空腹血糖、空腹胰岛素以及血清睾酮水平显著升高(P<0.05),雌二醇水平显著降低(P<0.05),大鼠卵巢呈多囊样改变,比目鱼肌质膜GLUT4及比目鱼肌p-AKT2、p-AS160蛋白含量显著降低(P<0.05)。与模型组相比,补肾促排卵汤组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平显著降低(P<0.05),血清睾酮水平显著降低,雌二醇水平升高(P<0.05),有效改善卵巢形态,比目鱼肌质膜GLUT4蛋白及比目鱼肌p-AKT2、p-AS160蛋白显著上升(P<0.05)。结论:补肾促排卵汤改善PCOS大鼠胰岛素抵抗,其机制可能与激活AKT2/AS160信号通路,促进骨骼肌GLUT4蛋白转位有关。

基于液质联用技术的健脾养正消癥方治疗胃癌小鼠血清代谢组学分析

目的通过代谢组学方法,观察给予健脾养正消癥方的前后胃癌小鼠血清代谢产物变化规律,寻找其与治疗胃癌疗效相关特征分子,探讨健脾养正消癥方在调控胃癌内源性机制方面作用。方法建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,并随机分为模型组,健脾养正消癥方低剂量组和健脾养正消癥方高剂量组。采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术,对各组小鼠血清样本进行分析,结合主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)来筛选差异性代谢物,利用MetaboAnalyst网站分析相关代谢通路。结果健脾养正消癥方高、低剂量组小鼠瘤体平均瘤质量明显小于模型组(P<0.05)。代谢组学结果经分析,模型组、低剂量组和高剂量组血清样本能够得到很好的区分,健脾养正消癥方给药后胃癌小鼠的内源性代谢物水平发生不同程度的回调,并初步鉴定出5个差异代谢物和4条相关代谢通路。结论健脾养正消癥方能够明显抑制小鼠肿瘤的生长,其作用机制可能与花生四烯酸水平的升高以及其激活的α-亚麻酸和亚油酸代谢和花生四烯酸代谢通路有关。

脊髓中TRPV4依赖的神经免疫轴促进神经病理性疼痛

小胶质细胞是中枢神经系统(central nervous system, CNS)的驻留巨噬细胞,对大脑的发育和稳态至关重要,并参与疾病发生。小胶质细胞的活化和增殖是包含神经病理性疼痛在内的诸多中枢神经系统疾病的标志。然而,在神经病理性疼痛中控制脊髓神经免疫轴的分子机制仍不完全清楚。该研究发现,基因敲除或药物阻断瞬时感受器电位香草素受体4 (transient receptor potential vanilloid 4, TRPV4)可显著减轻坐骨神经分支选择性损伤模型小鼠的神经病理性疼痛样行为。在机制上,小胶质细胞表达的TRPV4介导小胶质活化和增殖,并促进脂质运载蛋白2 (lipocalin-2)释放,增加脊髓兴奋性神经元的可塑性。该研究揭示,小胶质细胞的TRPV4通道处于脊髓神经免疫轴中心,将周围神经损伤转化为中枢敏化和神经病理性疼痛,进而将TRPV4确定为治疗慢性疼痛的潜在新靶点。

基于GC-MS代谢组学的胆木糖浆抗H1N1甲型流感病毒性肺炎研究

目的采用非靶标代谢组学方法探讨胆木糖浆干预H1N1甲型流感病毒性肺炎相关代谢网络变化及可能的作用机制。方法随机将ICR小鼠分成四组:正常组、H1N1肺炎模型组、阳性药达菲组、胆木糖浆组。模型组以H1N1病毒滴鼻造模,给药组以胆木糖浆灌胃治疗,正常组以生理盐水灌胃作为对照。实验结束后取肺组织样本,采用GC-MS代谢组学技术分析小鼠肺组织中的差异性代谢产物(FDR<0.05,Fold Change>1.5)并寻找其潜在的代谢通路。结果主成分分析(PCA)结果显示各组间小鼠肺组织的代谢轮廓可明显区分,筛选出21种潜在差异性代谢产物在模型组出现不同趋势改变,胆木糖浆组具有明显回调作用。代谢通路富集分析进一步提示胆木糖浆主要影响了嘌呤、嘧啶及磷酸戊糖途径等代谢相关通路发挥治疗H1N1肺炎的作用。结论胆木糖浆主要可通过调节机体嘌呤、嘧啶及磷酸戊糖代谢途径及其相关的代谢产物发挥治疗H1N1肺炎的作用。