南极土壤芽孢杆菌的分离鉴定及其防治玉米细菌性褐腐病的研究

[目的]本研究旨在从南极土壤中筛选防治玉米细菌性褐腐病的芽孢杆菌菌株,为该病害的防治提供菌株资源。[方法]从南极长城站地震台附近的企鹅聚居地土壤中分离芽孢杆菌。结合16S rDNA及gyr B基因序列对分离到的芽孢杆菌进行鉴定。借助平板抑菌试验筛选对玉米细菌性褐腐病病原菌具有拮抗效果的生防芽孢杆菌。通过田间防治试验,筛选具有较好生防效果的芽孢杆菌。利用MALDI-TOF-MS对芽孢杆菌产生的抗菌物质脂肽化合物进行鉴定。[结果]通过16S rDNA及gyr B基因序列对分离自南极的23株芽孢杆菌进行鉴定,其中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)9株,地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)14株。借助平板抑菌试验,筛选获得抑菌效果明显的2株B.amyloliquefaciens菌株EZ15-07、EZ15-09和2株B.licheniformis菌株EZ01-05、EZ15-08。田间试验结果表明,菌株EZ15-07和EZ01-05对玉米细菌性褐腐病的防治效果分别为59.3%和55.3%。对这2个菌株发酵液的MALDI-TOF-MS检测表明,菌株EZ15-07能产生Surfactin和Bacillomycin D 2种脂肽化合物,菌株EZ01-05能产生Bacillomycin D和Fengycin 2种脂肽化合物。[结论]由南极土壤分离获得的菌株EZ15-07和EZ01-05对玉米细菌性褐腐病防治效果显著,2个菌株均具有较好的田间应用潜力。

大螟对7种杀虫剂的抗药性监测及相对敏感基线验证

[目的]监测不同地区大螟田间种群对常用7种杀虫剂的抗药性水平,通过不同年份的对比,了解大螟抗药性的发展趋势和地区差异,并验证前期报道的相应敏感基线资料,为抗药性监测和田间用药提供科学依据。[方法]田间采集不同地区的大螟高龄幼虫,室内隔离饲养繁殖一代,采用初孵幼虫人工饲料药膜法进行杀虫剂毒力测定,并与历年测定的相关资料对比,评估确定相对敏感基线。[结果]2014年监测江西贵溪、浙江温岭和江苏南京的大螟,发现不同地区种群对阿维菌素（LC50值为0.065 0~0.209 4 mg·L-1）、氯虫苯甲酰胺（0.262 6~0.569 2）、氟苯虫酰胺（0.478 8~1.241 7）、稻丰散（3.4874~6.152 4）、茚虫威（3.620 4~5.652 9）、毒死蜱（64.828 7~89.643 7）的敏感差异较小,仅多杀菌素（0.106 5~0.684 6）表现出明显的地区差异。比较近5年大螟对不同杀虫剂的敏感性变化,发现阿维菌素、氯虫苯甲酰胺、茚虫威和毒死蜱的LC50值变化不大,波动幅度都在2倍以内;而对稻丰散的敏感性显著下降,与2009和2010年监测结果相比,浙江温岭种群的LC50值分别增加了12.79和10.29倍,江苏南京种群也分别增加了9.53和8.72倍。分析各地历年人工饲料药膜法测定大螟药剂敏感性的结果,发现张海艳等2012年报道的大螟室内恢复种群对不同杀虫剂的LC50值与田间测得的最敏感种群基本一致,上下波动不超过1.7倍。[结论]3个地区大螟田间种群对稻丰散已经产生了一定的抗性,局部地区大螟对多杀菌素敏感性明显下降,而对其他测试杀虫剂还没有产生明显的抗药性。张海艳等2012年报道的大螟对不同杀虫剂的相对敏感基线,可以作为初孵幼虫人工饲料药膜法监测大螟田间抗性的相对敏感基线使用。

加拿大一枝黄花(Solidago canadensis L.)水浸提液对小麦的化感作用及机制

为了阐明加拿大一枝黄花(Solidago canadensis L.)对小麦的化感作用机制,研究了加拿大一枝黄花新鲜茎叶的水浸提液对小麦(Triticum aestivum)种子萌发和幼苗生长的影响,以及对小麦种子中α-淀粉酶活性、叶片中脂质过氧化作用及根系活力的影响。整个试验在完全随机情况下进行,一组质量浓度0.025、0.05和0.1 g·mL-1水浸提液用于对小麦化感作用的研究,在此基础上,设置另一组质量浓度0.01、0.02和0.03 g·mL-1水浸提液用于作用机制随水浸提液处理7和14 d时的变化研究,均用蒸馏水作空白对照。结果表明:在水浸提液质量浓度为0.025、0.05和0.10 g·mL-1时,加拿大一枝黄花水浸提液对小麦种子萌发和幼苗生长表现出很强的抑制作用,而且抑制强度随水浸提液质量浓度的增加而增强。水浸提液抑制小麦种子α-淀粉酶的活性,0.03 g·mL-1时达到显著水平(P<0.05)。水浸提液处理小麦7 d后,小麦叶片中SOD、POD和CAT活性均受到抑制,MDA含量显著升高,作用强度随水浸提液质量浓度的增加而增强。处理14 d后,SOD与CAT活性呈现出不规律性波动,MDA含量仍呈上升趋势,总体水平低于7 d时的试验结果;POD活性呈下降趋势,但与对照无显著差异,总体水平高于7 d时的试验结果。水浸提液处理后,小麦根系活力升高,随着处理时间延长,根系活力有所下降。结论:加拿大一枝黄花水浸提液对小麦种子萌发的抑制作用与α-淀粉酶活性的变化有关,对小麦幼苗生长的抑制作用与脂质过氧化作用和根系活力的变化有关。

大豆细菌性斑疹病的病原鉴定及大豆新种质抗性评价

通过对一种近年在江苏省南京市发生严重的大豆叶部病害的病原物进行分离鉴定,检测和评价了本地区大豆新育成品种系及亲本对该病害两个菌株的抗病性。结果表明:通过病原物分离和回接大豆,确定了4株细菌是引起该病害的病原物。形态学观察、生理生化测定、以及16S r DNA和gyr B聚类分析表明这4株菌株属于地毯黄单胞菌大豆致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.glycines)。233份大豆新种质对强致病性菌株C5和B523的抗病性检测结果表明,其对两个菌株的抗性反应存在差异,对C5和B523具有抗病性(高度抗病+中度抗病)的种质分别只占鉴定材料的40.35%和37.77%,说明本地品种总体抗性水平并不高,病害具备流行的前提条件;只有苏鲜21和徐豆16对两个菌株均表现高抗,是抗病育种的优良亲本。

小麦田看麦娘对精噁唑禾草灵的抗药性水平

为了掌握小麦田看麦娘对精噁唑禾草灵的抗药性情况,采用种子生物测定和整株生物测定的方法检测江苏、上海地区看麦娘对精噁唑禾草灵的敏感性,明确其抗药性水平。结果表明,在2013年检测的23个看麦娘种群中,有12个种群对精噁唑禾草灵表现出抗药性,抗性比例达52. 17%。抗药性水平最高的是采自江苏扬州的13JYGY-4种群,抑制中剂量为1 835. 21 g a. i./hm^2,相对抗性倍数达125. 53倍。2014、2015年定点检测结果表明,抗精噁唑禾草灵看麦娘的整体抗性水平仍然较高。

丁香假单胞大豆致病变种不同HrpZ蛋白差异区域功能研究

[目的]丁香假单胞大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)A1和S1菌株编码产生的Hrp Z蛋白差异序列主要集中在C端的3个区域,并且这2个蛋白诱导非寄主HR的能力也存在差异。本研究将探究Hrp Z蛋白这3个差异区域在烟草上诱导HR(hypersensitive response)和抑制烟草花叶病毒(TMV)中所起的作用。[方法]采用常规PCR及重叠PCR方法将这2个hrp Z基因的3个差异区域分别进行互换,构建了相应的重组表达载体,表达并纯化得到了6个重组蛋白,相对分子质量均在41×103左右。并检测了其诱导HR活性、诱导植物抗病性。[结果]检测结果表明:重组蛋白Hrp ZS(S2→A2)和Hrp ZA(A3→S3)诱导HR的能力相比亲本都有所增强,6个重组蛋白诱导烟草抗TMV的活性都明显强于亲本,其中,Hrp ZA(A3→S3)和Hrp ZS(S3→A3)的活性最强。[结论]此试验表明Hrp Z蛋白的这些差异区域(第7、8、9个α-螺旋)是过敏反应能力的主要调控区域,同时C-端第8、9个α-螺旋区域与诱导植物抗病性也显著相关。本研究为改造Hrp Z类harpin蛋白激发子,提高其诱导抗性及功能域研究提供了理论依据。

不同除草剂防除小麦田菵草试验初报

为筛选无为市小麦田菵草适宜的防除药剂,选择当地农资市场上登记防除菵草的几种药剂进行田间防效对比试验。结果表明:30g/L甲基二磺隆可分散油悬浮剂+15%炔草酯水乳剂,在制剂使用量为300g/hm^(2)+750g/hm^(2)时,药后40d防效可达85.12%,为所有处理中防效最好;其次为30g/L甲基二磺隆可分散油悬浮剂,在制剂使用量450g/hm^(2)时,药后40d防效为76.45%;其他处理的防效均低于50%,难以有效防除小麦田菵草。另外,小麦田菵草化学防除要注意适时适量,因地制宜,才能取得较好的防除效果。