用芯片电泳快速检测人p53基因外显子8上的突变点

目的 :建立简单快速的分析方法检测基因突变。方法 :利用修饰引物进行特异性单碱基延伸 ,采用Cy5荧光染色标记的ddNTP ,并通过芯片电泳来检测。结果 :实测了合成人p5 3基因外显子 8上突变点的 3种可能形态 (野生型 ,突变型和杂合型 ) ,并测定了一系列不同比例突变率的混合样本 ,最低至 5 %突变率。所有样本分别于芯片电泳中在 10 0s之内被检测出来。结论 :该方法操作简单易行 ,可用于快速检测已知的基因突变。

人血浆中氧氟沙星的HPLC测定及药代动力学研究

建立了人血浆中氧氟沙星含量的HPLC测定方法,以Spherisorb C18柱分离,流动相组成为甲醇-0.01mol/L磷酸盐缓冲液-0.5mol/L四丁基溴化铵(35:65:4,pH 2.5),流速为1.0 ml/min,在UV 294nm处测定。样品采用甲醇沉淀蛋白后,混旋、离心,吸取上清液在75℃下用氮气流吹干后,以0.4ml流动相稀释进样。采用内标法定量,在0.5～4.0μg/ml的浓度范围内呈线性关系,r=0.9999。最小检测浓度为20ng/ml。用本法对10名分别服用进口和国产氧氟沙星片剂的健康志愿者进行了血药浓度测定,取得了满意的结果,并对其药代动力学参数及生物利用度进行了研究。

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的生物质谱和毛细管电泳法

目的：为准确分析重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｒＨｕＧＭＣＳＦ）半成品及其制剂的纯度和表达的正确性。方法：用毛细管区带电泳测定了２批ｒＨｕＧＭＣＳＦ半成品和３批ｒＨｕＧＭＣＳＦ注射液的纯度。用基体辅助激光解吸飞行时间质谱和电喷雾质谱测定了２批ｒＨｕＧＭＣＳＦ半成品的分子量。用毛细管等电聚集法测定了ｒＨｕＧＭＣＳＦ半成品的等电点。结果：２批半成品中１批含有少量二聚体，且含有４个不同等电点的组分，另１批表达不正确；２批成品均存在大量杂质。结论：发现有些ｒＨｕＧＭＣＳＦ样品有生物学活性，但表达不正确，纯度也不高；各分析方法是互补的，不能相互替代。

高效液相色谱法测定血浆中洛美沙星浓度及其在人体内药代动力学

建立了人血浆洛美沙星的反相离子对高效液相色谱测定方法。该法简便易行,精密度好,方法回收率95～102%,日内、日间RSD为2.1～7.8%,血药浓度在0.125～5.012 μg/ml范围内呈线性关系,相关系数0.9998,当S/N=2时,最小检测浓度为25 ng/ml。健康志愿者口服400 mg洛美沙星,药代动力学过程符合一室模型,消除相半衰期为5.5 h。

HPLC测定犬血浆中盐酸伪麻黄碱浓度及西嗪伪麻缓释片的初步体内药动学研究

目的建立血浆中盐酸伪麻黄碱(PSE)的HPLC测定法,并用于在犬体内的初步药动学的研究。方法以盐酸苯丙醇胺(Phen)为内标,血浆样品经简单的乙醚萃取后用HPLC直接进样检测。结果以甲醇-水(11:29)为流动相,采用LichrospherC18能使PSE,Phen及血浆中的杂质达到基线分离;实测了犬口服西嗪伪麻缓释片剂(受试制剂,T片)和PSE普通片剂(参比制剂,C片)后不同时间点下血浆中PSE的浓度,并获得主要药动学参数分别为:t1/2(T)(4.66±1.43)h,t1/2(C)(3.78±1.91)h,tmax(T)(4.0±1.4)h,tmax(C)(2.3±0.5)h,Cmax(T)(5.47±2.41)μmol·L-1,Cmax(C)(12.31±3.57)μmol·L-1。结论血浆中的西替利嗪及杂质不干扰样品的测定,PSE的浓度在0.1～10.0μmol·L-1内线性良好,符合生物样品分析要求;犬单剂量口服T片剂后,PSE达峰时间明显滞后,t1/2延长,达峰浓度明显降低,MRT明显增大,达到缓释的目的。

基体辅助激光解吸质谱法在生物大分子质量研究中的应用

研究了基体辅助激光解析飞行时间质谱法（ＭＡＬＤＩＴＯＦＭＳ）测定蛋白和糖蛋白的实验条件，实测了重组人白细胞介素２、肿瘤坏死因子、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、白细胞干扰素α２ｂ、白细胞干扰素α１、促红细胞生成素、钙调蛋白及其片段、大鼠脑型一氧化氮合成酶和天然牛精液蛋白提取物的分子量和纯度，鉴定了蛋白质混合物中各单个成分，结果表明ＭＡＬＤＩＴＯＦＭＳ可有效地研究基因工程蛋白质和天然蛋白提取物等生物大分子的质量。

电喷雾质谱(ESI-MS)法测定多组分抗菌素中的成分

为测定乙酰螺旋霉素、庆大霉素、制霉素、麦白霉素、多粘菌素Ｅ和Ｂ等多组分抗生素中的有效成分及杂质，本文采用了电喷雾质谱技术（ＥＳＩ－ＭＳ）。测定结果表明ＥＳＩ－ＭＳ法不需标准品即可对上述混合物中除同分异构体外的各组分进行定性和半定量分析。方法准确、快速、简便。

毛细管电泳及其质谱联用技术分析重组人促红细胞生成素

用高效毛细管电泳测定了重组人促红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）的微多相性、肽图，同时采用毛细管电泳质谱联用技术鉴定了部分非糖基化胰酶消解片段和Ｏ－１２６糖基化肽的结构。方法简便、快速，适用于ｒｈＥＰＯ半成品的质量控制。

缓冲液种类对毛细管区带电泳分离蛋白质的影响

目的 寻找可同时分离酸性和碱性蛋白的合适缓冲液。方法 以马心肌红蛋白、β -乳球蛋白A、碳酸酐酶II和核糖核酸酶A为标准混合样品 ,详细研究了四种缓冲液 ,磷酸盐、硼酸盐、Tricine和Tris对毛细管区带电泳分离蛋白质的影响。结果 磷酸盐缓冲液与毛细管壁和蛋白均可发生作用 ,能改变碱性蛋白质的迁移规律 ;而硼砂缓冲液主要是通过与毛细管壁作用抑制蛋白的吸附 ,不改变蛋白质的迁移规律 ;Tris和Tricine不能有效地抑制蛋白质的吸附。结论 磷酸盐是同时分离酸性和碱性蛋白质的较好缓冲液。

降血糖植物多糖和糖甙研究进展

本文综述了近几年来国内外对降血糖植物多糖和糖甙的研究进展。

重组人红细胞生成素中N-连接糖的毛细管凝胶电泳-激光诱导荧光测定法

目的：表征重组人红细胞生成素中影响体内生物学活性的Ｎ连接糖谱。方法：以毛细管凝胶电泳激光诱导荧光检测法（ＣＧＥＬＩＦ）测定了重组人红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）中Ｎ连接的多个糖基化形式，并以此为基础研究结构与活性的关系。结果：同一生产线上的样品，其Ｎ连接糖的ＣＧＥＬＩＦ图谱基本一致；不同表达载体所表达的ｒＨｕＥＰＯ，其Ｎ连接糖的形式不同；活性不同的样品，各Ｎ连接糖组分的相对含量存在很大差异。结论：建立的方法可用于判断产品的来源及批间差异。

乙酰螺旋霉素活性成分的分析

乙酰螺旋霉素是一种含有多个活性成分的抗生素药物，本文首先用电喷雾质谱法测 定了混合物的组成，然后采用高效液相色谱和微乳毛细管电泳法分离了其中的活性成分，用 液相色谱－质谱联用技术鉴定了液相色谱的流出峰。

双波长薄层扫描法测定痛得安胶囊中新乌头碱的含量

目的 :建立痛得安胶囊中新乌头碱的含量测定方法。方法 :采用双波长薄层扫描法 ,以正己烷 乙酸乙酯 无水乙醇 氨水 ( 1 2∶8∶2 .5∶0 .5)为展开剂 ,碘化铋钾试液为显色剂 ,测定该制剂中新乌头碱的含量。结果 :线性范围为1～ 6μg ,平均回收率为 94 .80 % ,RSD为 2 .0 3%。 结论 :本法操作简便 ,结果可靠 ,实用 ,适合该制剂中新乌头碱的含量测定。

HPLC法测定复方紫黄乳膏中盐酸小檗碱的含量

目的建立HPLC法测定复方紫黄乳膏中盐酸小檗碱的含量。方法采用HPLC法,色谱柱:Agilent EclipseXDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-0.05 mol.L-1磷酸二氢钠溶液(磷酸调节pH为3.0)(30∶70),检测波长265 nm,柱温28℃,流速1 ml.min-1。结果盐酸小檗碱在20～100μg.ml-1范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为A=107.81 C-409.19(r=0.9993),平均回收率为99.53%,RSD为2.14%。结论该方法操作简便,快速易行,结果准确可靠,可作为复方紫黄乳膏的含量测定方法。

两种冰醋酸涂剂稳定性的探讨

目的探讨冰醋酸涂剂在不同溶媒中的稳定性,为修订处方提供参考。方法采用酸碱滴定法测定不同储存条件下冰醋酸在75%乙醇和水两种溶媒中的含量变化;采用气相色谱法考察乙酸乙酯含量。结果以75%乙醇为溶媒的冰醋酸涂剂在不同温度下储存,含量随时间延长而逐步降低,温度越高,下降越快,并产生乙酸乙酯;以水为溶媒的冰醋酸涂剂,醋酸含量无明显变化。结论以75%乙醇为溶媒的冰醋酸涂剂欠稳定,以水为溶媒的冰醋酸涂剂可以长期常温下储存。

复方磺胺嘧啶银混悬液中两组分含量的同时快速测定法

本文利用偏最小二乘──紫外分光光度法同时测定复方磺胺嘧啶银混悬液中磺胺嘧啶银和醋酸洗必泰的含量，平均回收率分别为：１００．４８±０．１８％和１００．４９±０．３０％（置信度９５％）。实测三批样品，结果准确可靠。测定波长２５４ｎｍ，为４４７三、讨论（一）采用常规最小二乘法［３］处理同样数据，所得结果见表１，由此可知，偏最小二法比常规最小二乘法优越，是一种适用于批量分析和结果准确可靠的方法，而且节省时间和实验试剂，对仪器的要求低，重复性好。（二）处方中醋酸洗必泰的含量相对于磺胺嘧啶银少得多，为了克服低组分含量测定误差大，采用添加法，可以减少测量和计算误差。

高效毛细管电泳分析重组人红细胞生成素

目的：本实验旨在采用仪器分析的手段，测定重组人红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）的唾液酸化程度。方法：利用ｒＨｕＥＰＯ中唾液酸带负电荷的特性，通过高效毛细管电泳分离了唾液酸化程度不同的ｒＨｕＥＰＯ。结果：ｐＨ４．０的磷酸盐缓冲液可有效地涂渍毛细管壁，减少电渗流，提高分辨率。在优化的测定条件下共分出了６种糖基化形式。结论：建立的ＨＰＣＥ法能有效地反映ｒＨｕＥＰＯ的纯度。

重组人红细胞生成素体内生物活性检测

建立了测定重组人红细胞生成素（rhEPO）体内生物活性的多血小鼠法。实验表明:rhE-PO在0.05～0.8 iu/鼠剂量范围内.对数剂量与反应（^(59)Fe 摄入量）呈直线关系。经多批rhEPO产品的体内生物活性测定,证明该法结果准确,重现性好.