湖羊不同发育阶段卵泡内代谢产物和激素含量的比较研究

本试验旨在研究代谢产物、代谢激素和生殖激素在湖羊黄体期不同发育卵泡内的变化。选用体质量40kg左右的湖羊11头,同期发情结束后第12天屠宰,按不同大小卵泡分离卵泡液。试验结果表明,与≤2.5mm卵泡相比,>2.5mm卵泡内的葡萄糖浓度显著提高(P<0.05),胰高血糖素浓度显著降低(P<0.05),乳酸脱氢酶(LDH)活性和睾酮浓度极显著降低(P<0.01),雌二醇浓度极显著提高(P<0.01),而血氨、游离脂肪酸、尿素、胰岛素和孕酮浓度差异不显著。雌二醇浓度与LDH活性呈极显著负相关(P<0.01),与葡萄糖浓度呈显著正相关(P<0.05),与胰高血糖素浓度呈显著负相关(P<0.05),与睾酮浓度呈极显著负相关(P<0.01),与孕酮浓度接近正相关(P=0.051)。试验结果表明代谢产物和激素共同参与调节卵泡发育。

青贮甘蔗梢替代玉米秸秆对湖羊生长性能、消化代谢及肉品质的影响

[目的]本试验旨在探索青贮甘蔗梢替代青贮玉米秸秆作为肉羊日粮的可行性,并确定最佳的替代比例。[方法]选取3月龄、体重相近[(20.15±2.18)kg]的健康湖羊公羔48只,随机分成4组,每组3个重复,分别用青贮甘蔗梢替代0%(对照组)、50%(A组)、75%(B组)、100%(C组)青贮玉米秸秆饲喂,预试期10 d,正试期为60 d。试验开始和结束时测定湖羊生产性能,并采集血液样品进行血清生化分析;饲喂试验结束后,从每组不同重复各选择1只湖羊屠宰,测定其屠宰性能及肉品质;从每组不同重复再挑选3只湖羊进行消化代谢试验,测定养分消化代谢参数。[结果]B组和C组平均日增重、胴体重和屠宰率显著高于A组和对照组(P<0.05);B组和C组氮沉积量显著高于A组和对照组,A组、B组和C组的表观消化能和能量转化率均显著高于对照组;各组间血液生化指标、肉品质及肉营养成分均无显著差异(P>0.05)。青贮甘蔗梢替代75%和100%青贮玉米秸秆可以显著提高湖羊生长性能和屠宰性能,而且对湖羊血清生化指标、组织器官发育和肉品质无不利影响。[结论]青贮甘蔗梢可替代青贮玉米秸秆饲喂肉羊,且最佳替代比例为75%~100%。

高繁殖力黄淮山羊大卵泡颗粒细胞上调表达基因的研究

旨在对山羊卵巢有腔卵泡发育中基因表达特点进行研究。本研究应用抑制消减杂交技术(SSH)对黄淮山羊卵泡期卵巢非闭锁大卵泡(6 mm)和小卵泡(4 mm)颗粒细胞内差异表达基因进行了研究,建立了消减cDNA文库,通过斑点杂交分析,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,结果发现,其中有8个与已知功能基因高度相似,12个全新的表达序列标签(EST)。结果显示,这些基因可能影响着山羊卵泡的发育成熟和排卵。

不同发育阶段湖羊生殖器官脂联素受体与睾酮分泌关键基因表达模式及相关性研究

旨在探究不同发育阶段湖羊生殖器官中脂联素受体(adiponectin receptor,AdpR)及睾酮(testosterone,T)分泌相关基因mRNA的表达变化及相关性分析。选取3、9、24月龄(M)湖羊各5只,颈静脉采血并收集血清,屠宰后,采集下丘脑、垂体、睾丸、附睾头、体、尾组织;ELISA技术检测各月龄湖羊血清中脂联素(adiponectin,Adp)、T、促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)、促性腺激素抑制激素(gonadotropin inhibitory hormone,GnIH)浓度;qRT-PCT技术检测不同发育阶段湖羊下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamus-pituitary-gonad axis,HPG)中AdpR1和AdpR2及T分泌关键基因mRNA表达规律;免疫组化技术对AdpR1在湖羊睾丸和附睾中进行定位分析。结果表明:不同发育阶段湖羊血清中Adp、GnRH、GnIH浓度呈现不同的变化趋势,其中Adp含量在性成熟后(9和24月龄)显著高于性成熟前(3月龄)(P<0.05)。AdpR1mRNA表达量在各个月龄睾丸和附睾尾中均显著高于AdpR2(P<0.05),其中AdpR1mRNA表达量在二者中呈上升趋势,且差异显著(P<0.05),而在附睾头、体差异不显著(P>0.05)。AdpR1存在于睾丸间质细胞、生精细胞、曲精细管管壁肌样细胞、精子细胞以及附睾头、体、尾的上皮细胞。血清中Adp与T含量呈显著正相关(P<0.05);Adp含量与GnIH负相关以及与GnRH正相关,但差异不显著(P>0.05);AdpR1mRNA表达水平与StAR、3β-HSD mRNA表达水平呈显著正相关(P<0.05)。综上表明,在湖羊生殖器官发育过程中,Adp通过与其受体AdpR1结合,促进T的产生,进而影响湖羊睾丸发育。

营养水平对波杂羔羊产肉性能和羊肉品质的影响

为探明营养水平对波杂羔羊产肉性能和羊肉品质的影响,选用断奶2~3月龄的波杂羔羊100只,将不同能量与蛋白组成5个处理,分析测定育肥40 d后波杂羔羊的体尺、屠宰指标、肉质性状、肌纤维直径和氨基酸含量等。结果显示：提高育肥强度（增加饲料中蛋白质和能量水平）后肉品的肉色、熟肉率和眼肌面积有显著或极显著改善,而pH值、失水率、剪切力和肌纤维直径则没有显著变化;中等（8.45 MJ/kg、9.55 MJ/kg、10.20 MJ/kg）和高等（10.58 MJ/kg、11.57 MJ/kg、13.23 MJ/kg）能量水平下,提高饲料中的蛋白质水平均能显著提高羊肉中的氨基酸含量。表明提高育肥强度可以提高波杂羔羊的产肉性能,在一定的能量水平下提高饲料中蛋白质水平可以提高羊肉品质。

育肥中后期杜泊羊湖羊杂交F_1代公羊能量需要量参数

【目的】为杜湖杂交F1代公羊确定育肥中后期的能量需要量参数,为该品种绵羊能量这一营养指标提供理论依据。【方法】本试验采用比较屠宰法,将能量需要量解析为维持能量需要量和生长能量需要量,采用代谢能和净能两个指标体系进行测定。试验选用体重为35 kg左右的杜湖杂交F1代公羊42只,其中的30只试验羊用于比较屠宰试验,将试验羊随机分为自由采食组、低限饲组和高限饲组3个采食量水平,使其日增重分别达到350、150和0 g,分别在试验第1天(6只)、自由采食组羊体重分别达到43 kg(6只)和50 kg(18只)时分3批进行屠宰,以便得到试验羊的体能量沉积量。另外,12只羊用于消化代谢试验,同样按上述采食量水平随机分为3组,利用推荐公式对试验羊的甲烷产量和产热量进行预测,并以此计算得到代谢能摄入量分别10.69、11.99和12.33 MJ(每采食1 kg日粮的代谢能摄入量)。【结果】维持净能(net energy for maintenance,NEm)需要量为271.6 kJ.kg-0.75,代谢能维持效率为0.66;维持代谢能(metabolizable energy for maintenance,MEm)需要量为413.7 kJ.kg-0.75;35—50 kg日增重100—350 g的生长净能需要量为0.81—3.12 MJ.d-1;35—50 kg日增重100—400 g的生长代谢能需要量为1.47—5.38 MJ.d-1,代谢能生长效率为0.55。【结论】较为系统地得到了35—50 kg杜湖杂交F1代公羊能量需要量指标,其中包括维持净能、维持代谢能、生长净能和生长代谢能,与国内外肉羊营养需要量的研究结果相近。

多不饱和脂肪酸日粮中添加酵母硒对湖羊脂肪酸组成和抗氧化的影响

旨在研究富含多不饱和脂肪酸(PUFAs,添加紫苏籽)添加酵母硒对湖羊肌肉和肝脂肪酸组成及抗氧化的影响。本研究选取3月龄、体重为(23.02±1.36)kg的湖羊公羔45只,随机分为3组,分别为基础日粮组(C)、C+10%紫苏籽组(PFS)和C+PFS+酵母硒组(PFS+Se)。预试期10d,正试期60d。试验开始和结束时测定羔羊生产性能,颈静脉采血进行生化分析,同时在试验结束时进行屠宰试验,取背最长肌和肝,测定脂肪酸组成、抗氧化酶活性和抗氧化基因表达量。结果表明:1)多不饱和脂肪酸日粮中添加酵母硒对湖羊生长性能和屠宰性能均无显著性影响(P>0.05)。2)日粮中添加紫苏籽和酵母硒均显著提高湖羊背最长肌粗脂肪含量(P<0.05),但对Fe、Cu、Na、K和Mg等矿物质元素含量无显著影响(P>0.05)。3)日粮中添加紫苏籽和酵母硒均显著增加肌肉和肝n-3多不饱和脂肪酸含量,降低n-6/n-3的比值(P<0.05)。4)在紫苏籽日粮中添加酵母硒显著提高了血清CAT活性和T-AOC(P<0.05),降低了肝中丙二醛含量(MDA,P<0.05),提高了肝中CAT和GPX基因的表达量(P<0.05)。上述结果表明,在紫苏籽日粮中添加酵母硒可提高湖羊机体的抗氧化能力,但不能促进PUFA沉积。因此,酵母硒可能不是促进饲喂紫苏籽日粮湖羊PUFA沉积最有效的方式,需进一步探究有效的抗氧化剂。

杜泊羊和湖羊杂交F_1代公羊能量及蛋白质的需要量

为解决目前在畜牧业中广泛存在的营养供给不能满足动物需要或者营养供给过剩造成的饲料资源浪费等问题,以20～35 kg杜泊羊和湖羊杂交F1代公羔为研究对象,将营养需要解析为维持需要和生产需要,由饲养试验、消化代谢试验和比较屠宰试验组成。在消化代谢试验中,将12只试验羊随机分为自由采食、70%采食量以及50%采食量3个组,采用全粪尿收集法得到3个采食量水平的ME值、蛋白质和能量消化率,并利用比较屠宰试验分3期进行屠宰测定,将得到的数据建立系列数据模型,最终推算出营养需要量。结果显示:维持净能(NEm)需要量为46.3 kcal/kg0.75、维持代谢能(MEm)需要量为112.0 kcal/kg0.75、维持净蛋白质(NPm)需要量为1 009±98 mg/kg0.75,20～35 kg日增重300 g的公羔生长净能需要量为2.58～5.42 MJ/d、日增重300 g的生长净蛋白质需要量为111～129 g/d。本研究结果确定了该品种肉羊育肥期前半阶段的能量和蛋白质需要量,为该品种肉羊营养的科学供给提供了理论依据。

不同营养水平对湖羊黄体期血液理化指标及卵泡发育的影响

【目的】研究不同营养水平对湖羊黄体期血液理化指标及卵泡发育的影响。【方法】选择28只经产母羊,于发情周期第6天分别按0.5倍体重维持需要量(R组),1倍体重维持需要量(C组)和1.5倍体重维持需要量(S组)饲喂6 d,第12天每组屠宰6头;剩下的湖羊用于观察发情;分别于发情周期第7、8、10和12天采血。【结果】随着营养水平的提高,≥3.5 mm的卵泡数量显著增加(P<0.05)、2.5—3.5 mm的卵泡数量显著降低(P<0.05),平均发情周期缩短(P<0.05),血液尿素、胆固醇和游离脂肪酸含量显著下降(P<0.05),甘油三酯含量显著提高(P<0.05);S组乳酸脱氢酶活性显著高于C组(P<0.05);血液尿酸、血氨、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白浓度和谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性差异不显著(P>0.05),但尿酸、血氨、低密度脂蛋白含量和谷草转氨酶活性具有时间效应(P<0.05)。【结论】绵羊黄体期不同生理阶段具有不同的营养需求和代谢特点,黄体期限饲抑制卵泡发育与蛋白质和脂类合成降低、分解增强有关。

采食量水平对杜湖F_1代羊肉品质的影响

研究不同采食量水平对杜泊-湖羊F1代杂交羊肉质和屠宰性能的影响,为肉用绵羊的高效养殖及生产高品质羊肉提供理论依据。选择18只约60日龄、20 kg的杜湖F1代公羔羊,随机分为3组。采食量分别为自由采食、70%自由采食、50%自由采食,经过62 d限饲或自由采食后进行屠宰测定,并取背最长肌进行肉质分析。(1)3组间背最长肌的pH值、亮度、红度、黄度、滴水失度剪切力等肉质指标差异均不显著,但70%采食量组与其他2个营养水平组相比,其肉质pH值、红度和系水力都有升高的趋势,剪切力有减小的趋势(P>0.05)。说明在该采食量水平下,羊肉的肉色和嫩度有所改善;在熟肉率方面,自由采食组极显著高于50%自由采食组。氨基酸分析结果表明:70%采食组除了组氨酸之外的其他氨基酸含量都高于其他2个采食量组(P>0.05)。说明在该营养水平下的背最长肌的氨基酸组成优于其他2个营养水平组。(2)3个试验组羊屠宰率差异不显著,宰前活重随着采食量的增加极显著提高(P<0.01),自由采食组的眼肌面积和净肉率显著高于50%采食量组(P<0.01),70%自由采食量的采食量水平有使羊肉品质改善的趋势。

绵羊BMP15基因的多态性及其与湖羊产羔量的相关性

采用PCR-SSCP技术检测骨形态发生蛋白15(BMP15)在湖羊和中国美利奴羊中的单核苷酸多态性(SNP)及其与湖羊产羔量的相关性。结果表明,第一外显子31∧CTT在2个绵羊品种均只检测到AA和AB基因型,A等位基因频率显著高于B等位基因(P<0.01),AA基因型湖羊比AB基因型平均产羔量多0.12只,但差异不显著(P>0.05);第二外显子T430C在2个绵羊品种中均检测到CC、CD和DD3种基因型,与湖羊产羔量均无显著差异(P>0.05),C等位基因频率显著高于D等位基因(P<0.01);单倍型分析显示,AACC单倍型组合平均产羔量为2.607,但与其他单倍型相比差异不显著(P>0.05)。由此得出2个突变位点对绵羊繁殖力高低无显著影响。

山羊卵巢颗粒细胞差异表达基因消减文库的建立

为了从单卵泡水平建立非闭锁大小卵泡颗粒细胞基因表达的消减文库,选择繁殖性能正常、空怀高繁殖力黄淮山羊2只,以氯前列烯醇处理40h后取卵巢,计数卵泡并测量卵泡直径,钝性分离采集卵泡颗粒细胞,置于液氮内保存,取样后的卵泡部分组织采用原位缺口末端标记法(TUNEL)进行闭锁鉴定。选择直径6和4mm非闭锁卵泡,提取颗粒细胞mRNA,扩增cDNA,监测抑制消减杂交及其文库构建的试验环节。结果表明:消减文库的阳性克隆测序成功率100%,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,发现12个全新表达序列标签;应用RT-PCR对已知序列的抑制素βA亚基基因(INHBA)和谷胱甘肽S-转移酶A1基因(GSTA1)进行表达水平测定,证实了颗粒细胞2个基因mRNA的表达模式与差异显示的结果相同。表明消减文库构建成功。

日粮中添加杏鲍菇菌糠对湖羊生长性能、瘤胃发酵和瘤胃发育的影响

[目的]本文旨在探讨日粮添加杏鲍菇菌糠(Pleurotus eryngii substrate,PES)对湖羊生长性能、瘤胃发酵和瘤胃发育的影响。[方法]试验选取48只体况良好、体质量相近的60日龄湖羊公羔,随机均分成4组,饲喂添加不同比例(0、20%、25%和30%)PES的日粮,预试期12 d,正试期78 d。试验结束后,测定体质量,屠宰取瘤胃液及瘤胃组织,气相色谱法测定瘤胃液挥发性脂肪酸(volatile fatty acids,VFA),苏木精-伊红染色法测量瘤胃乳头长度、厚度及瘤胃肌层厚度,并采用RT-qPCR检测瘤胃上皮细胞中与细胞生长和VFA吸收相关基因mRNA的表达。[结果]与对照组相比,湖羊日粮添加PES对其体质量、干物质采食量无显著影响(P>0.05),添加25%和30%PES组显著提高平均日增重(P<0.05);日粮中添加PES显著提高瘤胃液乙酸、总挥发性脂肪酸含量以及乙酸/丙酸值(P<0.05),各组之间瘤胃液pH值和丙酸、异戊酸、正戊酸含量差异不显著;日粮中添加PES显著提高瘤胃乳头长度(P<0.05),20%和25%PES组瘤胃乳头厚度显著高于对照组及30%PES组(P<0.05),各组间瘤胃肌层厚度和胰岛素样生长因子结合蛋白5基因(IGFBP-5)、生长转化因子β1基因(TGF-β1)mRNA相对表达量差异不显著(P>0.05),日粮添加PES显著提高胰岛素样生长因子结合蛋白6基因(IGFBP-6)的mRNA相对表达量(P<0.05);20%和25%PES组单羧酸转运蛋白1基因(MCT-1)相对表达量显著高于对照组和30%PES组(P<0.05);PES组单羧酸转运蛋白4基因(MCT-4)mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05);20%和25%PES组钠钾ATP酶基因(Na+/K+ATPase)mRNA相对表达量均显著高于对照组和30%PES组(P<0.05)。[结论]日粮中添加PES能提高湖羊生长性能、改善瘤胃代谢,促进瘤胃发育,PES最适添加比例为25%。

lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及其靶基因鉴定

[目的]本文旨在探究lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞(LC)睾酮分泌的影响。[方法]利用RT-qPCR对湖羊lncRNA-NAS进行组织表达谱分析,针对lncRNA-NAS设计siRNA并将其转染睾丸间质细胞;利用ELISA、Western blot、细胞计数(CCK-8)、RT-qPCR等技术分析干扰lncRNA-NAS对睾丸间质细胞睾酮分泌、细胞增殖和凋亡的影响;在高通量测序基础上对lncRNA-NAS可能作用的靶基因进行分析。[结果]lncRNA-NAS在湖羊心脏、肝、脾、肾、空肠、睾丸组织中均有表达,但其在睾丸中的表达量显著高于其他组织(P<0.05);lncRNA-NAS在睾丸中的表达量随着湖羊年龄增长而呈上升趋势,2周岁(2 Y)表达量显著高于5日龄(5 D)、3月龄(3 M)和9月龄(9 M)(P<0.05),9 M表达量显著高于5 D和3 M(P<0.05),5 D和3 M表达量差异不显著(P>0.05);相比对照组,干扰lncRNA-NAS后,睾丸间质细胞中睾酮分泌水平显著升高(P<0.05),睾酮分泌相关基因和蛋白表达量显著升高(P<0.05),细胞增殖活力增强(P<0.05),细胞凋亡相关基因Bax/Bcl-2 mRNA表达量和蛋白比值均显著降低(P<0.05);分析lncRNA-NAS潜在的9个靶基因,2个为未知基因,针对7个已知基因进行研究,当lncRNA-NAS干扰后,发现只有生殖细胞发育相关基因Nanos3表达水平发生变化,表现为显著升高(P<0.05),提示Nanos3可能为lncRNA-NAS作用的靶基因。[结论]lncRNA-NAS可能通过调控靶基因Nanos3影响湖羊睾丸间质细胞睾酮的分泌。

白腐真菌降解秸秆的研究进展

农作物秸秆为反刍动物提供了丰富的粗饲料资源,但大部分农作物秸杆因其直接饲喂时难以被消化,故饲用价值受到很大的限制。因此,如何对其进行降解处理来提高其饲用价值,一直是国内外研究的热点。秸秆饲料处理的方法主要有物理法、化学法和微生物法。近年来,国内外利用白腐真菌对秸秆进行微生物处理上取得一些成果。本文综述了白腐真菌降解秸秆的最新研究进展。

漏粪板床不宜作为寒冷季节羔羊的养殖方式

在寒冷季节,羔羊的护理是一个重要的生产环节。在畜牧生产中,许多企业在这个环节损失惨重。本文分析了漏粪板床或高床结构对羔羊体热散发的不利影响,从羊排泄行为等角度提出羔羊专用保温箱结构设计应考虑的因素。