原位杂交技术及其在动物基因定位上的应用进展

原位杂交技术是 80年代发展起来的一门新的生物技术。目前 ,在动物基因定位研究方面已得到广泛应用。

高温应激对仔猪小肠上皮脂质过氧化的动态影响

本文旨在研究高温应激状态下仔猪肠上皮脂质过氧化指标的变化。选用35日龄农大小型试验猪32头,分为对照组和应激组。各组分别于试验第1天、第3天、第6天和第10天采样,测定各段肠组织匀浆液SOD、GSH-Px、MDA含量的变化。结果发现:随着应激时间的延长,对照组肠组织中各检测指标未出现显著变化,应激组差异较大。与对照组比较,应激组试猪空肠SOD、GSH-Px活力在第6天和第10天显著降低,MDA含量在第1天和第3天显著升高;回肠SOD、GSH-Px活力在应激后第1天和第3天均显著下降,但MDA含量无显著变化;十二指肠仅见第1天出现MDA含量上升现象。这表明高温应激状态下仔猪小肠组织的脂质过氧化增强,其中以空肠组织最为明显。

中草药添加剂对夏季蛋鸡产蛋性能及蛋品质的影响

环境温度是制约蛋鸡生产性能的重要因素之一.每年6～9 月份的高温高湿季节,对蛋鸡是一种环境应激,它已成为蛋鸡生产中最为严重的应激危害因素.……

不同构型硒代蛋氨酸对岭南黄父母代肉种鸡生产性能和组织硒沉积的影响

试验采用2因子×2水平完全随机试验设计,研究了DL-、L-硒代蛋氨(selenomethionine,SM)分别在基础日粮(硒含量为0.04 mg/kg)中添加0.15和0.30 mg/kg水平对肉种鸡生产性能、血清和组织硒含量、后代雏鸡组织及种蛋硒含量的影响。试验选取480只48周龄的岭南黄肉种鸡,随机分为4组,每组3个重复,每个重复40只。预试期2周,正试期8周。结果表明:0.15 mg/kg组较0.30 mg/kg组显著提高了肉种鸡产蛋率、种蛋孵化率和出雏率(P<0.05);0.30 mg/kg组较0.15 mg/kg组显著提高了种蛋内容物、肉种鸡的血清和组织及其后代1日龄雏鸡组织中的硒含量(P<0.05);不同构型SM对肉种鸡生产性能无显著影响(P>0.05);DL-SM组较L-SM组显著地提高了种蛋内容物、肉种鸡的血清和除胰脏外的组织及1日龄雏鸡除肝脏和肌肉外的组织中的硒含量(P<0.05);在出雏率和蛋黄硒含量方面,表现出了SM构型与水平间的互作效应(P<0.05)。结果提示:在提高肉种鸡生产性能方面,DL-SM与L-SM效果相当,适宜添加水平均为0.15 mg/kg;在提高硒沉积量方面,DL-SM显著优于L-SM,0.30 mg/kg显著优于0.15 mg/kg。

猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β基因表达的变化

Toll样受体(TLR)作为一种重要的模式识别受体,在动物的天然免疫中发挥重要作用,是机体抵抗感染的第1道屏障。该研究通过建立猪肺炎支原体感染模型,探讨猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1βmRNA的表达及意义。选取80日龄无注射气喘病疫苗苏钟猪14头,随机分为攻毒组和对照组,攻毒组气管内注射猪肺炎支原体组织强毒,对照组气管内注射灭菌生理盐水。感染后观察临床症状,攻毒后18 d时X射线透视猪肺部,记录体重;攻毒后28 d时检测抗体,记录体重,扑杀剖检,采集肺脏。应用Real-time PCR方法检测肺组织TLR2、TLR4及TNF-α、IL-1βmRNA的表达变化。结果显示:猪感染肺炎支原体后,生长缓慢,体重下降;X射线透视,肺部出现典型阴影;攻毒组猪出现典型的病理变化;TLR2、TLR4及TNF-α、IL-1β表达显著升高(P<0.05)。表明:猪肺炎支原体感染后TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β表达量增加,导致肺部炎症;猪肺炎支原体感染与TLR2、TLR4的变化有密切联系,启示肺炎支原体可能通过TLR信号传导通道。

中药添加剂对高温下猪血清抗氧化功能的影响

为探讨中药添加剂对高温应激仔猪抗氧化功能的调控效果,选用35日龄中国实验用小型猪64头,分为对照组、应激组和2个中药添加剂组(方1、方2),分别于试验第1,2,4,6,10天采血清,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量变化。结果发现:与对照组相比,应激组猪血清SOD活力在第1天显著升高;MDA含量在第6天显著升高;GSH-Px活力在第6和10天显著高于常温组(P<0.05)。与应激组相比,方2组的GSH-Px活力在第2天显著升高,方1和方2组MDA含量在第10天显著降低(P<0.05)。表明高温状态下,猪体内MDA含量增加,GSH-Px活性增强;中药添加剂能促进热应激仔猪抗氧化功能的恢复和提高,且方2效果优于方1。

大豆黄酮对2周龄仔猪增重及肝脏GH受体的影响

选用16头初生时间相同的新生仔猪,公母各8头,性别相同的仔猪按初生重相近配对,随机分成试验组和对照组。在仔猪2周龄时开始给试验组仔猪耳后皮下注射大豆黄酮(每周每千克体重2mg),连续注射5周。试验仔公猪体重比对照组增加26.69%(P<0.05),仔母猪增加6.86%。结果显示大豆黄酮对仔公猪生长有一定的促进作用。屠宰后取肝脏样品,用放射受体分析法对肝脏GH受体进行分析。结果发现试验组仔公猪GH受体的最大结合容量(Bmax)高于对照组,仔公猪GH受体的解离常数(Kd)试验组与对照组基本无差异,GH受体亲和力无变化;试验组仔母猪GH受体最大结合容量(Bmax)与对照组无显著差异,Kd值无大的变化,提示大豆黄酮有增加仔公猪GH受体数量趋势。

机械破碎法分离奶牛乳腺上皮细胞的体外培养研究

采用机械破碎法分离奶牛乳腺上皮细胞 ,并对分离细胞 (试验组 )和未分离的乳腺组织块 (对照组 )进行体外培养 ,研究乳腺上皮细胞体外培养的效果。培养液由DMEM /F1 2 加 2 0 %小牛血清组成 ,培养条件为 5 %CO2 、 37℃。机械破碎法分离的细胞在培养 2d开始生长增殖 ,7d基本长满培养板底部 ;而培养的乳腺组织块细胞到 5d后才呈现旺盛生长 ,长满培养板底部需 1 4～ 1 5d。结果表明 。

波尔山羊活体采卵与卵母细胞体外受精技术

对10只不孕不育波尔母山羊采用超数排卵、活体采卵、卵母细胞体外成熟培养以及体外受精等技术方法,探讨其是否能正常繁育后代。试验中6只供体经超数排卵处理,在发情前利用特制的采卵装置进行活体采卵,共采集到30枚形态学正常的卵母细胞。经过体外成熟培养,有21枚成熟卵母细胞进行了体外受精处理和培养,获得16枚2 细胞胚胎,移植到4只同期发情的当地山羊受体输卵管内,经妊娠检验,有两只受体受孕,其中1只受体产出正常羔羊2只。该技术经进一步改进完善后可望作为不孕不育波尔山羊繁殖后代的辅助生育技术。

猪CACNA1S基因部分序列多态性检测及其与肉质性状的关联分析

采用PCR-SSCP技术,对30头苏钟猪和97头金华与皮特兰杂交F2代(JPF2)猪CACNA1S基因进行多态性检测,结合肉质性状作关联分析。结果表明:在猪CACNA1S基因1 234 bp核酸序列中,检测到25个单核苷酸突变点(SNP);关联分析结果显示,引物1S-65的AA、BB基因型对后腿肌肉重存在显著影响(P<0.05),AB基因型对后腿pH存在显著影响(P<0.05);引物1S-66的BB、BC基因型对蹄重存在极显著影响(P<0.01)。

苏钟猪TLR4多态性及编码区C1027A功能分析

【目的】研究苏钟猪TLR4的多态性及其编码区第1 027 bp处突变对TLR4蛋白功能的影响。【方法】采用PCR-SSCP的方法检测TLR4在苏钟猪中的多态性并利用real-time PCR方法检测不同基因型(CC型和AC型)的猪肺泡巨噬细胞经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导后,TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β表达量的变化情况,探讨该处突变对TLR4识别LPS的影响。【结果】①共检测到3个突变:G962A、C1027A、G960A,其中前两个为有义突变,且C1027A突变可引起编码氨基酸性质的改变;②LPS能快速诱导猪肺泡巨噬细胞中TLR4及促炎症因子TNF-α和IL-1β表达水平上调且TLR4编码区C1027A不同基因型(CC型和AC型)的猪肺泡巨噬细胞(pulmonary alveolar macrophages,PAMs)对LPS的敏感性及反应强度存在显著性差异。【结论】苏钟猪TLR4编码区的序列相对保守、多态含量较低,群体遗传变异程度较小。TLR4编码区C1027A突变能影响TLR4识别LPS的能力,等位基因C为苏钟猪抗革兰阴性菌感染的优势基因。

猪Toll样受体4基因(TLR4)外显子SNP检测及生物信息学分析

Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体,其多态性与动物对相关病原的免疫力有着明显的相关性。为了对猪TLR4基因进行多态性分析,试验采用PCR-SSCP结合核苷酸测序法研究了梅山猪、二花脸猪、苏钟猪、姜曲海猪、淮猪、金华猪、大约克猪、皮特兰猪及金华与皮特兰杂交F2代猪(JPF2)9个群体共90个样本TLR4基因外显子序列的单核苷酸多态性,并对猪TLR4基因进行了生物信息学分析。结果检测到4个突变:G400A、G962A、C1027A、G960A,其中前3个为有义突变,且C1027A突变引起编码氨基酸性质的改变;生物信息学分析表明猪TLR4基因含有一个2 526 bp的开放阅读框,编码841个氨基酸;序列比较发现猪与牛、绵羊、人和小鼠TLR4基因cDNA序列相似性分别为87%、86%、79%、73%,编码的氨基酸序列相似性分别为81%、80%、73%、64%。TLR4基因多态性检测结果表明猪TLR4基因的单核苷酸多态性在中外猪种中存在明显差异,结合生物信息学分析推测该基因编码蛋白质LRR(富含亮氨酸重复序列)功能域上的突变可能与猪种对疾病的易感性不同有关。

去乙酰化酶SIRT1及其对细胞凋亡调控的研究进展

细胞凋亡在机体生理功能中起着重要作用,是机体清除体内损伤、衰老及具有潜在威胁性细胞的一种基本方式。沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 2homolog 1,SIRT1)作为哺乳动物Sirtuin家族的一员,自发现以来作为重要的调控因子被广泛研究;最近研究报道SIRT1调控一系列转录因子如p53、FOXO家族和NF-κB,在细胞凋亡中起关键的作用。作者主要阐述了SIRT1的分子生物学特性、表达调控及SIRT1与细胞凋亡的关系。

不同种、品种牛精子长度的研究

通过染色固定 ,用显微镜、目尺测定不同种、品种牛精子的总长、头长及头宽 ,比较黄牛、肉牛、奶牛及水牛精子的长度差异。测定结果精子的总长黄牛为 74 62 μm ,肉牛为 72 3 7μm ,奶牛为 72 48μm ,而水牛为 64 84μm。黄牛、肉牛、奶牛精子的总长与水牛精子总长相比差异都极显著 ,而黄牛、肉牛、奶牛之间没有多少差异。

加拿大养猪业的现状

１加拿大的基本情况加拿大是北美洲仅次于美国的发达国家。其人口只有２９００多万（１９９７年），而农用耕地有６７．８万ｋｍ２，未开垦土地有４６万多ｋｍ２，是一个地多人少的国家。由于其地理位置偏北，整个国家在北纬５０°以北，属（寒）温带针叶林气候（相当于我...

猪CACNA1S基因内含子37的克隆及多态性研究

根据不同物种间保守性及相似性的特点,跨内含子设计引物,利用聚合酶链式反应(PCR)技术对猪CAC-NA1S内含子37进行克隆;采用PCR-SSCP技术,检测金华与皮特兰杂交F2代猪(JPF2)和苏钟猪CACNA1S基因内含子37的单核苷酸突变点(SNP),并结合JPF2猪生产性状进行相关分析。结果表明:(1)克隆得到猪CACNA1S基因内含子37完整DNA序列(235bp);(2)在猪CACNA1S基因内含子37中检测到6个SNP;(3)相关分析显示,位点1S-76对体长存在显著性影响(0.01<P<0.05)。