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嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2参与狼疮小鼠肾脏损害的机制研究
1
作者
郑媛媛
唐小军
+4 位作者
章雅琦
米合热阿依·阿布都克尤木
朱延通
李文静
冯学兵
《中华风湿病学杂志》
CAS
CSCD
2024年第9期648-655,I0003,共9页
目的通过嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2(Ear2)髓系细胞条件性敲除小鼠探讨其在狼疮发病中的作用及参与肾脏损害的可能机制。方法利用规律间隔成簇短回文重复序列关联基因9(CRISP/Cas9)技术构建Ear2髓系细胞条件性敲除小鼠模型,...
目的通过嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2(Ear2)髓系细胞条件性敲除小鼠探讨其在狼疮发病中的作用及参与肾脏损害的可能机制。方法利用规律间隔成簇短回文重复序列关联基因9(CRISP/Cas9)技术构建Ear2髓系细胞条件性敲除小鼠模型,应用PCR鉴定小鼠基因型。实验分为3组:CKO+R848组,对照+R848组,对照组。R848处理敲除鼠和同型对照鼠,评估小鼠狼疮样病变发生情况。荧光实时定量PCR法检测小鼠肾脏中Toll样受体(TLR)7/8和炎症因子的表达。流式细胞术检测狼疮小鼠肾脏中巡逻单核细胞(PMOs)的比例,免疫荧光法分析Ear2和PMOs在肾组织中的空间分布。R848体外刺激条件性敲除(CKO)和对照小鼠的骨髓细胞,流式细胞术检测PMOs比例变化。采用单因素方差分析对3组进行比较。结果髓系细胞条件敲除Ear2小鼠构建后PCR显示基因型为Lyz2^(ki/wt)Ear2^(fl/fl),敲除鼠骨髓细胞中Ear2 mRNA水平显著下调[(1.03±0.26)与(0.22±0.15),t=6.65,P<0.001]。与对照+R848组相比,CKO+R848组小鼠狼疮表型得到改善,生存率有上升趋势(6/10与7/8,χ^(2)=1.51,P=0.220),病理结果提示CKO+R848组小鼠肾脏病变减轻。CKO+R848小鼠肾脏组织中TLR7表达水平降低[(1.02±0.09)与(0.53±0.04),t=5.13,P=0.003],同时PMOs浸润减少[(62.00±3.38)%与(52.36±0.68)%,t=2.80,P=0.023],免疫荧光结果显示Ear2和PMOs在肾组织共定位。体外R848刺激引起对照组PMOs比例的增多[(3.99±0.59)%与(33.48±1.38)%,t=-33.84,P<0.001],敲除Ear2可以抑制TLR7引起的PMOs的增多[(14.33±1.72)%与(16.10±1.44)%,t=-1.37,P=0.220]。结论Ear2条件性敲除可减轻狼疮小鼠发病,尤其是肾脏损害。其机制与抑制TLR7通路激活、减少PMOs局部浸润有关。
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关键词
红斑狼疮
系统性
TOLL样受体7
单核细胞
嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2
原文传递
题名
嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2参与狼疮小鼠肾脏损害的机制研究
1
作者
郑媛媛
唐小军
章雅琦
米合热阿依·阿布都克尤木
朱延通
李文静
冯学兵
机构
南京中医药大学鼓楼临床医学院、南京鼓楼医院风湿免疫科
南京
大学
医学院
附属
鼓楼
医院
风湿
免疫
科
出处
《中华风湿病学杂志》
CAS
CSCD
2024年第9期648-655,I0003,共9页
基金
国家自然科学基金项目(81971517,82302040)。
文摘
目的通过嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2(Ear2)髓系细胞条件性敲除小鼠探讨其在狼疮发病中的作用及参与肾脏损害的可能机制。方法利用规律间隔成簇短回文重复序列关联基因9(CRISP/Cas9)技术构建Ear2髓系细胞条件性敲除小鼠模型,应用PCR鉴定小鼠基因型。实验分为3组:CKO+R848组,对照+R848组,对照组。R848处理敲除鼠和同型对照鼠,评估小鼠狼疮样病变发生情况。荧光实时定量PCR法检测小鼠肾脏中Toll样受体(TLR)7/8和炎症因子的表达。流式细胞术检测狼疮小鼠肾脏中巡逻单核细胞(PMOs)的比例,免疫荧光法分析Ear2和PMOs在肾组织中的空间分布。R848体外刺激条件性敲除(CKO)和对照小鼠的骨髓细胞,流式细胞术检测PMOs比例变化。采用单因素方差分析对3组进行比较。结果髓系细胞条件敲除Ear2小鼠构建后PCR显示基因型为Lyz2^(ki/wt)Ear2^(fl/fl),敲除鼠骨髓细胞中Ear2 mRNA水平显著下调[(1.03±0.26)与(0.22±0.15),t=6.65,P<0.001]。与对照+R848组相比,CKO+R848组小鼠狼疮表型得到改善,生存率有上升趋势(6/10与7/8,χ^(2)=1.51,P=0.220),病理结果提示CKO+R848组小鼠肾脏病变减轻。CKO+R848小鼠肾脏组织中TLR7表达水平降低[(1.02±0.09)与(0.53±0.04),t=5.13,P=0.003],同时PMOs浸润减少[(62.00±3.38)%与(52.36±0.68)%,t=2.80,P=0.023],免疫荧光结果显示Ear2和PMOs在肾组织共定位。体外R848刺激引起对照组PMOs比例的增多[(3.99±0.59)%与(33.48±1.38)%,t=-33.84,P<0.001],敲除Ear2可以抑制TLR7引起的PMOs的增多[(14.33±1.72)%与(16.10±1.44)%,t=-1.37,P=0.220]。结论Ear2条件性敲除可减轻狼疮小鼠发病,尤其是肾脏损害。其机制与抑制TLR7通路激活、减少PMOs局部浸润有关。
关键词
红斑狼疮
系统性
TOLL样受体7
单核细胞
嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2
Keywords
Lupus erythematosus,systemic
Toll-like receptor 7
Monocytes
Eosinophil-associated ribonuclease A family member 2
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2参与狼疮小鼠肾脏损害的机制研究
郑媛媛
唐小军
章雅琦
米合热阿依·阿布都克尤木
朱延通
李文静
冯学兵
《中华风湿病学杂志》
CAS
CSCD
2024
0
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