骨髓间充质干细胞向急性肾损伤小鼠的肾脏归巢现象及功能探讨

目的:观察在缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模拟急性肾损伤的小鼠模型中,骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)能否向损伤的肾小管迁移并促进其修复。方法:Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法有效分离纯化出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs),5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记并采用免疫组化法鉴定。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放)、I/R+BrdU-mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放的同时尾静脉注射经BrdU标记的mMSCs)。于建模后1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠(每次每组均处死3只),留取动脉血及肾组织,检测血肌酐(SCr)及尿素氮(BUN)水平,观察肾组织病理变化,荧光组织化学及免疫组织化学观察MSCs在受体小鼠肾组织的分布并对其进行鉴定。结果:经免疫组化证实BrdU标记mMSCs的阳性率可达(98.71±0.32)%。I/R组、I/R+BrdU-mMSCs组小鼠的BUN及SCr均显著高于正常对照组,但I/R+BrdU-mMSCs组小鼠的BUN及SCr水平却较同一时间点的I/R组为低,肾小管损伤程度评分也有着显著降低。免疫组化检测显示I/R+BrdU-mMSCs组小鼠肾脏中可检测到BrdU+细胞的分布,以术后第3天最多[(19.36±6.94)%]。经荧光组织化学及激光共聚焦显微镜观察证实该BrdU+细胞定位于小鼠的肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)处,且表达RTECs特异性的标志物角蛋白18(cytokertain-18,CK18)。结论:小鼠发生I/R诱导的急性肾损伤后可诱导MSCs向损伤的肾小管上皮迁移并转化,参与RTECs的更新,促进肾损伤的修复。

甘草酸和泼尼松对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏组织病理及超微病理改变的影响

目的通过建立大鼠慢性马兜铃酸肾病(AAN)动物模型,观察甘草酸、泼尼松对慢性AAN肾损害的干预作用。方法雄性Wistar大鼠98只,SPF级,随机分为4组:正常对照组20只,模型组、甘草酸组、泼尼松组每组26只;实验组按马兜铃酸(AA)20 mg／(kg·d)关木通浸膏灌胃,正常对照组灌胃等体积饮用水;2 h后按分组灌胃给药:甘草酸25 mg／(kg·d),泼尼松3．15 mg／(kg·d);正常对照组、模型组灌胃饮用水。各组每周测量体重,于第4、8、12周测定相关肾功能指标;取肾组织进行形态学检查。结果随着喂饲时间延长,正常对照组大鼠体重稳定性增长,而马兜铃酸给药各组体重增长缓慢。马兜铃酸用药后各组血肌酐／体重水平明显增高,甘草酸组、泼尼松组血肌酐／体重水平显著降低。肾脏组织形态学改变:甘草酸、泼尼松治疗组形态结构损害程度较模型组(纤维化程度约30％)轻微,纤维化程度约15%-20%。电镜结果:马兜铃酸可引起肾小管上皮细胞损伤、变性、坏死,线粒体等细胞器损伤明显,有细胞核变异。甘草酸、泼尼松组以小管损伤为主,线粒体等细胞器正常,细胞核变异少见,间质胶原纤维较少。结论甘草酸、泼尼松对大鼠慢性马兜铃酸肾损害有一定的保护作用,能降低血肌酐,改善肾功能,在一定程度上减轻马兜铃酸造成的肾组织形态学改变,并减少肾间质纤维化程度。

肌肉特异性糖皮质激素受体基因敲除对慢性肾脏病骨骼肌消耗的影响

目的:内源性糖皮质激素水平异常升高可引起和加重慢性肾脏病(CKD)引起的骨骼肌消耗。本研究观察肌肉特异性糖皮质激素受体基因敲除(MGRKO)对CKD状态下小鼠骨骼肌消耗的影响。方法:采用5/6肾切除制作CKD小鼠模型,以假手术组(CTL组)为对照组。组织病理学检测胫骨前肌横截面积并计算肌纤维面积分布图;荧光定量PCR检测肌肉萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)和肌环指蛋白1(MuRF-1)mRNA水平;Western Blot检测其蛋白表达及Akt/FoxO1信号通路;ELISA方法检测血清皮质酮水平。结果:造模1月后,lox/lox-CKD和MGRKO-CKD小鼠的血尿素氮和皮质酮水平均明显升高;lox/lox-CKD的体重明显下降胫骨前肌湿重明显降低。而MGRKO-CTL和MGRKO-CKD两组间体重无明显差异,胫骨前肌湿重仅轻微降低。组织学观察到lox/lox-CKD胫骨前肌肌纤维明显萎缩,横截面积减少,肌纤维面积分布图明显左移。而MGRKO-CKD组的体重下降不明显,胫骨前肌仍较饱满,肌肉湿重略降低,横截面积略降低,与MGRKO-CTL组比较,肌纤维面积分布图仅轻度左移。荧光定量PCR和Western Blot结果显示lox/lox-CKD组的腓肠肌Atrogin-1和MuRF-1的mRNA和蛋白表达水平显著升高,同时其Akt磷酸化水平(pAkt/Akt)较lox/lox-CTL组显著降低3.1倍,FoxO1磷酸化水平(pFoxO1/FoxO1)较lox/lox-CTL组降低2.3倍;而MGRKO-CKD组的Atrogin-1表达仅轻微上调,MuRF-1则无明显变化;MGRKO-CKD组Atrogin-1蛋白表达水平仅比MGRKO-CTL组升高,同时pAkt/Akt、pFoxO1/FoxO1水平较对照组仅轻微降低。结论:内源性糖皮质激素水平升高在CKD肌肉消耗中发挥重要作用;MGRKO可减轻/阻止CKD状态下的体重下降和肌肉萎缩,下调肌萎缩关键基因Atrogin-1和MuRF-1表达水平;该效应与阻断糖皮质激素影响Akt/FoxO1信号途径有关,抑制糖皮质激素信号通路可能改善CKD肌肉消耗。

骨髓间充质干细胞干预对急性肾损伤鼠肾脏中细胞因子的影响

目的:建立缺血再灌注(I/R)诱导的急性肾损伤小鼠模型,探讨外源性地给予骨髓间充质干细胞(MSCs)干预对模型小鼠肾损伤微环境中细胞因子水平的影响,并探讨其在肾损害修复中的作用。方法:采用Percoll密度梯度离心法分离出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs)。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、夹闭双侧肾蒂30min开放)、I/R+mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30min开放的同时尾静脉注射mMSCs)。于建模后1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠(每次每组均处死3只),留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)水平,制作肾组织切片行HE染色,观察肾组织病理变化,行肾小管坏死程度评分(ATN评分)。ELISA法检测肾组织匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-10(IL-10)、肝细胞生长因子(HGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)的水平。结果:I/R组小鼠的BUN及Scr均显著高于正常对照组,肾小管损伤严重;而I/R+mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,以术后第7天差异最为显著(P<0.01),肾小管损伤病理明显减轻,ATN评分也有着显著降低。ELISA结果显示单纯I/R组各时间点肾组织匀浆中TNF-α、IL-1β、MCP-1的水平显著升高(P<0.01或P<0.05),而IL-10、HGF、BMP-7的水平却有着显著降低(P<0.01或P<0.05)。但同时给予MSCs干预的I/R小鼠肾组织匀浆中前述细胞因子的水平却向着相反方向改变。结论:MSCs对I/R肾组织中细胞因子的分泌具有调控作用,而这些调控了的细胞因子进而可通过旁分泌作用发挥促进肾损害的修复作用。

马兜铃酸对大鼠肾功能和肾脏组织病理的影响

目的观察马兜铃酸对大鼠肾功能和肾脏病理的影响。方法雄性Wistar大鼠46只,随机分为正常对照组20只,实验组26只。实验组按马兜铃酸(AA)20mg·kg-1·d-1的剂量给予关木通浸膏灌胃,正常对照组灌胃等体积饮用水。每周测量体重,于第4,8,12周代谢笼法留取24h尿液,分别腹主动脉采血,测定相关肾功能指标,取肾组织进行组织病理检查。结果实验组大鼠体重增长缓慢,尿量增多,尿白蛋白、尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷(NAG)酶排泄量明显增加,血肌酐/体重进行性升高,提示AA作用后肾功能发生明显损害。肾脏病理改变:实验组光镜下早期为肾小管变性、坏死等急性小管间质损害,逐渐加重,后期小管结构紊乱严重,并出现严重的局灶性萎缩及间质早期纤维化;电镜表现为细胞器损伤明显,细胞核变异等,第8周时已出现早期间质纤维化,12周时间质纤维化面积达到31.36%。结论关木通所含马兜铃酸对大鼠肾脏具有明显损害作用,肾组织病理改变主要为小管间质病变,并导致细胞核变异,早期间质纤维化。

肌卫星细胞功能异常在慢性肾脏病骨骼肌消耗中的机制

目的:骨骼肌消耗是慢性肾脏病(CKD)的主要特征,肌卫星细胞(muscle satellite cells,MSC)是具有自我增殖和更新能力的成肌干细胞,MSC功能异常可引起肌肉萎缩。本研究探讨MSC在CKD小鼠骨骼肌消耗中的作用机制。方法:采用5/6肾切除制作小鼠CKD模型,以假手术组为对照组。以免疫组化标记胫骨前肌层粘连蛋白(laminin),测量肌纤维横截面积,并计算面积百分位图;RT-PCR检测腓肠肌Pax-7、MyoD、Myf-5、Myogenin及myostatin mRNA表达水平;分离并原代培养骨骼肌MSC,原位免疫组化检测Pax-7和MyoD表达,检测分化后新形成的肌纤维胚胎型肌球蛋白重链(eMyHC)。结果:造模一个月后,CKD小鼠体重和骨骼肌重量明显下降,形态学表现为胫骨前肌明显变细,肌纤维横截面积减少,面积百分位图明显左移;肌肉组织的Pax-7、MyoD、Myf-5和Myogenin mRNA表达水平均有不同程度下降,myostatin mRNA表达则明显上调;原代培养的MSC中,CKD组的Pax-7和MyoD阳性细胞数目明显低于对照组,分化后新形成的eMyHC阳性肌纤维数目也明显降低。结论:CKD可引起显著的骨骼肌萎缩,使MSC增殖和分化功能下降,myostatin水平升高可能是抑制肌卫星细胞功能的重要原因。

促红细胞生成素对横纹肌溶解大鼠急性肾衰竭的肾脏保护作用

目的:观察促红细胞生成素(EPO)能否减轻横纹肌溶解引起的急性肾衰竭(ARF)大鼠肾损伤程度并探讨机制。方法:重200g左右SD大鼠48只,禁水14h后分4组,正常对照组:两后腿肌肉注射生理盐水10ml/kg;ARF组:两后腿肌肉内注射50%甘油(10ml/kg);EPO立即干预组:肌肉注射50%甘油的同时腹腔注射EPO2000μg/kg,12h后重复1次;EPO延迟干预组:在肌肉注射甘油6h后注射EPO2000μg/kg,12h重复1次。观察各组尿量、肾功能和肾组织病理变化。结果:与ARF组相比,EPO立即干预组和延迟干预组血尿素氮、血肌酐浓度均明显降低,ATN评分下降(P<0.05)。肌肉注射甘油的3组大鼠24h肾组织中均存在明显的小管细胞凋亡,EPO干预组凋亡情况减轻;肌肉注射甘油的大鼠肾组织抗凋亡因子Bcl-XL的蛋白质表达比正常对照组增加,EPO立即干预和延迟干预组增加更加明显。结论:立即注射和延迟6h注射EPO均可减轻甘油诱导的横纹肌溶解性大鼠急性肾损伤。

马兜铃酸对肾小管上皮细胞释放ET、Ang-Ⅱ的影响及甘草酸干预作用的实验研究

为探讨马兜铃酸 (AA)对体外培养的肾小管上皮细胞释放内皮素 (ET)、血管紧张素(Ang II)的影响 ,以及甘草酸的干预作用 ,以不同浓度AA作为刺激物 ,观察AA对体外培养的肾小管上皮细胞系 (LLC PK1)分泌和释放Ang II、ET的影响 ;另各培养体系中分别加入AA (4 0 μg/ml)和不同浓度甘草酸 ,观察甘草酸对AA作用下LLC PK1释放AngII、ET的干预作用。各组培养 2 4h后 ,提取培养上清 ,用放射免疫法测定ET、Ang II的浓度。结果显示 :①AA(4 0、80、16 0 μg/ml)可明显刺激细胞释放ET、Ang II(P <0 0 1)。②甘草酸在 5 0 μg/ml、10 0 μg/ml、2 0 0 μg/ml浓度时可使AA刺激细胞分泌和释放ET、Ang II水平下降 (P <0 0 5或P <0 0 1)。提示 :AA可刺激肾小管上皮细胞分泌和释放ET、Ang II ,此作用可能与AA的细胞毒性损害有关 ;甘草酸可使AA刺激细胞分泌和释放ET、Ang II水平下降 ;甘草酸的保护作用可能与抑制AA作用下细胞分泌和释放ET、Ang II有关。

急性肾损伤微环境对培养骨髓间充质干细胞分化及分裂增殖的影响

目的:观察体外模拟急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的微环境下,小鼠骨髓间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,mMSCs)分化及分裂增殖情况。方法:采用夹闭雄性C57BL/6小鼠双侧肾蒂30min再开放30min的方法制作缺血再灌注(I/R)性AKI鼠模型,即刻取双侧肾脏皮质制作I/R肾脏匀浆上清。抽取C57BL/6小鼠的骨髓,经Percoll密度梯度离心联合贴壁培养法分离纯化出mMSCs,以流式细胞仪鉴定。取扩增3代的mMSCs分组培养:(1)对照组:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基;(2)干预组:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基+I/R肾脏匀浆上清。诱导1d、3d、5d、7d后倒置显微镜下观察细胞形态学变化;透射电镜观察细胞超微结构;流式细胞仪检测角蛋白18(cytokeratin18,CK18);CCK-8法检测培养mMSCs的增生;TUNEL法检测mMSCs凋亡。结果:分离获得的P3-mMSCs高表达CD29和CD44,低表达CD34和CD45。与对照组长梭形细胞相比,干预组第3天可见部分细胞为椭圆形、短梭形,至第7天大部分细胞呈圆形、椭圆形、短胖梭形;透射电镜也观察到胞质内开始出现较多的粗面内质网、溶酶体、线粒体。流式细胞仪检测发现,对照组mMSCs内仅有极微量CK18表达,而干预组CK18阳性表达率显著增加。经I/R肾脏匀浆上清干预后,不同时间点mMSCs的增殖效应均显著减弱,而TUNEL检测显示胞核染色阳性的细胞百分比有显著升高(P<0.01)。结论:体外模拟的AKI微环境可诱导mMSCs部分分化为肾小管上皮样细胞,但同时也会导致培养的mMSCs凋亡,增殖能力减弱,进而减少了可肾向分化的mMSCs数量,推测这可能是MSCs体内移植促肾修复能力有限的原因之一。

MIS评分对血透患者营养不良-炎症状态及住院/死亡风险的相关性

目的:采用营养不良-炎症评分(malnutrition inflammation score,MIS)系统,观察透析患者营养-炎症状态,分析与住院和死亡风险的关系。方法:对141例行维持性血液(maintenance hemodialysis,MHD)患者进行MIS评分,了解其营养和炎症状况,包括:人体测量学指标、生化指标(包括血清白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、未饱和铁,总胆固醇、肾功能等)及血常规(红细胞、血红蛋白)、炎症指标(包括超敏C反应蛋白、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α等)。统计患者进入观察期12个月内其住院和死亡的情况,分析MIS评分与住院风险及死亡风险之间的关系,及与炎症和营养状态的相关性。结果:本组患者MIS评分增高者,存在较高的住院频率和病死率。MIS每升高10分(轻、中、重度),其住院频率分别为1.68±2.43、2.37±2.57、4.46±3.73(次),其住院率分别为29.26%、45.95%和83.33%,病死率分别为3.66%、10.81%和75%。较高的MIS与较低的血清白蛋白、转铁蛋白水平及肌肉蛋白储备下降有关,MIS升高者存在更显著的炎症和贫血状态。相关分析显示MIS与住院频率、透析龄、铁蛋白、超敏C反应蛋白、白细胞介素-6水平正相关,与人体测量指标、前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白、总铁结合力以及肌酐水平负相关。结论:MIS评分系统可以有效评价MHD患者的营养不良-炎症状态,并与患者住院频率和死亡风险相关,MIS分级越高,营养不良和炎症状态越严重,其住院和死亡风险越大。

丹参对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾损害的保护作用

目的观察丹参对慢性马兜铃酸肾损害大鼠模型的肾保护作用。方法Wistar大鼠随机分为正常对照组(Z组)、模型组(M组)及丹参低、中、高剂量组(分别为A组、B组、C组)。造模大鼠按马兜铃酸20mg·kg-·1d-1的剂量灌服关木通浸膏,1周后改为按马兜铃酸10mg·kg-·1d-1的剂量灌服,4h后丹参各组灌服不同剂量丹参溶液(分别为5、10、15g·kg-·1d-1),模型组灌服等体积生理盐水。分别于实验第12、16、20、24周留取大鼠血、尿标本,检测大鼠RBC、Hb、白细胞含量、血肌酐水平、24h尿蛋白定量及尿NAG的排泌情况。结果模型组大鼠RBC及Hb明显低于正常对照组、白细胞比例出现异常,与对照组比较Scr明显升高、24h尿蛋白及尿NAG酶的排泌增加,并随着实验进展而逐渐加重。丹参可改善上述指标的异常。结论丹参对关木通浸膏所致的慢性马兜铃酸肾损害大鼠模型具有一定的肾保护作用,可明显改善大鼠贫血状态、降低Scr,减少24h尿蛋白的排出及尿NAG酶的分泌。

单剂量巴利昔单抗对肾移植受者外周血Foxp3mRNA、CD4^+CD25^+调节性T细胞、白细胞介素2及其受体的影响

目的:观察单剂量巴利昔单抗对肾移植受者外周血Foxp3mRNA、CD4+CD25+调节性T细胞、白细胞介素2及可溶性白细胞介素2受体的影响,分析其预防移植肾急性排斥反应的作用途径。方法:选择2005-10/2006-12在上海解放军第四五五医院行同种异体肾移植的患者66例,移植前均行维持性血液透析治疗。按随机数字表法分为2组,常规组接受常规免疫抑制剂治疗,巴利昔单抗组在常规免疫抑制剂治疗的基础上加用巴利昔单抗(商品名:舒莱,诺华制药公司,批号:S20040059,20mg/瓶),每组33例。另外选择年龄性别相配的健康体检者30例作为对照组。以上所有观察对象均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准。两组肾移植患者分别于移植前(手术当天)和移植后1,2,4,8周清晨采静脉血肝素抗凝,以流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量,应用荧光定量PCR检测Foxp3mRNA的表达,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血浆中白细胞介素2及其受体,采用生化仪检测血肌酐及尿素氮水平,必要时行移植肾多普勒超声检查和病理活检,观察其急性排斥反应发生情况。结果:66患者全部进入结果分析,无脱落。①常规组患者急性排斥反应的发生率21.2%(7/33)显著高于巴利昔单抗组6.1%(2/33)(P<0.05)。②移植后第1,2,4和8周巴利昔单抗组Foxp3、CD4+CD25+调节性T细胞和白细胞介素2水平均高于常规组(P<0.05～0.01),可溶性白细胞介素2受体水平均低于常规组[(306.31±98.43,327.60±109.74,316.71±104.54,388.33±132.42;410.14±112.04,442.82±118.94,450.80±123.63,445.61±115.24)U/mL(P<0.05～0.01)]。③两组肾移植患者无论移植前还是移植后,其血浆CD4+CD25+调节性T细胞百分率与Foxp3mRNA表达水平均呈明显正相关(r=0.892～0.932,P<0.01)。结论:单剂量巴利昔单抗可以有效地减少移植肾急性排斥反应的发生率,作用途径可能与其增加外周血中Foxp3mRNA、CD4+CD25+调节性T细胞和白细胞介素2表达,减少血浆可溶性白细胞介素2受体水平有关。

CKD时高糖皮质激素通过激活Atrogin-1、MuRF-1引起骨骼肌萎缩

目的:瘦体质量丢失和肌肉消耗状态是慢性肾脏病(CKD)严重并发症,并与患者不良预后有关。本研究观察CKD模型小鼠骨骼肌合成和分解代谢,分析肌肉特异性E3连接酶肌萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)在肌萎缩中的作用,探讨CKD肌肉消耗的病理机制。方法:采用5/6肾切除制作小鼠CKD模型,以假手术组为对照组。同位素14+C-苯丙氨酸掺入法检测肌肉蛋白合成,酪氨酸释放率分析检测肌肉分解代谢,组织病理学检测胫骨前肌横截面积并计算肌纤维面积分布图,Northern blot检测Atrogin-1和肌环指蛋白-1(MurF-1)mRNA水平,Western blot检测其蛋白表达及Akt/FOXO1信号通路,Elisa方法检测血清糖皮质激素水平。结果:造模1月后,CKD小鼠体重和骨骼肌重量明显下降,形态学表现为胫骨前肌横截面积减少,肌纤维面积分布图明显左移;蛋白质代谢方面显示肌肉蛋白分解增加明显,蛋白质合成代谢亦轻度下降,肌肉组织的Atrogin-1和MuRF-1mRNA表达明显上调,血清糖皮质激素水平较对照组升高13倍,CKD的代谢状态可导致骨骼肌组织Akt/FOXO1信号途径异常。结论:CKD时骨骼肌分解代谢旺盛,肌萎缩关键基因表达升高,致Akt/FOXO1信号途径异常,结果引起的肌肉萎缩,而糖皮质激素水平升高可能是原因之一。

糖尿病肾病腹膜透析患者蛋白能量消耗状态

目的:探讨糖尿病肾病(DN)维持性腹膜透析(PD)患者的蛋白能量消耗状态。方法:对腹膜透析中心行维持性PD的患者运用改良SGA法评分系统(MQSGA)、营养不良-炎症评分(MIS)和血清总蛋白、白蛋白等进行营养评估,采用酶联免疫方法(ELISA)检测血清超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)浓度进行微炎症状态评估,同时检测PD患者人体学指标[身高、体重、体重指数(BMI)、中臂围(MAC)、肱三头肌皮褶厚度(TSF)和中臂肌围(MAMC)]、生化指标[血清白蛋白(Alb)、血清总蛋白(TP)、血红蛋白(Hb)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)等]。同时将所有PD患者按原发病的不同分为糖尿病肾病组、高血压肾病组、慢性肾小球肾炎组,及其他继发性肾病组评估比较不同组别的蛋白能量消耗状态。结果:符合纳入标准的PD患者共138例,其中糖尿病肾病组20例,高血压肾病组31例,慢性肾小球肾炎组61例,其他继发性肾病组26例。四组间MQSGA、MIS、Hs-CRP、TNF-α、IL-6、Scr、Ft差异均有统计学意义(P<0.05),其中糖尿病肾病组与高血压肾病组相比,MQSGA分值更高(P=0.007)、MIS分值更高(P=0.003);糖尿病肾病组与慢性肾小球肾炎组相比较,MQSGA分值更高(P=0.001)、MIS分值更高(P=0.002),血肌酐水平更低(P=0.035),铁蛋白水平更低(P=0.025);糖尿病肾病组与其他继发性肾病组相比铁蛋白水平更低(P=0.007)。但体重、体重指数、血红蛋白、血肌酐、尿素氮各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:糖尿病肾病维持性腹膜透析患者处于严重的蛋白能量消耗状态。

尿毒症性周围神经病诊治进展

尿毒症性周围神经病好发于慢性肾衰竭期,是尿毒症患者最常见的并发症之一,对患者生活质量影响巨大,是以肢体远端对称性感觉障碍为主的多发性周围神经病变,尤以下肢病变较上肢严重,起病隐袭,病情进展数月,若无有效的医疗干预,进一步发展为肢体无力、麻痹与运动功能丧失。

丹参对马兜铃酸肾损害大鼠肾组织病理学改变及ACE、ACE2表达的影响

目的:观察丹参对马兜铃酸诱导的大鼠肾组织病理改变、血管紧张素转化酶(ACE)及其同源物ACE2以及细胞因子表达的影响。方法:建立马兜铃酸肾损害大鼠模型,并灌服不同剂量丹参水溶液(5、10、15 g.kg-1.d-1),于实验第12、16、20、24周留取肾组织标本,HE、PAS、Masson观察肾组织病理改变,免疫印迹检测肾组织ACE、ACE2的蛋白表达量,RT-PCR检测AngⅡ、TGF-β1、PAI-1 mRNA水平。结果:第12周开始,模型大鼠出现肾小管结构损伤,表现为刷状缘消失、细胞空泡变性、脱落,并出现裸膜,伴炎细胞浸润,实验后期出现局部动脉管壁增厚及轻度纤维化表现。模型大鼠肾组织ACE的表达升高,并随实验进展而明显;第16周开始ACE2的表达降低。AngⅡ、TGF-β1、PAI-1 mRNA表达上调,以AngⅡmRNA上调明显。丹参干预后肾组织病变有所减轻,未出现纤维化表现;丹参可降低肾组织ACE的表达,并下调AngⅡmR-NA水平。结论:丹参可能通过降低ACE的表达、促进ACE2的合成,抑制了AngⅡ的活性,并下调TGF-β1、PAI-1的过高表达,从而减轻马兜铃酸诱导的肾小管间质病变的发生发展。

营养不良-炎症评分评估和判断维持性腹膜透析患者的营养不良-微炎症状态

目的探讨营养不良-炎症评分(malnutrition inflammation score,MIS)对维持性腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者营养不良-微炎症状态的临床评价和判断。方法对上海解放军第四五五医院腹膜透析中心行维持性PD的患者的营养不良-炎症状态进行改良定量主观整体评估(modified quantitativesubjective global assessment,MQSGA)和MIS,同时检测PD患者人体测量指标、生化指标和微炎症指标,并分析MIS对营养不良-炎症状态的评价效能及与各项指标的相关性。结果符合纳入标准的PD患者共98例。按照MQSGA标准,营养不良者96例,占97.96%,其中轻度64例,占65.31%,中度27例,占27.55%,重度5例,占7.10%。按照MIS标准,98例PD患者全部为营养不良,占100%,其中轻度52例,占53.06%,中度39例,占39.80%,重度7例,占7.14%。MIS分值越高,患者年龄越大,营养状况越差,微炎症状态越严重。MIS与PD患者贫血指标、营养指标和人体测量指标显著负相关,差异有统计学意义(P<0.05);与微炎症指标显著正相关,差异有统计学意义(P<0.05),MIS与各指标的相关系数高于MQSGA。结论 MIS可准确评估和判断腹膜透析患者营养不良-微炎症状态,随着MIS分值的增加,患者的营养不良-炎症状态亦愈加严重,且高龄患者具有较高的MIS分值。

心脏手术后急性肾衰竭患者的病因和预后相关因素分析

目的探讨心脏手术后急性肾衰竭(ARF)的病因和影响预后的因素。方法回顾性分析108例心脏手术后ARF患者的临床资料,采用Cox逐步回归分析心脏手术后ARF影响预后的因素。结果引起ARF的主要原因有心源性低血压50例(46.3%),其他16例,42例病因不明。肾功能恢复47例(43.5%),患者存活38例(占35.2%),死亡70例,死亡的主要原因有多脏器功能不全(MODS)33例,心源性死因26例,其他11例。ForwardCox逐步回归分析提示:功能不全脏器数、少尿、持续低血压和是否透析与死亡明显相关。结论心源性低血压是心脏手术后ARF的主要病因,多数患者死于MODS和心脏并发症;功能不全的脏器多、少尿、持续性低血压和不透析预示死亡率增加;少尿患者及时透析可降低病死率。

马兜铃酸致肾小管上皮细胞损害及释放内皮素与血管紧张素的实验研究

目的 :探讨马兜铃酸 (AA)对培养的肾小管上皮细胞的损害 ,及释放内皮素 (ET)、血管紧张素(Ang -Ⅱ ) 的影响。方法 :5 %FCSRPMI - 1 6 4 0培养肾小管上皮细胞 (LLC -PK1 ) ,采用结晶紫染色法观察细胞增殖 ;荧光染色观察活细胞数目 ;酶动力学检测LDH活性 ,比色法检测NAG水平 ;透射电镜观察细胞超微结构 ;放射免疫法测定ET、Ang -Ⅱ的浓度。 结果 :(1 )AA 4 0、80、1 6 0 μg/ml可明显抑制细胞增殖 ,结晶紫OD值显著减少 ,与无AA对照组比较P <0 .0 1。在AA 4 0 μg/ml作用下 ,随着时间延长 ,活细胞数目逐渐下降 ,显示AA对细胞损伤有一定的延续性 ;增加LDH释放率和NAG酶水平 ,与无AA对照组比较P <0 .0 1。细胞超微结构观察 :AA 4 0 μg/ml作用 2 4h后 ,细胞超微结构发生显著改变 ,以核变异最突出 ,出现染色质浓染、核边集、核缺失、核膜卷曲增厚 ,线粒体肿胀等严重细胞损伤改变。AA(4 0、80、1 6 0 μg/ml)可明显刺激细胞释放ET、Ang -Ⅱ ,与无AA对照组比较P <0 .0 1。 结论 :马兜铃酸对肾小管上皮细胞有明显的细胞毒性损害作用 ,使细胞超微结构发生显著损伤性改变 ,刺激肾小管上皮细胞分泌和释放ET、Ang -Ⅱ 。