新型猪囊尾蚴斑点免疫金渗滤法的建立及初步应用

目的:建立一种简便快速的检测囊虫抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将毕赤酵母重组表达的猪囊尾蚴抗原cC1点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中囊虫抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。结果:DIGFA检测40份囊虫病患者血清和40份正常人血清,敏感性为95%(38/40),特异性为100%(40/40)。检测20份包虫病患者血清,3例阳性,交叉反应率为15%(3/20);检测20份肝吸虫病患者血清,20份肺吸虫病患者血清,20份血吸虫病患者血清,均未出现交叉反应。与酶联免疫吸附试验对比,检测的总符合率为95%,差异无显著性(P﹥0.05)。结论:DIGFA简便、快速、准确,适于现场应用,可用于囊虫病的诊断及流行病学调查。

基于酵母重组人细胞核抗原的多种自身抗体复合斑点胶体金法的研发与评价

目的建立一种简便快速的自身免疫抗体复合斑点胶体金法。方法将7种人细胞核抗原Sm D1、Sm B′、SSA52、SSA60、SSB、U1RNP 70K、Jo-1用毕赤酵母表达纯化后,点样于硝酸纤维素膜(NC)上,以此检测血清中相应的多种自身抗体,用SPSS 11.0统计软件分析,总符合率及7个组间符合率的比较用χ~2检验。结果与欧蒙自身抗体酶联免疫吸附法(ELISA)检测为不同自身免疫性疾病阳性血清291份和正常人血清60份比对,复合斑点胶体金法阳性符合率分别为:抗Sm D1 93.7%(59/63),抗Sm B′91.7%(55/60),抗SSA52 91.0%(81/89),抗SSA60 90.5%(76/84),抗SSB 98.6%(70/71),抗U1RNP 70K 93.6%(73/78),抗Jo-1 91.1%(51/56);阴性符合率为100%(60/60);总符合率为92.8%(465/501),统计学检验均无显著性差异(P<0.05)。结论复合斑点胶体金法简便、快速、准确,可满足临床对自身免疫性疾病联合诊断的需求。