柴胡-黄芩药对配伍及用量比例对抑郁小鼠行为学及脑海马BDNF/TrkB信号通路的影响

目的通过实验的方法探究柴胡-黄芩药对的抗抑郁功效及机制。方法采用慢性不可预见温和应激(CUMS)的方法造模,将造模成功的小鼠随机分为模型组、阳性药组、柴胡-黄芩不同用量比例3组,灌胃给予柴胡-黄芩不同配伍比例的水煎剂,观察其对CUMS小鼠糖水偏好、悬尾、开野等行为学实验的影响;测定小鼠海马中脑源性神经营养因子(BDNF)、脑源性神经营养因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)及蛋白激酶B(Akt)的表达,并观察其对海马凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)以及Bcl相关X蛋白(Bax)的调控作用,探讨柴胡-黄芩药对的抗抑郁机制。结果与空白组小鼠相比,模型组小鼠糖水偏好率降低、悬尾不动时间延长、开野穿格次数减低(P<0.01),柴胡-黄芩(1∶1)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍可增加糖水偏好率、缩短其悬尾不动时间、增加开野穿格次数(P<0.01,P<0.05),柴胡-黄芩(3∶8)配伍可缩短小鼠悬尾不动时间(P<0.05),柴胡-黄芩(1∶1)配伍在糖水偏好实验、悬尾不动实验及开野实验中均优于其他两组配伍组(P<0.01)。蛋白印迹结果显示,与空白组相比,模型组小鼠BDNF表达减少,TrkB、Akt磷酸化水平降低(P<0.01),柴胡-黄芩(1∶1)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍,可增加海马BDNF的表达、增加TrkB自磷酸化及Akt的磷酸化水平(P<0.01,P<0.05),其中柴胡-黄芩(1∶1)配伍组BDNF表达高于柴胡-黄芩(3∶8)配伍;TrkB及Akt磷酸化水平高于柴胡-黄芩(3∶8)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍。免疫组化结果显示,与空白组相比,模型组小鼠Bcl-2蛋白表达降低、Bax蛋白表达增加(P<0.01),柴胡-黄芩(1∶1)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍可上调Bcl-2的表达,下调Bax的表达,柴胡-黄芩(8∶3)配伍组可下调Bax的表达,其中柴胡-黄芩(1∶1)配伍优于柴胡-黄芩(3∶8)配伍(P<0.01)。结论柴胡-黄芩(1∶1)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍可改善CUMS小鼠抑郁样行为,发挥抗抑郁功效;其抗抑郁的作用机制可能与调控海马中BDNF/TrkB信号通路从而影响海马中凋亡蛋白的表达,保护海马神经元有关。