伤科消炎水凝胶贴膏对骨关节炎模型大鼠的改善作用

目的 研究伤科消炎水凝胶贴膏对骨关节炎模型大鼠的改善作用。方法 将大鼠随机分为空白组、模型组、扶他林组(200 mg/只)、伤科消炎膏组(500 mg/只,含伤科消炎流浸膏50 mg)和伤科消炎水凝胶贴膏组(200 mg/只,含伤科消炎流浸膏50mg),每组8只。除空白组外,其余各组通过在大鼠右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸构建骨关节炎模型,然后涂抹相应药物,每天换药1次,连续14 d。检测大鼠膝关节肿胀程度,观察大鼠膝关节磁共振成像特征;检测大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;观察大鼠膝关节组织的病理形态学特征,并进行组织病理学评分及软骨Mankin评分;检测大鼠膝关节组织中IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠膝关节严重肿胀,可见明显关节腔积液,外侧半月板前角呈团片状磨损;血清中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平以及组织病理学评分和Mankin评分均显著升高(P<0.05);膝关节组织中IL-1β、IL-6、TNF-α阳性蛋白表达均增加。与模型组比较,伤科消炎水凝胶贴膏组大鼠膝关节肿胀程度降低,可见少量关节腔积液,半月板形态完全正常;组织病理学评分和Mankin评分均显著降低(P<0.05);血清中上述炎症因子水平均降低(P<0.05),膝关节中上述炎症因子蛋白的阳性表达均减少。结论 伤科消炎水凝胶贴膏可改善大鼠骨关节炎,其作用机制可能与降低关节组织和血清中炎症因子水平有关。

不同干燥方法对金银花多元功效成分和感官品质的影响

为研究传统与现代干燥方法对金银花药材质量的影响,得出金银花药材最优干燥方法,制定金银花不同干燥加工方案,并运用高效液相色谱法测定样品中与金银花中医功效密切相关的绿原酸、木犀草苷、异绿原酸C、芦丁的含量,考察不同干燥方法对其化学成分含量和性状外观的影响,再运用逼近理想值排序法(TOPSIS分析法)对45批不同干燥样品进行全面评价,最终得出金银花药材最优干燥方法。结果表明:传统与现代干燥方法对金银花中绿原酸、木犀草苷、异绿原酸C、芦丁成分含量的影响较大,杀青有利于提高金银花中有效成分的含量和保持外观性状特征;TOPSIS综合评价结果显示:蒸气杀青60 s,热风控温60℃干燥得分最高。本研究建立了准确高效的分析评价金银花中黄酮类与有机酸类成分的方法,为金银花现代干燥加工方法的建立与推广提供了技术支撑,促进了金银花产地加工的规范化与规模化发展,为金银花资源的循环利用提供了理论基础与科学依据。

基于多指标成分含量测定的肺宁合剂与中药配方颗粒比较

采用高效液相色谱(HPLC)建立肺宁合剂传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂中麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素以及白花前胡乙素7种指标成分的分析方法,对二者所含的多指标成分进行分析评价,并探讨差异成分的作用途径和通路。高效液相色谱紫外检验(HPLC UV)色谱条件为Thermo C_(18)endcapped色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以体积分数0.1%H_(3)PO_(4)H_(2)O C_(2)H_(3)N为流动相系统梯度洗脱,柱温30℃,检测波长210 nm,流速0.8 mL/min;进样量10μL。利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、全球蛋白质数据库平台(UniPort)数据库平台过滤差异成分作用靶点,利用Bioconductor对作用靶点进行基因本体论(GO)功能注释和基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果显示:所建立的方法线性关系良好,精密度、稳定性、重复性及加样回收率均符合液相含量测定的要求。肺宁合剂传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂中均含有7种指标成分,但肺宁合剂传统饮片汤剂中的麻黄碱、伪麻黄碱和甘草苷含量显著高于中药配方颗粒汤剂,而苦杏仁苷、甘草酸、白花前胡甲素和白花前胡乙素含量无明显差异。3个差异成分可通过干预24个靶点、9条通路影响肺宁合剂功效的发挥。研究结果可为肺宁合剂质量标准的提升提供参考。

肉桂配伍“黄柏-知母”药对对肾盂肾炎大鼠炎症因子的影响

目的:探讨肉桂配伍"黄柏-知母"药对对肾盂肾炎大鼠肾脏及血清样本中炎症因子的影响,初步探讨肉桂反佐配伍治疗肾盂肾炎的分子机制。方法:建立肾盂肾炎大鼠模型,设立对照组、模型组、阳性药组(采用盐酸左氧氟沙星)、滋肾通关方组(采用肉桂配伍"黄柏-知母"药对)及药对组(采用单纯"黄柏-知母"药对)进行比较;以酶联免疫吸附试剂盒检测炎症因子[白细胞介素(IL)1α、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、CXCL2]在各组大鼠血清中的含量,进行药效学考察。结果:(1)阳性药组、滋肾通关方组及药对组大鼠机体状况均有改善。通过比较病理切片,滋肾通关方组与阳性药组大鼠的改善情况明显优于"黄柏-知母"药对组。(2)模型组大鼠的IL-1α、IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1及CXCL2含量均较对照组更高,而且模型组大鼠血清IL-α、CXCL2含量与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)阳性药组、滋肾通关方组及药对组大鼠体内炎症因子含量相对模型组均有降低;其中,滋肾通关方组大鼠血清IL-1α含量、阳性药组大鼠血清TNF-α含量与模型组的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:"黄柏-知母"药对反佐配伍少量肉桂后,能够促进黄柏、知母中活性成分下调IL-1α、IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1及CXCL2等炎症因子的表达,影响下游炎症因子的免疫应答,进而起到抗炎以及保护肾脏等泌尿系统器官的作用。

基于质量源于设计(QbD)理念的滋肾通关胶囊醇提工艺质量控制研究

目的基于质量源于设计(QbD)理念对滋肾通关胶囊的醇提工艺进行优化,提升提取工艺过程的质量控制水平。方法以溶剂倍数、浸泡时间及提取时间为关键工艺参数;以干浸膏得率和指标成分黄柏碱、芒果苷和小檗碱含量为关键质量属性;采用Box-Behnken响应面法建立模型,构建多个指标重叠的设计空间,选取较优操作空间,并进行验证。结果滋肾通关胶囊提取工艺操作空间:溶剂倍数为7倍~9倍,浸泡时间为11~20 h,提取时间为2.1~2.5 h。该操作空间下的干浸膏得率为29%~37%,黄柏碱的含量大于0.14%,芒果苷的含量大于0.22%,小檗碱的含量大于1.2%。结论QbD理念有助于滋肾通关胶囊提取工艺的提升,构建质量稳定的提取操作空间。

HPLC-DAD法同时测定养生丸中4种活性成分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定医院制剂养生丸中芍药苷、阿魏酸、羌活醇、异欧前胡素4种活性指标成分的含量。方法:色谱柱Agilent Eclipse XDB-C18(150mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),体积流量1.0mL/min;柱温30℃;样品盘温度10℃;检测波长为230nm及315nm;进样量10μL。结果:养生丸中芍药苷、阿魏酸、羌活醇、异欧前胡素的质量浓度在0.954~95.396μg·mL^(-1)(r=0.999 7)、0.307~30.68μg·mL^(-1)(r=0.999 6)、1.256~125.6μg·mL^(-1)(r=0.999 5)、0.72~72.0μg·mL^(-1)(r=0.999 5)范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率(n=6)分别为98.89%(RSD=0.98%)、100.03%(RSD=0.74%)、101.10%(RSD=1.73%)、103.29%(RSD=0.45%)。结论:该方法经方法学验证,具有专属性强、操作简单、准确快速的优点,可用于医院制剂养生丸的质量控制。

基于网络药理学探讨抗感方抗病毒作用机制

目的基于网络药理学方法研究抗感方治疗冠状病毒、呼吸道合胞病毒(RSV)的作用机制。方法借助TCMSP数据库筛选出抗感方活性成分及作用靶点,通过Gene Cards数据库筛选出冠状病毒、RSV的疾病靶点。利用Cytoscape软件、STRING数据库分别构建“药物-成分-靶点-疾病”的相互作用和潜在靶点PPI网络图,并进行GO和KEGG富集分析,最后进行分子对接验证。结果抗感方中174种潜在活性成分,涉及51个抗病毒关键靶点,可能通过IL-17、AGE-RAGE、TNF、Toll样受体、NOD样受体等炎症、免疫信号通路发挥抗病毒作用。16种主要活性成分对冠状病毒和RSV关键靶蛋白(Mpro与RSV-F)均有较好地结合力。结论抗感方中多种活性成分通过多靶点、多通路协同作用发挥对冠状病毒与RSV的干预作用,为临床应用于多种病毒的防治提供理论依据。

补阳还五汤常压煎煮工艺优选

目的:考察两煎常压煎药机不同煎煮条件对补阳还五汤剂质量的影响。方法:采用单因素试验考察加水量水平,以总固体、阿魏酸及黄芪甲苷含量为综合评价指标,通过正交试验考察加水量、浸泡时间、煎煮次数及煎煮时间对煎煮工艺的影响,利用HPLC测定阿魏酸及黄芪甲苷含量。结果:方差分析表明各因素对煎煮工艺的影响顺序为煎煮次数>加水量>煎煮时间>浸泡时间,其中煎煮次数具有显著性影响,其余3个因素均无显著性影响。最佳常压煎煮工艺为加8～10倍量水浸泡30 min,煎煮2次,每次60 min。结论:优选的工艺稳定可行,为两煎常压煎药机制备含黄芪甲苷及阿魏酸的中药汤剂提供理论依据。