柴胡-黄芩药对配伍及用量比例对抑郁小鼠行为学及脑海马BDNF/TrkB信号通路的影响

目的通过实验的方法探究柴胡-黄芩药对的抗抑郁功效及机制。方法采用慢性不可预见温和应激(CUMS)的方法造模,将造模成功的小鼠随机分为模型组、阳性药组、柴胡-黄芩不同用量比例3组,灌胃给予柴胡-黄芩不同配伍比例的水煎剂,观察其对CUMS小鼠糖水偏好、悬尾、开野等行为学实验的影响;测定小鼠海马中脑源性神经营养因子(BDNF)、脑源性神经营养因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)及蛋白激酶B(Akt)的表达,并观察其对海马凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)以及Bcl相关X蛋白(Bax)的调控作用,探讨柴胡-黄芩药对的抗抑郁机制。结果与空白组小鼠相比,模型组小鼠糖水偏好率降低、悬尾不动时间延长、开野穿格次数减低(P<0.01),柴胡-黄芩(1∶1)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍可增加糖水偏好率、缩短其悬尾不动时间、增加开野穿格次数(P<0.01,P<0.05),柴胡-黄芩(3∶8)配伍可缩短小鼠悬尾不动时间(P<0.05),柴胡-黄芩(1∶1)配伍在糖水偏好实验、悬尾不动实验及开野实验中均优于其他两组配伍组(P<0.01)。蛋白印迹结果显示,与空白组相比,模型组小鼠BDNF表达减少,TrkB、Akt磷酸化水平降低(P<0.01),柴胡-黄芩(1∶1)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍,可增加海马BDNF的表达、增加TrkB自磷酸化及Akt的磷酸化水平(P<0.01,P<0.05),其中柴胡-黄芩(1∶1)配伍组BDNF表达高于柴胡-黄芩(3∶8)配伍;TrkB及Akt磷酸化水平高于柴胡-黄芩(3∶8)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍。免疫组化结果显示,与空白组相比,模型组小鼠Bcl-2蛋白表达降低、Bax蛋白表达增加(P<0.01),柴胡-黄芩(1∶1)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍可上调Bcl-2的表达,下调Bax的表达,柴胡-黄芩(8∶3)配伍组可下调Bax的表达,其中柴胡-黄芩(1∶1)配伍优于柴胡-黄芩(3∶8)配伍(P<0.01)。结论柴胡-黄芩(1∶1)配伍及柴胡-黄芩(8∶3)配伍可改善CUMS小鼠抑郁样行为,发挥抗抑郁功效;其抗抑郁的作用机制可能与调控海马中BDNF/TrkB信号通路从而影响海马中凋亡蛋白的表达,保护海马神经元有关。

经典名方厚朴麻黄汤古代文献研究

厚朴麻黄汤出自《金匮要略》,为《古代经典名方目录(第一批)》收录的经典名方之一,对该方组成药物等关键信息进行梳理分析具有重要意义。通过对古代含厚朴麻黄汤的医籍进行收集整理,分析其功用主治、药物用量及煎服法,对方中分别用衡器、量器以及拟物用量的药物进行考证,为临床应用及成方制剂开发提供参考。

少阳膝痹方调节LXR-α/NF-κB信号通路对膝骨关节炎大鼠的干预作用及机制

目的观察少阳膝痹方对大鼠膝骨关节炎的干预效应,初步从LXR-α/NF-κB信号通路探讨其可能的作用机制。方法采用改良hulth法建立大鼠双侧膝关节膝骨关节炎模型,随机分为假手术组、模型组、美洛昔康组、低、中、高剂量中药复方组,模型制备成功后灌胃给药,给药4周后观察软骨表面大体形态学,HE染色观察软骨病理变化,ELISA法检测血清中基质金属蛋白抑制剂-1(TIMP-1)、前列腺素2E(PGE2)、基质金属蛋白13(MMP13)指标,Western Blot检测大鼠膝关节TNF-α、调节肝X受体α(LXR-α)、核因子κB(NF-κB)P65、NF-κB P-P65蛋白的表达;建立膝关节软骨细胞培养体系,通过LXR-α激动剂及抑制剂干预,分为空白对照组、模型组、中药复方组、中药复方+抑制剂组、中药复方+激动剂组,检测PGE2、MMP13及TNF-α的表达情况。结果术后4周,大体形态学观察显示中药复方各组软骨表面较模型组更完整,HE染色显示各中药复方组关节软骨略有损伤,潮线略有杂乱,骨皮质略有损伤,较模型组有所改善。与假手术组比较,模型组MMP13浓度、PGE2、TNF-α蛋白表达、P-P65蛋白表达、P-P65/P65相对蛋白表达升高(P<0.05),NF-κB P65蛋白表达下降(P<0.05)。与模型组比较,美洛昔康组、各剂量中药复方组MMP13浓度、P-P65蛋白表达、P-P65/P65蛋白相对表达降低,TIMP-1浓度、TIMP-1/MMP13比值、LXR-α基因及蛋白表达升高(P<0.05);美洛昔康组、低、高剂量中药复方组PGE2、TNF-α蛋白降低,中剂量中药复方组TNF-α蛋白表达量亦降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组MMP13、PGE2蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,中药复方组及中药复方+激动剂组MMP13、PGE2蛋白表达量降低(P<0.05),TNF-α基因表达升高(P<0.05);与中药复方+抑制剂组比较,中药复方组、中药复方+激动剂组MMP13、PGE2表达量降低(P<0.05),TNF-α基因表达降低(P<0.05)。结论少阳膝痹方可降低血清中的MMP13、PGE2改善炎性微环境,减轻软骨退变,降低软骨中炎性因子TNF-α表达,这可能与上调LXR-α表达、降低NF-κB P65、P-P65有关。