现代教学方法在中药药理学与药理学教学融合中的应用

中药药理学与药理学是中医药专业学生的专业基础课,内容有一定相似性,但又各有特点,联系密切。使用TBL、PBL、CBL等现代教学方法,融合两门课程的重要知识点,有利于学生把握知识脉络,认识中药与西药作用的各自优势,形成中西医结合的临床思维。

骨痹方活性成分治疗骨关节炎的抗炎机制研究

目的探究骨痹方活性成分治疗骨关节炎的抗炎机制。方法体外培养正常人软骨细胞,脂多糖(LPS)刺激炎症,,细胞分为对照组(正常培养)、模型组(10μg·mL^(-1) LPS)、槲皮素组(10μg·mL^(-1) LPS+8μmol·L^(-1)槲皮素)、芒柄花素组(10μg·mL^(-1) LPS+50μmol·L^(-1)芒柄花素)、柚皮苷组(10μg·mL^(-1) LPS+10μmol·L^(-1)柚皮苷)、川续断皂苷Ⅵ组(10μg·mL^(-1) LPS+50μmol·L^(-1)川续断皂苷Ⅵ)、β-蜕皮甾酮组(10μg·mL^(-1) LPS+50μmol·L^(-1)β-蜕皮甾酮)。用细胞计数试剂盒8(CCK8)检测软骨细胞活力,用蛋白质印迹法检测高尔基体外周膜蛋白p65蛋白(P65)、核因子E2相关因子2(Nrf2)核蛋白蛋白表达水平。结果对照组、模型组、槲皮素组、芒柄花素组、柚皮苷组、川续断皂苷Ⅵ组、β-蜕皮甾酮组的细胞活力分别为(103.10±8.55)%、(62.41±2.35)%、(76.92±1.74)%、(77.01±0.60)%、(80.39±3.06)%、(79.43±0.94)%和(55.20±0.99)%,Nrf2蛋白相对表达水平分别为1.00±0.00、1.01±0.09、1.30±0.15、0.91±0.15、1.23±0.25、0.71±0.19、1.51±0.13和1.26±0.15,P65蛋白相对表达水平分别为1.00±0.00、2.24±0.85、0.74±0.33、1.49±0.29、0.97±0.06、1.33±0.07、1.67±0.22和1.52±0.17,炎症介质iNOS相对表达分别为1.00±0.00、1.52±0.27、1.07±0.24、1.25±0.12、1.01±0.30、1.44±0.12、1.07±0.18和1.11±0.16。上述结果,模型组与对照组比较,差异具有统计学意义(均P<0.05);槲皮素组、芒柄花素组、柚皮苷组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01和P<0.001);川续断皂苷Ⅵ组和β-蜕皮甾酮组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论骨痹方活性成分槲皮素、芒柄花素和柚皮苷均能够激活Nrf2-HO-1信号,进而抑制核因子-κB(NF-κB)通路的活化发挥抗炎作用缓解骨关节炎。

芒柄花素调控核因子-κB信号通路缓解软骨细胞炎症损伤作用

目的观察芒柄花素对C28/I2软骨细胞炎症损伤的影响,研究芒柄花素干预核因子κB(NF-κB)信号通路缓解C28/I2软骨细胞炎症损伤的机制。方法筛选芒柄花素给药浓度,建立脂多糖(LPS)诱导C28/I2细胞炎症损伤模型。实验分组:正常对照组、LPS组、芒柄花素小剂量组(12.5μmol·L^(-1))、芒柄花素中剂量组(25μmol·L^(-1))、芒柄花素大剂量组(50μmol·L^(-1))。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测芒柄花素对软骨细胞活力的影响。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测C28/I2细胞培养上清液白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白质印迹法检测C28/I2细胞内核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)、核因子κB p65(NF-κB p65)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达。结果CCK-8实验结果显示,与正常对照组比较,10μg·mL^(-1) LPS组软骨细胞活力显著下降,给予芒柄花素后软骨细胞活力明显提高(P<0.01)。ELISA实验结果显示,与LPS组比较,给予芒柄花素可降低C28/I2细胞上清液IL-6和TNF-α水平(P<0.01或P<0.05)。蛋白印迹实验结果显示,与LPS组比较,芒柄花素可以剂量依赖性地下调NF-κB通路的磷酸化水平(P<0.01或P<0.05)。结论芒柄花素可缓解软骨细胞炎症损伤,其机制与调控NF-κB信号通路磷酸化活化有关。

当归芍药散对缩宫素诱导的大鼠在体子宫收缩及血管舒缩因子的影响

目的研究当归芍药散对大鼠在体子宫收缩、子宫内血管舒缩因子的影响,探讨其治疗原发性痛经的作用机制。方法雌性未孕SD大鼠随机分为模型组,维拉帕米(100μg/kg)阳性组,当归芍药散低、中、高剂量(生药4、8、16 g/kg)组,每天给药1次,连续给药7 d。第7天大鼠sc己烯雌酚4 mg/kg,次日在麻醉状态下观察给予缩宫素前后大鼠子宫收缩变化,同时测定药物对子宫组织匀浆中一氧化氮(NO)及内皮素(ET)量的影响。结果当归芍药散显著提高正常大鼠子宫收缩的平均肌张力,而对缩宫素诱导的大鼠子宫收缩具有显著的抑制作用;对缩宫素处理前后的大鼠子宫收缩频率、幅度、平均肌张力及子宫活动力等的变化率有显著抑制作用;能够显著升高缩宫素处理后大鼠子宫NO水平,降低ET水平,使NO与ET比值显著上升。结论当归芍药散可能通过抑制子宫收缩,调节血管舒缩物质,改善子宫供血,从而对原发性痛经产生治疗作用。