我国中医药服务发展现状、问题及对策建议

对2016~2021年全国中医药服务体系与服务能力、保障水平发展现状进行分析,发现我国中医药服务面临着医疗资源总量相对不足、中医药服务分布不均、中医药特色优势发挥不充分、中医乡村医生流失严重等问题。提出了落实中医药发展政策和财政保障、推动优质中医资源扩容和均衡布局、建强中医药服务体系和服务能力等对策建议。

中医药治疗围绝经期综合征的研究进展

围绝经期综合征的发生会对女性身心健康造成影响,目前多采用激素替代治疗。中医药是治疗围绝经期综合征的有效方法。本文对近年来国内外有关中医药治疗围绝经期综合征文献报道进行归纳、整理和总结。通过中医药治疗可以改善围绝经期综合征临床症状,提升生活质量,为今后治疗提供思路。

长链非编码RNA与骨性关节炎

背景:骨性关节炎作为中老年常见疾病,发病机制尚不清晰。长链非编码RNA通过多种途径参与骨性关节炎发病过程,如调控翻译、促进或者抑制mRNA表达、吸附miRNA等。目的:综述多种长链非编码RNA在骨性关节炎中的作用机制及研究进展。方法:检索中国知网、万方数据库、维普数据库、PubMed、Web of Science和Sciencedirect数据库,以“osteoarthritis,degenerative joint disease,degenerative arthritis,OA,LncRNA,long non-coding RNA,long noncoding RNA,long intergenic non-coding RNA”为英文检索词,以“骨性关节炎,骨关节炎,OA,长链非编码RNA,长链非编码核糖核酸,LncRNA”为中文检索词,检索1976年至2024年5月发表的所有相关文献,并对其进行筛选、归纳、分析、总结,最后纳入93篇文献进行综述。结果与结论:①收集了目前与骨性关节炎关系研究较多且较深入的25种长链非编码RNA;②长链非编码RNA可以充当miRNA的分子海绵,作为竞争性内源性RNA竞争性吸附miRNA,进而影响下游靶点;③长链非编码RNA可以调控软骨细胞的凋亡与增殖、软骨细胞外基质降解以及炎症反应等生理病理进程;④长链非编码RNA有望成为骨性关节炎临床诊断及治疗预后的生物标志物和潜在治疗靶点,未来可能会成为骨性关节炎临床治疗的新策略。

扶正解毒颗粒成型工艺优化

目的优化扶正解毒颗粒成型工艺。方法在单因素试验、Plackett-Burman试验基础上,以辅料比、乙醇体积分数、粘合剂质量分数、乙醇用量、干燥时间、干燥温度为影响因素,成型率、休止角、溶化率、吸湿率的综合评分为评价指标,G1-熵权法结合Box-Behnken响应面法优化扶正解毒颗粒成型工艺。结果最佳条件为辅料比(糊精与乳糖)1∶2,润湿剂70%乙醇(含1.4%HPMC),45℃干燥60 min,综合评分为97.61分。结论该方法稳定可行,操作简便,可用于扶正解毒颗粒的后续放大生产。

重组鼠IFN-γ腺病毒诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立和观察

目的:通过向C57Bl/6J小鼠腹腔注射IFN-γ腺病毒(Ad-mIFN-γ)建立细胞因子释放综合征(CRS)的动物模型。方法:构建Ad-mIFN-γ及对照Ad-lacZ腺病毒载体,分别以MOI=100体外转染小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测其对细胞mIFN-γ分泌的影响。将40只雌性C57Bl/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、载体对照组、病毒低、中、高剂量组(每组8只),分别向各组小鼠腹腔注射PBS(200μL)、Ad-lacZ(2×10^(7)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(5×10^(6)PFU/只)、Ad-mIFN-γ(1.5×10^(7)PFU/只)和Ad-mIFN-γ(2×10^(7)PFU/只)。每日观测小鼠的体质量及生存情况;第3天时采用流式细胞术检测小鼠外周血和脾内单核细胞(CD11b^(+))、巨噬细胞(CD11b^(+)/CD86^(+))比例,免疫荧光染色法检测脾内CD11b^(+)的单核细胞比例;第9天时采用流式细胞术检测小鼠血清中细胞因子的分泌水平;第14天,采用颈椎脱臼法处死小鼠,H-E染色法观察小鼠肝、脾、肺和肾的病理和组织学变化。结果:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,在第3天检测到巨噬细胞分泌mIFN-γ达到峰值(118.34±2.90)pg/mL,并在一周内持续高分泌mIFN-γ,Ad-lacZ对照组IFN-γ分泌水平较低后,第3天时为(0.17±0.08)pg/mL。小鼠腹腔注射Ad-mIFN-γ后,在14 d内病毒低、中剂量组无小鼠死亡,病毒高剂量组小鼠体质量持续减轻(P<0.001);第3天,病毒高剂量组小鼠外周血和脾组织内单核细胞、巨噬细胞比例较对照组和中剂量组均显著增加(P<0.05或P<0.01);第9天,病毒低、中、高剂量组小鼠血清中mIFN-γ、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-1、TNF-α等细胞因子的水平均显著升高(P<0.001);10 d内病毒高剂量组小鼠死亡率达100%。组织病理检测可见病毒高剂量组小鼠的肝、脾、肺、肾组织有明显损伤。结论:Ad-mIFN-γ体外感染小鼠原代腹腔巨噬细胞后,可以快速分泌mIFN-γ;腹腔注射高剂量(2×10^(7)PFU/只)Ad-mIFN-γ导致小鼠出现CRS典型表现,可作为CAR-T细胞治疗诱发CRS的动物模型。

原发性高血压合并颈动脉粥样硬化六经辨证临床研究

目的探讨原发性高血压合并颈动脉粥样硬化病人中医六经证型的临床特点。方法回顾性分析418例原发性高血压合并颈动脉粥样硬化病人的临床资料,基于六经辨证理论,分析性别、年龄及常见并发症与六经病的相关性。结果①418例病人六经证型分布依次为少阴热化>少阳病>少阴寒化>厥阴病>太阳病>阳明病>太阴病。②单经病最常见,两经合病最多的是少阳·少阴合病与少阴·厥阴合病,三经并病仅出现6例。③症状出现例数占比为心慌>失眠多梦>昏沉>胸闷>头晕眼花>疲劳乏力>胸痛。④通过对六经病与年龄、性别、合并症的相关性分析发现:女性更易出现阳明病,年龄越大越容易出现阳明病;患有胆囊炎/胆结石的病人更易出现厥阴病。结论高血压合并颈动脉粥样硬化的六经证候以少阴热化证为主,虚证多于实证。年龄、性别是阳明病的危险因素,胆囊炎/胆结石是厥阴病的危险因素,可以作为高血压合并颈动脉粥样硬化病人临床证候分型的客观依据。

IL-12-CAR-T细胞诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立及观察

目的:通过构建表达IL-12的小鼠CAR-T细胞,探讨经尾静脉将其输注于小鼠体内建立细胞因子释放综合征(CRS模型的方法。方法:构建基于靶向鼠源CD19的CAR分子,包装逆转录病毒载体并感染小鼠T细胞构建mCD19-CAR-T、mCD19/IL-12-CAR-T细胞。通过构建小鼠体内胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,检测mCD19/IL-12-CAR-T细胞的抗肿瘤活性,ELISA法检测两种CAR-T细胞IL-12和IFN-γ分泌水平;经小鼠尾静脉输注mCD19/IL-12-CAR-T细胞构建CAR-T细胞CRS小鼠模型,流式细胞术检测小鼠血清中IL-6、MCP-1、IL-1、IL-10、TNF-α、IFN-γ等细胞因子的含量,H-E染色法观察荷瘤小鼠肝、脾、肺和肾的病理组织学变化。结果:经过培养扩增的mCD19/IL-12-CAR-T细胞能有效分泌IL-12,CAR阳性率达(56.9±5.4)%;与非靶细胞Panc02或靶细胞Panc02-CD19共培养时,均能高分泌IFN-γ。成功构建小鼠胰腺癌Panc02-CD19细胞移植瘤模型,经小鼠尾静脉注射1×10^(6)个mCD19/IL-12-CAR-T细胞能显著抑制移植瘤的生长,但未能诱发严重CRS;输注2×10^(6)个mCD19/IL-12-CAR-T细胞后,小鼠出现体质量减轻、血清炎性因子水平升高、组织损伤,最终导致死亡等一系列典型CRS表现。结论:成功构建IL-12-CAR-T细胞诱发的小鼠CRS模型,其稳定性好、重复性高,具有广泛的应用前景。

梓醇对氧糖剥夺/复氧复糖损伤成熟人神经母细胞瘤细胞的修复作用及其机制

目的观察梓醇对氧糖剥夺/复氧复糖损伤的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y(SH-SY5Y细胞)的修复作用,并探讨其作用机制。方法将SH-SY5Y细胞分为对照组、诱导组、模型组、梓醇组。对照组:SH-SY5Y细胞不做任何处理;诱导组:用ATRA诱导SH-SY5Y细胞72 h,将其诱导为成熟神经元;模型组:ATRA诱导SH-SY5Y细胞72 h后,将完全培养基换成无糖的EBSS溶液置于三气培养箱(氧气1%,二氧化碳5%,氮气94%)4 h,氧糖剥夺结束后换回完全培养基(含糖),复氧12 h;梓醇组:细胞经模型组同样处理后,加入含不同浓度梓醇(50、100、200μmol/L)的完全培养基常规培养72 h。采用CCK-8法检测各组细胞的活力;细胞划痕实验观察细胞的迁移、穿越能力;β-Ⅲ-tubulin免疫荧光染色标记轴突,并测量其长度;Western blotting法检测细胞中神经生长相关蛋白(GAP43)、骨桥蛋白(OPN)、磷酸化的胰岛素生长因子1受体(p-IGFR)、抑癌基因(PTEN)、雷帕霉素分子靶点(mTOR)、磷酸化核糖体S6蛋白(p-S6)。结果与对照组相比,诱导组存活率升高(P<0.0001);与诱导组相比,模型组存活率降低(P<0.0001);不同浓度梓醇组存活率均有升高(P均<0.05),各浓度组之间比较,P>0.05。对照组细胞胞体圆润,轴突较短,胞体与胞体之间几乎没有轴突连接;诱导组细胞轴突较长并且相互交织,形成神经网络;与诱导组相比,模型组数量减少,胞体扁平,轴突回缩;与模型组比较,梓醇组神经元数量增多,轴突长度获得一定的恢复;与空白对照组相比,诱导组轴突长度延长;与诱导组相比,模型组轴突长度缩短(P<0.001);不同浓度梓醇组神经元轴突长度均延长(P均<0.01),而不同浓度梓醇组之间比较,P>0.05。与模型组相比,不同浓度梓醇组48 h后的划痕面积均小(P均<0.05),不同浓度梓醇组之间比较,P>0.05。与诱导组比较,模型组PTEN相对表达量升高(P<0.05),OPN降低(P<0.05);与模型组比较,不同浓度梓醇组GAP43、OPN、p-IGFR、mTOR及p-S6蛋白相对表达量均升高,PTEN蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。结论梓醇对氧糖剥夺/复氧复糖损伤的SH-SY5Y细胞具有修复作用,其作用机制可能是通过上调OPN表达,诱导细胞表面IGFR受体磷酸化成为p-IGFR,进而激活mTOR通路,同时降低PTEN的表达以减轻其对mTOR通路的抑制作用,使细胞内在生长能力被充分启动,从而达到促进神经细胞迁移、轴突发芽和生长的作用。50、100、200μmol/L梓醇对氧糖剥夺/复氧复糖损伤的SH-SY5Y细胞修复作用相当。

免疫球蛋白A血管炎病因及发病机制的研究进展

免疫球蛋白A血管炎(immunoglobulin A vasculitis,IgAV),也称过敏性紫癜,病因及发病机制较为复杂,目前尚未完全阐明。最新研究表明,新型冠状病毒及相关疫苗、人乳头瘤疫苗及其他生物制剂等也可以诱发IgAV。大多研究认为,半乳糖缺陷型IgA1(galactose-deficient IgA1,Gd-IgA1)及含Gd-IgA1的免疫复合物形成在IgAV发病机制中起至关重要的作用。也有假设提出IgAV的发生与IgA1和抗内皮细胞抗体的结合有关。此外,遗传学也是IgAV研究的重点。该文综述IgAV病因的新进展,并总结Gd-IgA1、含Gd-IgA1的免疫复合物、抗内皮细胞抗体和IgA1的结合物、T细胞免疫及遗传因素在IgAV发病机制中的作用。

华蟾素对巨噬细胞炎症因子风暴的抑制作用及其机制研究

目的:探讨华蟾素对静息状态下单核细胞和激活状态下巨噬细胞分泌的细胞因子相关影响及其分子机制。方法:佛波酯诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,加入脂多糖培养以激活巨噬细胞活化,建立巨噬细胞活化模型。在模型组的基础上加入华蟾素共培养24 h作为实验组。用CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测巨噬细胞活化,多重微球流式免疫荧光发光法检测细胞因子,转录组测序探讨华蟾素调控的基因表达谱,并通过实时定量聚合酶链式反应和蛋白免疫印迹对显著变化的分子进行了验证。结果:华蟾素注射液原液加入培养基稀释的华蟾素(1∶25)可显著抑制静息的单核细胞增殖(P<0.01)并诱导细胞凋亡(P<0.01),对激活的巨噬细胞增殖的抑制和凋亡诱导更明显(P<0.001,P<0.001)。华蟾素显著抑制巨噬细胞活化并显著下调激活的巨噬细胞释放的炎性细胞因子(IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-8)(P<0.001),其作用机制是通过抑制TLR4/MYD88/P-IκBa信号通路来实现。结论:华蟾素通过TLR4/MYD88/P-IκBa通路抑制巨噬细胞过度激活产生的炎症因子,有望应用于炎症因子过度释放相关疾病的研究与治疗。

周仲瑛从风痰瘀论治颅内炎性肉芽肿致头痛验案赏析

周仲瑛教授是南京中医药大学终身教授，首届国医大师，悬壶桑梓70余载，善治内科急难重症，屡起沉疴，临床辨治倡导审证求机，重视病机辨证，针对复杂难治疾病采用复法立方，据此辨治颅内肿瘤百余例，每多获效[1-2]。笔者有幸跟师多年，兹撷取周老治疗颅内炎性肉芽肿导致顽固性头痛验案1则介绍如下，以飨同道。

蒲参胶囊对大鼠脑缺血/再灌注后GAP-43和β-TubulinⅢ蛋白表达的影响

目的观察蒲参胶囊对大鼠脑缺血/再灌注后梗死区周边组织生长相关蛋白43(GAP-43)及β微管蛋白Ⅲ(β-TubulinⅢ)表达的影响。方法将健康SD大鼠随机分成蒲参胶囊低、中、高剂量组,假手术组和模型组。通过线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)脑缺血再灌注模型,术后高剂量组(250 mg/200 g)、中剂量组(125 mg/200 g)、低剂量组(62.5 mg/200 g)每日予灌胃给药1次,假手术、模型组给予0.9%氯化钠注射液灌胃。分别在术后第1、7、14日行神经功能缺损评分(NSS),用Western blotting检测梗死周边区GAP-43和β-TubulinⅢ的蛋白表达情况。结果通过NSS评分,蒲参胶囊对脑缺血/再灌注大鼠的神经功能损伤的恢复有一定的改善趋势,Western blotting检测显示,与模型组比较,蒲参胶囊中剂量组在术后7 d时,可提高GAP-43和β-TubulinⅢ蛋白水平(P <0.05或P <0.05);中剂量组在术后14 d,β-TubulinⅢ的蛋白水平也处于明显升高状态(P <0.05)。结论蒲参胶囊在一定程度上可提高GAP-43及β-TubulinⅢ的蛋白表达水平,提示蒲参胶囊具有促进脑缺血损伤后的神经再生修复的作用。

论“全力扶正、尽力攻毒”的抗癌基本原则

笔者认为"全力扶正、尽力攻毒"应该是中医抗癌的基本原则。"全力扶正"是抗癌的根本;"尽力攻毒"是抗癌的关键。扶助正气,增强机体抗癌能力,抑制癌症,"养正积自消";攻除癌毒,消除癌毒损害,保护正气,"毒除正自安"。"全力扶正、尽力攻毒"可成为晚期癌症患者带瘤生存、延长生命的有效治则。