影响羊肉质候选基因的研究进展

羊肉具有高蛋白、低脂肪、低胆固醇等特性,随着城乡居民生活水平的逐步提高,市场对羊肉的需求量逐年增加,并且对其的需求已不仅仅局限在数量上,对品质的要求也越来越高,对羊肉的消费正由数量型逐渐向质量型过渡。因此,羊肉的品质特性研究日益受到重视。肉质性状主要包括背膘厚、肌内脂肪含量、眼肌面积、大理石花纹、系水力、pH值、肉色、嫩度和风味等指标。肉品质是一个复杂的综合性状。

RFRP-3在湖羊雄性生殖器官发育过程中表达的研究

[目的]本文旨在揭示RFRP-3基因在不同年龄段湖羊雄性生殖器官发育中的表达变化规律及其参与繁殖营养调控的作用。[方法]利用荧光定量PCR法检测RFRP-3在10日龄、4月龄、8月龄等不同阶段雄性湖羊(n=3)的睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾及输精管中的表达情况;利用免疫组化法检测RFRP-3在8月龄雄性湖羊生殖器官的定位表达;利用荧光定量PCR法分析不同营养饲喂水平下RFRP-3基因在湖羊雄性生殖器官中的表达差异。[结果]RFRP-3基因在睾丸和输精管中相对高表达,在附睾头,附睾体,附睾尾中相对低表达;RFRP-3蛋白分布于睾丸的生精小管内部、输精管及附睾,可见免疫阳性反应;在高能高蛋白水平饲喂下,RFRP-3基因在雄性湖羊生殖器官中表达量显著低于正常饲喂水平。[结论]RFRP-3在湖羊雄性生殖器官内表达,且在不同组织和不同营养饲喂水平下表达量差异显著,为研究RFRP-3的生物学功能及其参与动物繁殖营养调控提供了依据。

能量限饲和补偿对湖羊生长性能及相关激素和肉品质的影响

[目的]本试验旨在探索能量限饲和补偿对湖羊生长性能、血液生长相关激素和背最长肌肉品质的影响。[方法]选取90日龄体质量为(22.02±0.14)kg健康湖羊公羔80只,随机分为4组:对照组(EC)、85%能量组(EG1)、70%能量组(EG2)和55%能量组(EG3)。限饲2个月,其日粮能量水平分别为11.63、9.73、8.40和6.84 MJ·kg-1。补偿期3个月,日粮能量水平均为12.44 MJ·kg-1。试验期间羔羊每个月称质量,采取颈静脉血测定血清激素水平,在限饲和补饲结束时分别屠宰采取背最长肌样进行肉品质鉴定。[结果]限饲结束后,EG1、EG2和EG3组体质量和日增重显著低于EC组(P<0.05)。补饲后,限饲组体质量与对照组相近(P<0.05)。限饲结束,随着限饲水平提高,血液生长激素(GH)水平升高(P<0.05),而胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平逐渐降低(P<0.05)。补饲后,EG2和EG3组的GH浓度显著高于EC和EG1组(P<0.05),而各组IGF-1水平相近(P>0.05)。限饲后,EG3组背最长肌的pH值、pH24 h值和滴水损失均高于EC和EG1组(P<0.05);EG2和EG3组背最长肌粗蛋白含量显著高于EC组(P<0.05),而粗脂肪含量却低于EC组(P<0.05);眼肌面积和肌纤维横截面积均随限饲水平增大而逐渐减小(P<0.01);EG2和EG3组肌纤维密度极显著高于EC和EG1组(P<0.01)。补饲后,EG1组背最长肌失水率高于EC和EG3组(P<0.05);EG2组肌纤维横截面积高于EC和EG1组(P<0.01)。[结论]能量限饲会降低羔羊体质量,提高血液GH水平,降低血液IGF-1水平,提高背肌蛋白比例,增加肌纤维密度,进而改善肉质。补偿生长后,血液GH保持高浓度,生长性能虽能恢复正常水平,但肉品质相对变差。85%能量限饲后偿效果最好。

日粮中添加不同水平紫苏籽对湖羊生长性能、瘤胃发酵及养分表观消化率的影响

本试验旨在研究日粮中添加不同水平紫苏籽(Perilla frutescens seed,PFS)对湖羊生长性能、血清生化指标、养分表观消化率及瘤胃发酵的影响。选取2月龄、平均初始体重为(23.02±1.36)kg的湖羊公羔60只,依据日粮中PFS含量随机分成为:对照组(Control)、5%紫苏籽组(5%PFS)、10%紫苏籽组(10%PFS)和15%紫苏籽组(15%PFS)。预试期14d,正试期70d。饲喂试验结束前21d,从各组随机挑选4只羊进行7d的消化代谢试验。试验结束后称重,计算平均日增重(ADG),并采集瘤胃液和血液分别用气相色谱法、比色法、全自动生化分析仪和酶联免疫分析法测定瘤胃液挥发性脂肪酸(VFA)、氨态氮(NH_3-N)、血清中总蛋白(TP)、尿素氮(UN)、葡萄糖(Glu)和血清中生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)等。结果表明,日粮中PFS水平对湖羊生长性能(干物质采食量、平均日增重和料重比)、血清生化指标(TP、UN、Glu、GH和IGF-1)、瘤胃pH和瘤胃液乙酸、丙酸及总挥发性脂肪酸(TVFA)等含量的影响不显著(P>0.05),但随着PFS添加水平的升高,乙酸、丁酸和TVFA的含量呈降低趋势,丙酸呈上升趋势;与对照组相比,15%PFS组中NH_3-N和乙酸/丙酸极显著降低(P<0.01);添加PFS不影响日粮中粗脂肪(EE)和酸性洗涤纤维(ADF)的表观消化率(P>0.05),但干物质(DM)、有机物(OM)和中性洗涤纤维(NDF)的表观消化率随着PFS添加水平升高而下降,且15%PFS组的DM和OM的表观消化率均极显著低于对照组(P<0.01);与对照组相比,10%PFS组的粗蛋白(CP)表观消化率极显著提高(P<0.01),而15%PFS组的极显著降低(P<0.01)。综上所述,湖羊日粮中添加PFS水平为10%时,饲喂效果较好。

山羊诱导性多能干细胞培养体系的筛选

[目的]使用多种培养成分组合,筛选出一个适合山羊诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)的培养体系。[方法]采用慢病毒作为载体,携带多能因子,采用多种培养成分(培养基、血清和细胞因子)的组合培养山羊i PSCs,优化其培养体系。[结果]用FBS代替KSR可以提高克隆的形成效率以及克隆的质量,而用DMEM/F12代替KNOCKOUT-DMEM,i PSCs克隆的形成效率和克隆质量没有明显的改善。带有β-FGF的培养体系可以保持i PSCs未分化的状态,而培养体系中只加LIF不能维持i PSCs未分化的状态。[结论]该研究成功诱导出山羊i PSCs,且能在体外传代培养。

不同病毒感染方法对山羊体细胞重编程效率的影响

[目的]检测2种病毒感染方法(悬浮感染和贴壁感染)对体细胞重编程效率的影响。[方法]采用慢病毒作为载体携带多能因子分别使用悬浮感染和贴壁感染2种方法感染正常山羊体细胞,统计克隆形成率。[结果]悬浮感染和贴壁感染的平均克隆率分别为0.44‰和0.31‰,悬浮感染的效果要显著地优于贴壁感染。[结论]悬浮感染的方式更利于山羊成纤维细胞重编程。

不同来源山羊体细胞重编程效率比较

[目的]检测克隆奶山羊(♀12003)和转基因克隆奶山羊(♂12001)作为供体细胞,对体细胞重编程效率的影响。[方法]采用慢病毒作为载体,携带多能因子来感染正常山羊(g2)、♀12003和♂12001体细胞,统计克隆形成率和碱性磷酸酶阳性克隆率。[结果]与普通山羊(g2)相比,转基因克隆奶山羊耳成纤维细胞的重编程效率低,出现的细胞克隆在传代之前容易分化;克隆奶山羊体细胞与普通山羊体细胞的重编程效率接近,转基因克隆奶山羊(♂12001)的重编程效率极显著低于克隆奶山羊(♀12003)和普通山羊(P<0.01)。[结论]转基因克隆奶山羊体细胞可以被重编程为诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs),但效率较低。

山羊体细胞重编程过程中慢病毒对细胞的毒性作用

[目的]检测慢病毒对普通山羊、克隆奶山羊和转基因克隆奶山羊的作用.[方法]采用慢病毒作为载体感染普通山羊、克隆奶山羊(♂12001)和转基因克隆奶山羊(♀12003)体细胞,通过细胞生长曲线,检测慢病毒对3种山羊细胞的毒性作用.[结果]感染后的3种体细胞在感染前3 d,细胞大量凋亡,4~7 d筛选出的细胞大量增殖.未经慢病毒感染的3种细胞接种2 d后数量开始明显增加,第25天进入对数生长期,第57天进入平台期,呈现典型的"潜伏期-对数生长期-停滞期"生长模式.[结论]慢病毒对细胞有毒性作用,会引起细胞大量凋亡.

营养水平对湖羊生长性能、血清生化指标、屠宰性能和肉品质的影响

[目的]本试验旨在探究不同营养(能量和蛋白)水平日粮对湖羊生长性能、血清生化指标、屠宰性能和肉品质的影响。[方法]选择40只体质量为(18.35±1.39)kg的湖羊公羔,随机分为4组,每组10只。设计4种日粮水平饲喂湖羊公羔,分别为对照组(代谢能8.40 MJ·kg^(-1),粗蛋白12.84%),高蛋白(HP)组(代谢能8.68 MJ·kg^(-1),粗蛋白15.33%),高能量(HE)组(代谢能9.70 MJ·kg^(-1),粗蛋白13.05%)和高能、高蛋白(HEP)组(代谢能9.66 MJ·kg^(-1),粗蛋白15.44%)。试验期60 d。在试验开始和结束时测定羔羊日增质量(ADG)、平均采食量(ADFI)和料重比(F/G)等生长性能指标,并采集血液样品分析总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、尿素氮(BUN)、血糖(GLU)和甘油三酯(TG)等血清生化指标,同时在试验结束时进行屠宰试验,测定活体、胴体、血液、头、蹄、皮毛、内脏及消化道质量等屠宰性能以及p H值、失水率和熟肉率等肉品质指标。[结果]3个试验组(HP、HE和HEP)的终末体质量和ADG均显著高于对照组(P<0.05);F/G的变化规律为对照组显著高于HP组,HEP组显著高于HE组(P<0.05)。血清TP含量从大到小依次为HEP组、HP组、HE组和对照组,BUN浓度从高到低为HP组、HEP组、HE组和对照组,差异显著(P<0.05);HE组的GLU和TG浓度显著高于其他3组(P<0.05)。3个试验组宰前活质量和胴体质量显著高于对照组(P<0.05);HE组和HEP组的屠宰率和眼肌面积显著大于其他2组(P<0.05);与对照组相比,3个试验组的头、蹄、皮毛、心脏、肝、肾和小肠的质量有增长趋势(P>0.05);HP组瘤胃质量显著高于其他3组(P<0.05)。3个试验组失水率显著低于对照组(P<0.05)。[结论]提高日粮营养水平可改善湖羊公羔生长性能、屠宰性能与肉品质,并对血清中与蛋白代谢或能量代谢的相关指标产生影响;高能量水平日粮在湖羊公羔育肥阶段发挥更重要的作用。

不同硒源对育成湖羊生长性能、组织硒含量和瘤胃发酵的影响

[目的]本试验旨在研究不同硒源和硒水平对育成期湖羊母羊生长性能、组织硒含量和瘤胃发酵的影响。[方法]选取48只6月龄、平均体质量(27.95±0.27)kg湖羊母羊,随机分为4组,每组2个重复,每个重复6只(分栏饲喂),分别饲喂不同硒源和硒水平的全混合(TMR)日粮。对照组(C组)饲喂基础日粮,试验组日粮中分别添加0.5 mg·kg^(-1)酵母硒(0.5 SY组)、0.3 mg·kg^(-1)酵母硒(0.3 SY组)和0.3 mg·kg^(-1)亚硒酸钠(0.3 SS组),试验期70 d。[结果]与C组相比,试验组湖羊的日增重均有增加趋势,料重比均有降低趋势,其中0.3 SY组的日增重显著增加(P<0.05),0.5 SY组和0.3 SY组的料重比显著降低(P<0.05);背最长肌的p H值组间差异显著(P<0.05),其中0.3 SY组显著高于C组;试验组湖羊的背最长肌中的硒沉积量显著增加,0.3 SY组肝脏和背最长肌中的硒沉积量均显著高于C组(P<0.05);饲料各养分的表观消化率均有提高的趋势,0.3 SS组中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率显著高于C组(P<0.05);0.3 SY组和0.3 SS组的粗蛋白(CP)的表观消化率显著高于C组(P<0.05);0.5 SY组的粗脂肪(EE)的表观消化率显著高于C组(P<0.05);0.5 SY组的瘤胃液p H值显著高于C组(P<0.05);0.5 SY组和0.3 SY组瘤胃液的氨态氮浓度显著低于C组(P<0.05);0.3 SY组瘤胃液的乙酸浓度和总挥发性脂肪酸浓度显著高于其他组(P<0.05)。[结论]在饲料中添加0.3 mg·kg^(-1)酵母硒有助于促进育成湖羊的生长和瘤胃发酵,并增加肝脏和肌肉中硒的沉积。

益生菌发酵饲料在反刍动物生产上的应用

饲料发酵技术可以提高饲料利用率、改善饲料品质,在一定程度上缓解环境污染。益生菌具有无毒、无不良反应、无残留、成本较低且使用方便等特点,具有改善饲料品质、提高饲料利用率、促进动物生长、预防疾病等作用,是目前公认的绿色添加剂之一。文章主要就益生菌发酵饲料的作用机理、在反刍动物生产中的应用及发展前景等作以综述。