肺腺癌细胞株SPC-A1中侧群细胞的分离与肿瘤干细胞样特征的鉴定

背景与目的近来已有充分的研究表明在实体肿瘤中存在肿瘤干细胞,肿瘤干细胞的发现改变了我们对肿瘤发生机制及化疗耐药的观点。本文拟从人肺腺癌细胞株中分离并鉴定具有干细胞特征的肿瘤干细胞样细胞。方法采用无血清培养结合流式细胞术分离人肺腺癌细胞株中的边群细胞(SP,side population),通过增殖能力、克隆形成、裸鼠成瘤及表型分析鉴定其干细胞特性。结果肺腺癌细胞株中存在SP细胞,经无血清培养后,SP细胞的比例显著提高,SP细胞具有高增殖活性、高克隆形成率及强致瘤性,具有肿瘤干细胞的特性。结论人肺腺癌细胞株中存在具有肿瘤干细胞性质的SP细胞,无血清培养可以富集肺腺癌细胞株中的SP细胞。

三阴性乳腺癌中SOCS3和IL-6表达的相关性及临床意义

目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)中细胞因子信号转导抑制分子(SOCS3)和白细胞介素6(IL-6)表达的相关性及临床意义。方法采用免疫印迹和荧光定量PCR方法比较TNBC和正常乳腺细胞株中SOCS3和IL-6的表达情况;应用免疫组织化学方法检测84例TNBC、33例乳腺纤维瘤和11例正常乳腺组织标本中SOCS3和IL-6的表达情况,并分析两者在TNBC中表达的相关性及与临床病理参数的关系。结果 SOCS3在TNBC细胞株中表达缺失或低表达,而IL-6高表达。SOCS3在TNBC的阳性表达率为32.1%,而在乳腺纤维瘤和正常组织中分别为63.6%和72.7%(均P<0.01);IL-6在TNBC中的阳性表达率为72.6%,而在乳腺纤维瘤和正常组织中分别为30.3%和27.3%(均P<0.01)。两者在TNBC中的表达呈显著负相关(rs=-0.590,P<0.01)。SOCS3和IL-6的表达与TNBC肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、以及Ki-67表达及p53状态相关(均P<0.05),而与患者年龄、肿瘤的组织学分级和绝经状态无关(均P>0.05)。结论 SOCS3和IL-6的表达与TNBC的发生发展有关,提示其可作为TNBC潜在的预后评估指标和临床治疗的新靶点。

微RNA-129表达对食管鳞癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其分子机制

目的分析微RNA-129(mi R-129)表达对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及可能的分子机制。方法构建mi R-129过表达载体(p GCMV/EGFP/mi R-129)和对照载体(p GCMV/EGFP/mi R-NC),分别稳定转染ESCC细胞Eca109和EC9706,实时定量PCR检测mi R-129表达水平;MTT法、克隆形成实验和流式细胞术分别检测mi R-129表达对食管癌细胞体外增殖活性、细胞凋亡率和细胞周期的影响;构建含有Bcl-2基因3′-UTR野生和突变序列的荧光素酶报告基因载体,分别与p GCMV/EGFP/mi R-129共转染人ESCC细胞Eca109,双重荧光素酶报告基因实验分析荧光素酶活性变化;Western蛋白质印迹法检测Bcl-2、激活型胱天蛋白酶3及总胱天蛋白酶3蛋白表达水平。结果 mi R-129过表达可显著抑制食管癌细胞增殖(P<0.01),增加细胞凋亡率(P<0.05),并诱导细胞G0/G1期比例增加和S期比例降低(P<0.05),G2/M期比例则无显著变化。荧光素酶报告基因实验分析结果表明,mi R-129可显著降低含有Bcl-2基因3′-UTR野生序列的荧光素酶活性,而不降低含有Bcl-2基因3′-UTR突变序列的荧光素酶活性。Western蛋白质印迹法检测结果提示,mi R-129过表达可显著降低ESCC细胞中Bcl-2蛋白表达,增加激活型胱天蛋白酶3蛋白水平(P<0.05),总胱天蛋白酶3蛋白表达水平无明显变化。结论 mi R-129可能通过靶向调控Bcl-2表达而影响ESCC细胞增殖活性、凋亡和细胞周期的变化,为mi R-129成为ESCC临床治疗的分子靶标提供了实验依据。

快乐是最好的药

我小时候的梦想很大也很空。那时父母不懂得对我们进行职业教育和婚恋教育，我从没有想过要当医生，只因为高考发挥失常才进了医学院，转眼间已从医二十多个年头了。虽然当初从事这个职业并不是出于喜欢，但我不能不承认，这个职业是崇高的，能读生命这本大书是我的幸运。我一直在思考：回到生命的本质，医学技术是否真正能够做到尊重生命，使人幸福？

靶向miRNA的肿瘤干细胞治疗策略

肿瘤干细胞学说认为,肿瘤组织中存在一小部分具有无限增殖、自我更新、放化疗耐受以及高致瘤能力等干细胞特性的肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs),它们是肿瘤无法治愈并不断进展的重要原因。微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类短链非编码RNA,通过降解mRNA或抑制mRNA翻译的方式调控着众多基因的表达。研究显示,miRNA在多种肿瘤的CSCs中异常表达,CSCs的恶性表型维持需要众多miRNA的参与。近年来,靶向miRNA的CSCs治疗实验研究已经初步展现出良好的安全性和疗效。针对miRNA的治疗策略将成为CSCs治疗的一个新的研究方向,最大限度地清除CSCs将使治愈肿瘤逐渐成为可能。

个案管理在淋巴瘤患者治疗与康复护理中的应用研究

目的:探讨个案管理在淋巴瘤患者治疗与康复护理中的效果。方法:成立个案管理团队,对2011年度入肿瘤科治疗与康复检查的淋巴瘤患者实施个案管理护理模式,收录资料并记录全程数据,与未实施个案管理护理模式的历史数据作比较。结果:实施个案管理护理模式,淋巴瘤患者的总体护理质量明显提高(P<0.01)。结论:个案管理护理模式作为现代临床新型护理模式的一种补充,值得在一定领域推广。

乳腺癌中丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1 mRNA的表达及其预后价值

目的：检测乳腺癌细胞和组织中丝／苏氨酸蛋白激酶Plk1基因mRNA的表达情况并分析其预后价值。方法：应用半定量RT-PCR方法分析3株人乳腺癌细胞和1株正常乳腺上皮细胞中Plk1基因mRNA的表达水平。同时分析84例乳腺癌及对应的癌旁正常乳腺上皮组织中Plk1mRNA的表达水平。统计学分析Plk1mRNA表达水平与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移状况、TNM分期和雌激素受体（ER）等临床病理参数之间的关系，以及与预后之间的关系。结果：Plk1基因mRNA在乳腺癌细胞中的相对表达水平显著高于其在正常乳腺上皮细胞中的相对表达水平（P值均小于〈0．05）。另外，Plk1mRNA在乳腺癌组织中平均表达水平（0．88±0．18）显著高于其在癌旁正常乳腺上皮组织中平均表达水平（0．22±0．10；P〈0．01）。统计学分析结果袁明：Plk1mRNA表达水平和乳腺癌患者的淋巴结转移状况及TNM分期密切相关（P=0．009或0．007）。Kaplan—Meier生存曲线分析结果表明：高Plk1mRNA表达水平的乳腺癌患者的5年无疾病进展率及总体生存率均显著低于低Plk1mRNA表达水平的乳腺癌患者（P=0．0026及0．0136）。COX模型的多因素预后分析结果表明：Plk1基因mRNA表达水平是乳腺癌患者的一个独立的预后因素（HR=4．764，95％CI：1．341-6．123，P=0．0025）。结论：Plk1在乳腺癌组织呈现高表达水平，其mRNA表达水平有望成为临床乳腺癌患者一个重要的预后判断分子指标。