琥珀调控颈总动脉结扎脑缺血大鼠海马区神经元凋亡改善大鼠学习与记忆能力的效用部位与作用机制研究

目的琥珀调控海马区神经元凋亡改善颈总动脉结扎脑缺血大鼠学习与记忆能力的效用部位与作用机制研究。方法建立大鼠颈总动脉结扎脑缺血动物模型,给以模型动物琥珀系列溶剂提取部位,通过水迷宫实验评价琥珀提取部位对模型动物学习与记忆能力的影响。采用TUNEL染色法与蛋白印迹法分别评价琥珀提取部位对模型动物海马区细胞凋亡以及Caspase 3、Caspase 9、Bcl-2等凋亡相关蛋白表达的影响。采用小鼠海马永生化细胞系评价琥珀提取部位对抗糖氧剥夺神经元损伤的作用。结果琥珀乙酸乙酯提取部位显著改善模型大鼠学习与记忆能力,抑制海马区细胞凋亡。该提取部位还可显著提高糖氧剥夺状态下HT22细胞的存活率,并下调细胞中Caspase 3、Caspase 9和Bcl-2等凋亡通路蛋白表达水平。结论乙酸乙酯提取部位是琥珀药材改善颈总动脉结扎脑缺血大鼠的学习与记忆能力效用部位,抑制海马区细胞凋亡是其作用机制。

麋角丸改善Aβ_(1-42)海马区注射小鼠学习与记忆能力的作用机制研究

目的评价麋角丸对Aβ_(1-42)海马区注射小鼠学习与记忆能力的改善作用与作用机制研究。方法采用海马区注射β淀粉样多肽1-42(Aβ_(1-42))构建拟阿尔茨海默症(AD)小鼠模型,给以麋角丸提取物。通过Morris水迷宫实验检测小鼠的学习与记忆能力,尼氏染色法检测海马DG区神经元损伤程度,酶联免疫吸附法检测小鼠海马组织中炎症因子表达,试剂盒检测氧化应激因子表达,蛋白质印迹法检测小鼠海马区中氧化应激与凋亡相关蛋白表达。结果麋角丸显著缩短模型小鼠上台潜伏期和上台前路程,增加穿越站台次数。同时,麋角丸给药显著增加海马DG区尼氏体数量,并下调模型小鼠海马组织中炎症因子的表达,提升SOD活力,降低LDH活力和MDA表达,提高Nrf2、HO-1蛋白表达与Bcl-2/Bax比值,下调Caspase-3、Caspase-9凋亡通路蛋白表达。结论麋角丸具有改善Aβ_(1-42)海马区注射小鼠学习与记忆能力的效用,其作用途径与抑制中枢氧化应激与炎性损伤导致的神经元损伤有关。Nrf2/HO-1通路是其抗海马组织氧化损伤调控信号通路。

开心散与生脉散抗阿尔茨海默症“同病异治”作用机制网络药理学分析与中枢神经免疫调控效用验证

目的基于网络药理学方法研究开心散(KXS)与生脉散(SMS)“同病异治”抗阿尔茨海默症作用机制,并通过整体动物与离体细胞实验进行验证。方法通过数据库搜集筛选开心散与生脉散复方所含药味化学成分并预测其潜在靶点,构建复方-中药-成分-靶点网络。筛选复方共有与优势靶点,构建蛋白互作网络并进行拓扑分析,进行KEGG通路和GO功能富集分析。基于网络药理学分析获得的开心散与生脉散共性与个性的生物学GO分析结果,分别建立小鼠海马Aβ注射拟阿尔茨海默症痴呆小鼠模型与小鼠小胶质BV2细胞炎性因子损伤模型,检测相应指标,采用行为学结合生化指标分析验证网络药理学分析结果。结果筛选出开心散与生脉散复方共有成分有109个,共有靶点490个,抗AD潜在共性调控靶点375个。开心散抗AD潜在优势调控靶点92个,生脉散抗AD潜在优势调控靶点90个。淀粉样蛋白代谢与转运、cAMP与AMPK信号通路、突触功能调控等为开心散与生脉散抗AD潜在共性调控信号通路与生物学事件。NF-κB等为开心散抗AD优势调控信号通路与生物学事件;趋化因子、胆碱能突触等为生脉散抗AD优势调控信号通路与生物学事件。验证实验结果显示开心散与生脉散能够有效改善Aβ海马区注射小鼠认知功能障碍,降低小鼠海马和小胶质细胞的炎性因子表达。结论开心散与生脉散能通过共有及各自优势靶点发挥抗AD作用。