人亲环素B基因的克隆表达及重组蛋白的生物活性

应用ＲＴ－ＰＣＲ方法从人淋巴细胞中扩增出亲环素Ｂ（ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎＢ，ＣｙＰＢ）基因，克隆入ｐＥＴ－２８ａ载体中表达．表达产物以包涵体形式存在，占细菌可溶性蛋白的１５％．经Ｎｉ－ＮＴＡ树脂金属螯合亲和层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析纯化，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测呈单一条带，毛细管电泳为单一色谱峰，纯度达９５％．经复性处理。

一种简单、快速的血和组织中DNA的提取法

一种简单、快速的血和组织中ＤＮＡ的提取法赵权，方刚，王咏梅（南京军区南京总医院临床分子生物学实验室，南京２１０００２）关键词ＤＮＡ提取通常由血液中提取ＤＮＡ的方法是：先得到淋巴细胞，再用蛋白酶Ｋ、ＳＤＳ消化，然后用酚氯仿抽提、乙醇沉淀。这里介绍的一种...

肿瘤诊断与免疫治疗的新靶标精子蛋白17

精子蛋白17(spermprotein17,Sp17)是一种高度保守的哺乳动物蛋白,主要在睾丸中表达。在睾丸外的某些正常组织中也可检测到低水平Sp17mRNA和少量表达该蛋白的细胞。文献报道一些多发性骨髓瘤,原发性卵巢癌患者的肿瘤组织表达Sp17,新近我们应用免疫组化技术发现子宫内膜癌细胞Sp17也呈阳性。在正常组织的局限性表达和在肿瘤中的异常表达,使Sp17有望成为肿瘤诊断的标志物。Sp17既有B细胞表位又有细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlympytes,CTL)表位,可以从正常供体、MM患者和卵巢癌患者制备出能杀伤HLA相配的Sp17+的肿瘤细胞的CTL,提示Sp17可能为免疫治疗的理想疫苗。

环孢素A亲和素的研究进展

中图法分类号Ｒ９７９．５环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ，ＣｓＡ）是一种来自真菌的环十一肽，临床上广泛用于器官移植后抗排异反应，近来也用于一些自身免疫性疾病的治疗。环孢素Ａ亲和素（ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ，ＣｙＰ）是细胞内ＣｓＡ主要结合蛋白，其氨基酸...

环孢素A在自身免疫病研究与治疗中的应用

环孢素Ａ在自身免疫病研究与治疗中的应用李芳秋，赵权综述武建国审阅关键词环孢素Ａ，自身免疫病中图法分类号Ｒ５９３．２环孢素Ａ（ＣｓＡ）是从多孢木霉菌和粒孢菌分离的十一环肽，具有强效免疫抑制作用，临床广泛用于防止器官移植排异反应，基础研究中也将其用作实验...

双温聚合酶链反应检测EB病毒

应用双温循环ＰＣＲ（聚合酶链反应）方法检测鼻咽癌石蜡包埋组织、活检或冰冻组织、患者鼻咽拭子或血液中的ＥＢ病毒（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒｖｉｒｕｓ）ＤＮＡ。模板ＤＮＡ制备方法简便，无需酚提取步骤；双温ＰＣＲ快速（约需１．５小时）、灵敏。目前已用于临床检验。

环孢素A亲合素—Cyclophilin研究进展

环孢素A亲合素(Cyclophilin,CyP)广泛存在于生物体内,是细胞内环孢素A (Cy-closporin A,CsA)的受体,具有催化加速蛋白质折叠和转运等生物学功能。CyP与CsA结合抑制了钙离子、钙调素(Calmodulin,CaM)依赖的神经钙蛋白(Calcineurin,CN)的磷酸酶活性,阻断IL-2等T细胞增殖必需的一些细胞因子的转录,介导CsA免疫抑制作用。CyP在自身免疫性疾病和器官移植排斥研究中具有应用价值。

扩增阻滞突变系统的应用

扩增阻滞突变系统(Amplification Refractory Mutation System,ARMS)能检测DNA分子上任何点突变和小的缺失,其方法简单、快速、可靠,不依赖于任何特殊标记,越来越多地应用于遗传分析、突变鉴定、HLA分型等方面。