茅苍术同源四倍体离体诱导与鉴定

本研究通过离体诱导的方式进行茅苍术同源四倍体新种质的创制,采用正交设计法优化茅苍术无菌快繁体系,以茎尖为外植体进行四倍体的离体诱导,采用形态鉴别、根尖染色体鉴定和流式细胞仪分析相结合的方法进行同源四倍体的鉴定。结果表明:茅苍术最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.20mg·L-1;用0.20%的秋水仙素处理12h为诱导茅苍术同源四倍体的理想条件,四倍体诱导率高达36%。本试验共诱导鉴定获得了23个茅苍术同源四倍体株系,为进一步开展优质高产茅苍术同源四倍体新品种的选育奠定了基础。

铁皮石斛同源四倍体与二倍体基因组及甲基化差异分析

采用扩增片段长度多态性(AFLP)和甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术,探讨铁皮石斛二倍体经染色体加倍后得到四倍体的过程中,遗传差异和基因组DNA甲基化水平及模式变化情况,分析了铁皮石斛二倍体与同源四倍体的基因组变异及甲基化差异。AFLP结果显示,在25对引物组合扩增的1006条带中,474条为多态性带,多态率为47.12%;在甲基化水平上,二倍体铁皮石斛总甲基化率为92.64%,全甲基化率为62.06%,半甲基化率为30.58%,同源四倍体对应的甲基化率分别为88.68%、64.50%、24.17%。甲基化模式分析显示,铁皮石斛同源四倍体有28.63%的位点发生了去甲基化,30.63%的位点发生了过甲基化。铁皮石斛同源四倍体DNA碱基序列发生改变,总甲基率低于其二倍体,且其甲基化模式发生了较大调整。本研究为进一步探索四倍体铁皮石斛的表观遗传调控机制与基因组变异机理奠定了基础。