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丙型肝炎病毒F蛋白上调肝癌细胞HepG_2中Bcl-2和Bax表达 被引量:4
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作者 韦娟 孔晶 +5 位作者 邓小昭 储春丽 余晓杰 岳明 张云 徐孝东 《中华疾病控制杂志》 CAS 北大核心 2012年第4期289-292,共4页
目的研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因1b型F蛋白对HepG2细胞中Bcl-2、Bax表达的影响。方法应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增HCV 1b型的F基因,构建pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C真核表达载体,分别将pEGF... 目的研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因1b型F蛋白对HepG2细胞中Bcl-2、Bax表达的影响。方法应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增HCV 1b型的F基因,构建pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C真核表达载体,分别将pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C、pEGFP-C3(阴性对照)瞬时转染HepG2细胞,48h后抽细胞总蛋白质,蛋白质印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax表达的变化。结果转染F基因的HepG2中Bcl-2表达水平略高于未转染的细胞,但Bax表达水平显著高于未转染的细胞。结论 HCV F蛋白具有调节原癌基因Bcl-2和抑癌基因Bax的特性,可能与肝癌的形成有关。 展开更多
关键词 肝炎病毒属 F蛋白 BCL-2 BAX
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丙型肝炎病毒F蛋白上调人外周血单个核细胞IL-13的表达 被引量:4
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作者 朱丹燕 鲁卫东 +9 位作者 邓小昭 岳明 徐孝东 石展英 张建东 丁伟良 张锦海 肖雯 裴家平 李丙军 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期115-118,126,共5页
目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白对白介素13(interluekin-13,IL-13)表达的影响及其相关机制。方法收集慢性HCV1b型患者(chronic hepatitis patient,CHP)的血样,检测F抗体(F antibody,FAb)的阳性率并分成2组(F-Ab(+)CH... 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白对白介素13(interluekin-13,IL-13)表达的影响及其相关机制。方法收集慢性HCV1b型患者(chronic hepatitis patient,CHP)的血样,检测F抗体(F antibody,FAb)的阳性率并分成2组(F-Ab(+)CHP、F-Ab(-)CHP);收集健康者血样作为对照组;用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组样本血清中IL-13的水平;分离患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),用不同浓度的F蛋白刺激72 h后,ELISA法检测细胞上清中IL-13的水平,蛋白质免疫印迹(western blotting)法检测细胞中GATA结合蛋白3(GATA binding protein 3,GATA-3)和活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cell,NFAT1)蛋白表达水平。结果 F-Ab(+)CHP组血清IL-13水平高于F-Ab(-)CHP组(P<0.001);PBMC经F蛋白体外刺激后,细胞上清中IL-13水平随着F蛋白刺激浓度的增高而增高(x2=13.52,P=0.009);PBMC中GATA-3蛋白表达水平不受F蛋白刺激的影响(均有P>0.05),而F蛋白可下调NFAT1蛋白表达。结论在体外培养的PBMC中,F蛋白有上调IL-13水平的作用,而且可能通过下调NFAT1间接发挥作用。 展开更多
关键词 肝炎 丙型 肝炎病毒 白细胞介素13
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HCV-F蛋白的原核表达以及对Th1/Th2型细胞因子的影响 被引量:5
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作者 余晓杰 邓小昭 +10 位作者 岳明 徐孝东 刘运熙 周镇先 丁伟良 张锦海 韦娟 孔晶 许可 张云 储春丽 《中华疾病控制杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期195-199,共5页
目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)1b型F蛋白对Th1/Th2型细胞因子的影响。方法收集慢性HCV患者(chronic hepatitis patient,CHP)和HCV肝癌患者(hepatocellular carcinoma patient,HCCP)的血样,检测F抗体(F antibody,F-Ab)的... 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)1b型F蛋白对Th1/Th2型细胞因子的影响。方法收集慢性HCV患者(chronic hepatitis patient,CHP)和HCV肝癌患者(hepatocellular carcinoma patient,HCCP)的血样,检测F抗体(F antibody,F-Ab)的阳性率并且分成4组,F-Ab(+)CHP、F-Ab(-)CHP、F-Ab(+)HCCP、F-Ab(-)HCCP;分离患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用F蛋白刺激,72 h后用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞上清干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)和白介素5(in-terluekin-5,IL-5)水平。结果 F-Ab(-)CHP组IFN-γ高于F-Ab(+)CHP组(P=0.020);F-Ab(-)HCCP组IFN-γ高于F-Ab(+)HCCP组(P=0.019),F-Ab(+)HCCP组IL-5的水平高于F-Ab(-)HCCP组(P=0.032);F-Ab(+)CHP组IL-5的水平高于F-Ab(-)CHP组(P=0.041)。结论在体外培养的PBMC中,F蛋白有上调IL-5水平和下调IFN-γ水平的作用,提示可能与肝炎慢性化和肝癌的发生机制有关。 展开更多
关键词 肝炎病毒 受体 细胞因子 受体 干扰素
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HCV治疗中PD-1/PD-L1信号免疫调控作用的研究概况 被引量:4
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作者 肖雯 裴家平 +5 位作者 季晓伟 石丽萍 邓小昭 蒋龙凤 张锦海 王长军 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期200-205,共6页
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染以其高慢性化、高肝纤维化和高肝细胞癌发生率,已经成为一个全球性的公共卫生问题。本综述拟概述HCV感染和治疗、PD-1(programmed cell death 1 gene,PD-1)高表达与免疫应答在HCV感染中的关联... 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染以其高慢性化、高肝纤维化和高肝细胞癌发生率,已经成为一个全球性的公共卫生问题。本综述拟概述HCV感染和治疗、PD-1(programmed cell death 1 gene,PD-1)高表达与免疫应答在HCV感染中的关联。在抗-HCV治疗中,提高免疫细胞调控能力是决定治疗效果的关键因素之一。慢性HCV感染中,有功能障碍的HCV特异性CD8^+T细胞上PD-1表达水平升高,阻断PD-1/PD-L1(programmed death-ligand 1,PD-L1)信号后,T细胞调控功能部分恢复;PD-1/PD-L1信号的增强,不仅抑制细胞毒性T细胞的功能,还影响CD8^+T细胞的分化。临床上,阻断PD-1/PD-L1信号通路后,抗-HCV免疫应答水平增强。因此,加强对HCV感染诱导PD-1高表达的机制和HCV特异性T细胞功能障碍发生的机制研究,将有助于促进慢性HCV感染的预防性和治疗性疫苗的研发,并最终改善HCV治疗的效果。 展开更多
关键词 肝炎抗体 丙型 免疫 信号传导
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丙型肝炎病毒感染者F基因区变异临床意义的初步研究 被引量:4
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作者 徐孝东 鲁卫东 +10 位作者 岳明 邓小昭 朱丹燕 余晓杰 周镇先 丁伟良 张锦海 孔晶 许可 张云 储春丽 《中华疾病控制杂志》 CAS 北大核心 2014年第4期322-325,共4页
目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F基因区变异的临床意义。方法以78例未治疗慢性丙型肝炎患者为研究对象,采用单链构象多态性分析对HCV-F基因区进行准种分析,实时荧光定量聚合酶链反应对HCV RNA进行定量检测,利用酶联免疫... 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F基因区变异的临床意义。方法以78例未治疗慢性丙型肝炎患者为研究对象,采用单链构象多态性分析对HCV-F基因区进行准种分析,实时荧光定量聚合酶链反应对HCV RNA进行定量检测,利用酶联免疫吸附试验分别对患者血清中的抗F蛋白抗体、Th1(IL-12,IFN-γ)和Th2(IL-5,IL-10)细胞因子水平进行检测分析。结果 78例慢性丙型肝炎患者中有46例为抗HCV-F抗体阳性,阳性率为59%。HCV1b亚型患者F基因区准种数目高于非HCV1b亚型(P=0.002)。F基因区SSCP条带数与HCV RNA载量及ALT/AST水平呈正相关(均有P<0.05)。另外,与F基因准种数量≤2的患者相比,F基因准种数量>2的患者血清中,Th1细胞因子IL-12、IFN-γ水平降低(P=0.023,P=0.010),Th2细胞因子IL-5、IL-10水平显著升高(P=0.024,P=0.012)。结论 HCV-F基因区准种多样性与病毒复制、肝损伤和机体Th2优势应答有关,具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 肝炎 丙型 变异(遗传学) 流行病学
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禽流感快速检测技术研究进展 被引量:3
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作者 张锦海 王忠灿 王长军 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期865-867,共3页
关键词 禽流感 快速检测技术
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HCVF蛋白和APC基因甲基化与慢性HCV感染的相关研究 被引量:1
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作者 季晓伟 肖雯 +9 位作者 裴家平 石丽萍 蒋龙凤 王长军 邓小昭 张琪 韩一芳 张锦海 朱丹燕 徐孝东 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期327-331,共5页
目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白与多发性腺瘤样息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)基因甲基化在慢性HCV感染中的关系。方法收集慢性HCV患者(chronic hepatitis patient,CHP)的血样,检测F抗体(F antibody,F-Ab)... 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白与多发性腺瘤样息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)基因甲基化在慢性HCV感染中的关系。方法收集慢性HCV患者(chronic hepatitis patient,CHP)的血样,检测F抗体(F antibody,F-Ab)的阳性率并且分成两组(F-Ab(+)CHP组、F-Ab(-)CHP组),收集健康者的血样作为对照组;分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),分别用HCV Core/F蛋白刺激,72 h后,分别提取DNA,用二代测序检测APC基因的甲基化水平,分析各组APC基因甲基化程度的差异。结果APC基因甲基化程度在F-Ab(+)CHP组、F-Ab(-)CHP组及健康对照组三组间差异有统计学意义(F=185.185,P<0.001),F-Ab(+)CHP组APC基因甲基化程度高于F-Ab(-)CHP组,健康对照组最低(均有P<0.05);三组样本PBMC分别经Core/F蛋白体外刺激后,APC基因甲基化程度各组总体比较差异均有统计学意义(均有P<0.05),Core蛋白与F蛋白共刺激组细胞APC基因甲基化程度高于F蛋白刺激组,Core蛋白刺激组为最低。结论在慢性HCV感染患者中,HCV F蛋白的产生能够影响APC基因甲基化程度。 展开更多
关键词 基因 APC 甲基化 肝炎病毒属
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HLA-DPA1/B1基因多态性与丙型肝炎病毒易感性和感染转归的关联研究 被引量:5
8
作者 裴家平 季晓伟 +8 位作者 蒋龙凤 邓小昭 徐孝东 肖雯 丁伟良 张锦海 王长军 朱丹燕 李丙军 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期112-115,120,共5页
目的探讨江苏地区有偿献血高危人群白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-DP A1/B1基因多态性与丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染转归的关联性。方法采用病例-对照(慢性丙型肝炎患者258人,自限清除者170人,健康对照者320人... 目的探讨江苏地区有偿献血高危人群白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-DP A1/B1基因多态性与丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染转归的关联性。方法采用病例-对照(慢性丙型肝炎患者258人,自限清除者170人,健康对照者320人)研究,通过聚合酶链反应序列为基础的基因分型(polymerase chain reaction-sequence based genotyping,PCR-SBT)技术对3组人群HLA-DPA1/B1等位基因进行分析,并比较各等位基因频率。结果 HCV感染组的HLA-DPA1*0103与HLA-DPB1*0201等位基因频率高于健康对照组(40.7%vs32.2%,P=0.003)(22.0%vs 12.5%,P<0.001)。HCV持续感染组的HLA-DPA1*0201与HLA-DPB1*1401等位基因频率低于自限清除组(7.9%vs 13.8%,P=0.018)(0.0%vs 2.1%,P=0.015)。HLA-DPA1/B1单倍型分析发现,HCV感染组的DPB1*0501-DPA1*0103和DPB1*0201-DPA1*0103单倍型频率高于健康对照组(P<0.001)。而HCV感染组单倍型DPB1*0202-DPA1*0202的频率低于健康对照组(P<0.001)。HCV持续感染组的单倍型DPB1*0202-DPA1*0202的基因频率高于HCV自限清除组(P=0.004)。HCV持续感染组DPB1*0402-DPA1*0103单倍型频率又低于HCV自限清除组(P=0.008)。结论在江苏地区有偿献血高危人群中,HCV感染转归与HLA-DPA1/B1基因多态性之间存在一定关联性。 展开更多
关键词 肝炎病毒属 HLA抗原 基因频率
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HCVF蛋白和负性共刺激分子2B4与慢性HCV感染的关联研究
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作者 石丽萍 李森森 +8 位作者 肖雯 裴家平 季晓伟 蒋龙凤 王长军 邓小昭 张琪 韩一芳 张锦海 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期613-616,644,共5页
目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白的产生与负性共刺激分子2B4在慢性HCV感染中的关联性。方法收集慢性HCV患者(chronic hepatitis patient,CHP)的血液样本,检测F抗体(F antibody,F-Ab)的阳性率并依据结果分成(HCV-F(+)... 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白的产生与负性共刺激分子2B4在慢性HCV感染中的关联性。方法收集慢性HCV患者(chronic hepatitis patient,CHP)的血液样本,检测F抗体(F antibody,F-Ab)的阳性率并依据结果分成(HCV-F(+)组、HCV-F(-)组)两组,收集健康者的血液样本作为对照组;分离并培养外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),收集各孔细胞,酶联免疫吸附试验检测2B4抗体阻断前后白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)、干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)的表达水平。结果 2B4抗体阻断前,HCV患者PBMCs中IFN-γ和IL-4分泌水平均较健康组高(均有P<0.05),且HCV-F(-)组分泌IFN-γ水平高于HCV-F(+)组(F=1.908,P=0.020),而IL-4分泌水平低于HCV-F(+)组(F=1.342,P=0.009)。2B4抗体阻断后,健康组中IFN-γ和IL-4水平较阻断前均无统计学意义(均有P>0.05),CHP IFN-γ分泌水平较阻断前升高(F=1.214,P=0.003),且HCV-F(-)组升高程度高于HCV-F(+)组(F=1.434,P=0.009);而IL-4分泌水平较阻断前明显降低(F=1.505,P=0.015),且HCV-F(-)组降低程度低于HCV-F(+)组(F=1.444,P=0.032)。结论在慢性HCV感染中,F蛋白的信号调控机制与负性共刺激分子2B4具有相关性。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒F蛋白 负性共刺激分子2B4 丙型肝炎病毒感染
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