用杆状病毒双穿梭载体表达系统表达HCV结构基因及HCV病毒样颗粒装配的初步观察

利用长RT PCR技术 ,一次性克隆出HCV的结构基因C、E1、E2及部分 5’UTR ,经测序 ,验证了其正确性。将克隆基因插入杆状病毒双穿梭载体系统的转移载体 ,经转座并转染sf9细胞 ,得到重组病毒Bmhce ,经SDS PAGE和ELISA测定 ,表明HCV结构基因在重组病毒感染的sf9细胞中表达 ;另外 ,电镜观察发现在重组病毒感染的sf9细胞质的空泡 (vesicle)中有HCV样颗粒的存在 ,说明HCV结构基因表达产物在sf9细胞中组装出病毒样颗粒。