当归补血汤治疗糖尿病抑郁症的研究进展

近年来,随着经济的迅速发展,人们生活方式、水平的改善,糖尿病发病率呈急剧上升趋势,经流行病学调查,60%-75%的糖尿病患者都伴有抑郁症状,甚至其中10%-35%的患者为重度抑郁,而抑郁患者的糖尿病发病风险是正常人的2倍。糖尿病罹患抑郁症(DD)严重影响患者生活质量,已经引起越来越多的关注。目前治疗DD的药物以化学药物为主,由于其靶点单一、药物依赖性强、副作用明显等原因,故寻找多靶点、低毒、副作用小的治疗药物,是临床亟待解决的棘手问题。课题组研究发现益气养血方当归补血汤(DBD)对DD有较为确切的疗效,现对其研究现状加以综述。

当归补血汤主要吸收成分对GK大鼠肾保护作用研究

目的观察当归补血汤主要吸收成分对2型糖尿病模型GK大鼠肾保护作用及可能机制。方法 UPLC-MS/MS定性定量吸收入血活性成分(ABCs),确定ABCs组成,定量1g母方中ABCs浓度。GK大鼠按血糖随机分为模型组、当归补血汤组及吸收成分(ABCs)组,每组10只,给药组分别灌胃当归补血汤(4g/kg)、吸收入血的生物活性成分(剂量相当于母方含量,即咖啡酸5.36mg/kg,芒柄花素2.68mg/kg,毛蕊异黄酮2.56mg/kg,阿魏酸1.36mg/kg,黄芪甲苷0.45mg/kg,丁苯酞0.16mg/kg,蒿本内酯0.16mg/kg),10只普通Wistar大鼠作为空白对照,给予等量生理盐水,每日1次,连续给药28d。观察指标:(1)肾脏系数、尿总蛋白和尿白蛋白;(2)肾组织氧化应激;(3)病理切片观察肾脏组织形态。结果当归补血汤及ABCs均能够改善糖尿病大鼠的肾脏肥大,显著降低糖尿病模型大鼠尿总蛋白、尿白蛋白和肾脏MDA水平(P<0.05),显著升高肾脏总SOD活力(P<0.05),且对肾脏组织病理形态学有保护作用;与当归补血汤组比较,ABCs作用不如汤剂显著。结论 ABCs能够代表母方当归补血汤发挥对GK大鼠的肾保护作用,机制涉及氧化应激。母方中除ABCs外,其微量元素、氨基酸、多糖等其他成分也同时发挥着药效作用。

方剂现代研究概论课程实践与教学反思

本科生是当前中医药人才的主体,其科研能力的培养尤为重要,可为后续硕士研究生和博士研究生两个高等教育阶段奠定基础。在南京中医药大学基础医学院新开选修课程方剂现代研究概论,具体通过案例式教学方法,辅以教学实践,充分调动学生的主观能动性,进而了解中药方剂现代研究相关概念和研究方法及思路,常用应用理论和技能,为学习后续专业课程和参与科研实践奠定基础。最后,通过学生调查问卷的形式对教学实践进行了分析总结与反思,并对今后的教学工作提出探讨性建议。

基于脑心同治探索冠心Ⅱ号对抑郁模型大鼠海马BDNF及HPA轴的影响

目的观察中药复方冠心II号(GXII)对慢性不可预见性应激(CUMS)大鼠行为学及其对大鼠海马组织脑源性神经营养因子(BDNF),下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴的影响。方法建立CUMS模型8周后,将CUMS组随机分为模型对照组(MC)、GXII组(GXII)、氟西汀组(F),连同正常组(NC)共计4个组,连续15d灌胃GXII(2.5g·kg^(-1)·d^(-1))、氟西汀(3.5g·kg^(-1)·d^(-1))或等体积0.9%NaCl(5g·kg^(-1)·d^(-1))。采用高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠血浆和脑组织中GXII的3种主要活性成分。旷场实验和强迫游泳实验进行行为学检测。Westerm blot测定大鼠海马BDNF,下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF),促肾上腺皮质激素(ACTH)蛋白表达;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清糖皮质激素(GC)表达。结果GXII灌胃大鼠后血清及脑组织中均能测定到羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B这3种生物活性成分。与MC组大鼠相比,2.5 g/(kg·d)的GXII大鼠在旷场试验中显著增加总距离(P<0.01),缩短强迫游泳试验的不动时间(P<0.01),增加BDNF表达(P<0.01),降低CRF(P<0.05)、ACTH(P<0.01)和GC(P<0.01)的表达。结论GXII能改善CUMS大鼠抑郁样行为的作用,增加大鼠海马BDNF蛋白表达及调节HPA轴可能是其抗抑郁样作用的机制之一。GXII灌胃大鼠后血清及脑组织中测定到的羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B这3种活性单体成分可能是其抗抑郁作用的潜在物质基础。

芍药苷对抑郁大鼠海马组织形态及BDNF水平的影响

目的在大鼠强迫游泳急性抑郁动物模型上观察芍药苷的抗抑郁作用及可能机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、芍药苷组及氟西汀组,每组各10只。模型组、芍药苷组及氟西汀组强迫游泳15min建立急性抑郁模型,给药组分别灌胃芍药苷10mg/kg,氟西汀20mg/kg,24h给药3次,对照组给等量生理盐水。观察行为学开场实验;ELISA检测血清BDNF、TrkB水平及海马组织BDNF水平;病理切片观察海马组织形态。结果芍药苷能够增加大鼠运动距离(P<0.01);显著升高大鼠血清及海马组织BDNF水平(P<0.01),且对海马病理形态学有保护作用。结论芍药苷在强迫游泳急性抑郁动物模型上有抗抑郁活性,其作用机制可能涉及中枢BDNF-TrkB受体信号转导通路。

辛弗林对CUMS大鼠抑郁样行为和血清代谢组学的影响

目的通过观察分析大鼠慢性应激引起的行为学和血清代谢组变化以及辛弗林抗抑郁的有效治疗,发现潜在的抗抑郁新药先导化合物和生物标志物。方法将24只大鼠分为正常组、模型组和辛弗林组。模型组为6周慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠,用体质量变化、糖水偏好、开场实验作为抑郁评估指标,后2周辛弗林(Syn 20 mg/kg)干预治疗后采集大鼠血清进行气相色谱质谱联用(GC-MS/MS)测定,研究CUMS大鼠血清内源性代谢物变化,以及辛弗林的干预作用,寻找其抗抑郁潜在的先导化合物和生物标志物,并找到相关靶向代谢通路。结果辛弗林干预后,在增加CUMS大鼠体质量、提高糖水偏好率、增加开场运动总距离和理毛次数的同时,还能逆转CUMS大鼠血清中磷酸乙醇胺、苯甲酸、胆固醇、谷氨酸等14种代谢物的变化使其趋于正常组,并发现谷氨酰胺和谷氨酸的代谢、缬氨酸和异亮氨酸的生物合成等9条主要牵涉辛弗林的靶向代谢通路。结论辛弗林可能通过调节谷氨酰胺和谷氨酸的代谢、缬氨酸和异亮氨酸的生物合成等生物学途径发挥对CUMS大鼠抑郁样行为的调正作用。

当归补血汤及其主要活性成分阿魏酸对糖尿病抑郁症模型大鼠的影响及机制研究

目的探讨当归补血汤及其主要活性成分阿魏酸对糖尿病抑郁症(Diabetes mellitus with depression,DD)模型大鼠的影响及机制。方法将32只雄性自发性2型糖尿病(Goto-Kakizaki,GK)大鼠随机分为模型组、氟西汀组(2.20 mg·kg^-1)、当归补血汤组(4.0 g·kg^-1)和阿魏酸组(1.36 mg·kg^-1),每组8只,另取8只普通Wistar大鼠作为正常对照组。采用慢性温和不可预知性应激抑郁(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型复制方法造模,同时按上述剂量灌胃给药(10 mL·kg^-1),每日1次,连续4周。全程监测动物体质量及随机血糖;末次给药后,采用悬尾试验、强迫游泳和旷场实验观察动物行为学变化;采用ELISA法测定大鼠血清和海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)的含量;采用HE染色法进行大鼠海马组织病理形态学观察。结果与正常对照组比较,模型组大鼠体质量逐渐下降,血糖值始终明显升高(P <0.01);大鼠悬尾和强迫游泳的不动时间明显增加,而在旷场的自主运动总距离明显减少(P <0.001);血清BDNF及海马组织CREB、BDNF、TrkB的含量均明显降低(P <0.001)。与模型组比较,各给药组大鼠体质量逐渐增加,在给药2周后开始随机血糖值均明显下降(P <0.05,P <0.01);悬尾和强迫游泳不动时间明显缩短,自主运动距离明显增加(P <0.01,P <0.05);血清BDNF及海马组织CREB、BDNF、TrkB含量均明显上升(P <0.05,P <0.01)。结论当归补血汤及其主要活性成分阿魏酸能够显著改善糖尿病抑郁模型大鼠的抑郁样行为,保护海马神经元,其作用机制可能与CREB/BDNE/TrkB信号通路有关。

基于高效液相色谱技术对冠心Ⅱ号抗抑郁作用物质基础的研究

目的:在前期冠心Ⅱ号具有抗抑郁作用的研究基础上,采用高效液相色谱(HPLC)技术,通过分析冠心Ⅱ号主要活性成分在大鼠体内血清及脑组织的含量测定,揭示冠心Ⅱ号抗抑郁作用的物质基础。方法:SD大鼠灌胃冠心Ⅱ号(2.5 g/kg),30 min后处死取血清及脑组织,采用HPLC检测血清及脑组织中羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B的含量,并计算各单体成分的血脑屏障(BBB)透过率。色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸(B);柱温:35℃;流速:1.0 mL/min。结果:血清中羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B的线性回归方程分别为Y=3.9765X+0.4310(r=0.9999),Y=70.262X+69.1410(r=0.9999),Y=34.729X-2.4044(r=0.9996)。脑组织中羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B的线性回归方程分别为Y=4.5869X-0.0963(r=0.9998),Y=70.859X+100.0400(r=0.9981),Y=42.176X+18.2420(r=0.9995)。3种活性单体成分在血清及脑组织质量浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B在大鼠正常状态的BBB透过率分别为1.22%、1.27%及0.87%,三者均能透过BBB。结论:冠心Ⅱ号灌胃大鼠后血清及脑组织中均能检测到羟基红花黄色素A、阿魏酸、丹酚酸B这3种活性单体成分,这三者可能是冠心Ⅱ号抗抑郁作用的潜在物质基础,并且均能透过BBB。

当归补血汤对糖尿病合并抑郁症模型大鼠血清炎症因子的干预作用

目的:探讨当归补血汤治疗糖尿病并发抑郁症的可能作用机制。方法:40只大鼠其中8只Wistar大鼠为空白对照组,其余32只GK大鼠随机分为模型组、氟西汀组及中药高、低剂量组,每组8只。除空白对照组外,其余各组通过慢性温和不可预知性刺激(chronic mild unpredictable stimulation,CUMS)建立糖尿病并发抑郁症模型。应激造模的同时中药高、低剂量组分别按照4 g·kg^-1·d^-1和8 g·kg^-1·d^-1剂量给予当归补血汤,氟西汀组按照2.2 mg·kg^-1·d^-1剂量给予氟西汀,空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水溶液,同时检测大鼠体质量及随机血糖。灌胃28 d后,Elisa法检测大鼠血清中炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、超敏C反应蛋白(C-reactionprotein protein,CRP)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量。结果:模型组大鼠血糖一直高于空白对照组,而与模型组比较,给药后大鼠血糖明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组大鼠血清中IL-10表达显著降低,TNF-α、CRP、IL-6和IL-8的表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与模型组比较,氟西汀组、中药低剂量组和中药高剂量组大鼠血清中IL-10的表达均显著提高,但TNF-α、CRP、IL-6和IL-8的表达均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:当归补血汤可降低糖尿病并发抑郁症大鼠随机血糖水平,抑制大鼠全身炎症反应,是该方治疗糖尿病并发抑郁症的可能机制之一。