大鼠局灶性脑缺血后─氧化氮合酶活性与细胞凋亡关系

目的：了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶（ＮＯＳ ）变化与脑细胞凋亡的关系，探索阻断脑细胞凋亡的时间窗。方法：用线栓 法建立局灶性脑缺血模型，大脑中动脉阻塞（ＭＣＡＯ）的时间分别为１５、３０、６０、９０、１２０ ｍｉｎ ，再灌注２４ ｈ。用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组化法，检测局灶性脑 缺血再灌注后缺血中心区（顶叶皮层和尾壳核）ＮＯＳ活性变化。用苏木精－伊红和ＴＵＮＥＬ染色法 检测缺血中心区脑细胞凋亡情况。结果：ＮＯＳ阳性神经元数于３０ ｍｉｎ时增多 最显著，９０～１２０ ｍｉｎ时急剧减少。各组凋亡细胞数随缺血时间延长而增多。结 论：局灶性脑缺血再灌注过程中神经型ＮＯＳ（ｎＮＯＳ）对缺血早期的脑损伤尤其是细胞 凋亡起主要作用。

大鼠短暂性局灶性脑缺血模型改进的制作方法

目的 :改进大鼠短暂性 ( <2 h)局灶性脑缺血模型的制作方法。方法 :采用雄性 SD大鼠 2 4只 ,实验组分别用线栓法致大脑中动脉 ( MCA)缺血 15、3 0、60 min,每组 6只 ;假手术对照组 6只。所有实验动物均采用乙醚麻醉 ,在手术过程中用 5 - 0丝线结扎颈外动脉 ,在结扎的近侧剪断颈外动脉或其分支——枕动脉 ,自颈外动脉或枕动脉断端将 4 - 0外科单丝尼龙线经颈总动脉分叉部插入颈内动脉直至大脑中动脉起始处。假手术对照组线栓插入颅内但不达大脑中动脉起始处。术后即观察动物行走时是否转圈。结果 :所有实验组动物都及时观察到转圈的表现 ,符合实验的入组标准。假手术对照组动物术后未观察到转圈的表现。结论 :短暂性局灶性脑缺血模型制作方法经改进更易于制作、可操作性更强 。

大鼠单次完全可逆缺血/再灌注心肌顿抑模型的改进

目的:改进和完善大鼠单次完全可逆缺血/再灌注心肌顿抑的模型。方法:采用成年SD大鼠28只,分为对照组和实验组,用操作简单、损伤小、出血少的手术方法阻断大鼠左冠状动脉的前室间支,15min后完全恢复其血流,再灌注2h。同时检测大鼠心电图的变化并进行组织学检查。结果:实验组阻断左冠状动脉的前室间支后,心电图出现异常,表现为S-T间期延长,T波倒置,而光镜下组织结构正常。结论:该模型符合心肌顿抑的特点;该方法操作简单,结果可靠,可重复性强,是一种建立在体大鼠单次完全可逆缺血/再灌注模型的可靠方法。

电针预处理对大鼠局灶性脑缺血的影响

目的:就电针预处理对大鼠局灶性脑缺血的影响进行实验研究。方法:采用SD大鼠(体质量280～340g,39只)作为研究对象,电针预处理大鼠百会、大椎穴,电针时间分别为15,30,60,90,120min,间隔1h后,造成局灶性脑缺血。行苏木精-伊红和末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)切口末端标记(TUNEL)染色,测定大鼠脑梗死灶面积百分比和脑细胞凋亡情况。结果:电针预处理组中除15min组外,大鼠脑梗死灶面积百分比都比缺血对照组减小,脑细胞凋亡数也减少。预处理60min组脑梗死灶面积百分比和18700.2μm2凋亡细胞数分别为(27.8±4.2)%和(20.2±3.0)个,与缺血对照组犤(41.0±7.6)%和(31.0±4.4)个犦比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:电针预处理能够保护随后的缺血性脑损伤,且预处理需要达到一定的时间才具有保护作用。

大鼠中缝背核内一氧化氮合酶阳性神经元向中央杏仁核的投射

目的：观察大鼠中缝背核（ＤＲ）内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元向中央杏仁核（ＣｅＡ）的投射，为进一步阐明一氧化氮（ＮＯ）参与情绪、疼痛、内脏心血管活动的中枢调节机制提供形态学资料。方法：用黄递酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组织化学染色结合辣根过氧化酶（ＨＲＰ）逆行追踪技术，观察大鼠ＤＲ内向ＣｅＡ投射的ＮＯＳ阳性神经元的分布与形态。结果：ＤＲ内有一定数目的ＮＯＳ／ＨＲＰ双标阳性神经元，主要分布在外侧部与背正中部。结论：ＤＲ内有部分ＮＯＳ阳性神经元向ＣｅＡ投射，提示ＮＯ在ＤＲ至ＣｅＡ上行感觉传导通路中起重要的神经递质作用。

大鼠局灶性脑缺血后皮层和尾壳核NOS变化

目的 :了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶 (NOS)变化与脑缺血损伤的关系 ,探索治疗时间窗。材料和方法 :用线栓法建立局灶性脑缺血模型 ,大脑中动脉阻塞 (MCAO)的时间分别为 1 5、3 0、60、90、1 2 0min ,再灌注 2 4h。用NADPH d组织化学法 ,检测局灶性脑缺血再灌注后缺血半暗区 (额叶皮层 )和中心区 (顶叶皮层和尾壳核 )NOS活性变化。结果 :半暗区NOS阳性神经元数量于 60min达峰值 ;中心区NOS阳性神经元数量于 3 0min达峰值 ,90～ 1 2 0min急剧减少。结论 :局灶性脑缺血再灌注过程中NOS参与脑缺血损伤 ,在中心区与半暗区NOS活性变化不一致 ,半暗区NOS达峰值时间较中心区延长。推测中心区运用NOS抑制剂最佳时机在 3 0min内 ,半暗区最佳时机在

迷走神经刺激对大鼠丘脑室旁核及下丘脑室旁核星形胶质细胞的影响

目的:观察迷走神经刺激(VNS)后丘脑室旁核(PV)、下丘脑室旁核(PVN)星形胶质细胞数量和形态的改变,阐明星形胶质细胞在VNS治疗癫中的机制。方法:利用免疫组织化学方法,观察VNS前后PV、PVN胶原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。结果:VNS后,PV、PVNGFAP阳性纤维数量增多,染色加深,部分细胞胞体增大,突起增多,变粗变长。结论:VNS可以改变星形胶质细胞的活性。提示PV、PVN星形胶质细胞形态功能的改变可能在VNS抑制癫过程中起了重要作用。

大鼠脑底动脉氮能神经的分布和起源

目的 观察脑底动脉氮能神经的分布和起源。 方法 采用成年健康SD大鼠 ,分成假手术组 (A组 )、单侧 (右侧 )手术组 (B组 )和双侧手术组 (C组 ) ,B组与C组再分成膜性结构加鼻睫神经切除组 (BⅠ、CⅠ )和单纯膜性结构切除组 (BⅡ、CⅡ组 )。术后第 7d ,取动脉环和A组动物的翼腭神经节与耳神经节。应用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 黄递酶染色 (NADPH d)法 ,观察动脉环阳性纤维分布、变化及两个神经节内的阳性细胞分布。 结果 翼腭神经节和耳神经节内均有大量的NADPH d阳性细胞分布。单侧手术后 ,同侧的大脑中动脉 (MCA)NADPH d阳性神经纤维完全消失 ,但对侧MCA无明显变化 ;基底动脉 (BA)和双侧大脑后动脉 (PCA)、颈内动脉脑底段 (ICA)、大脑前动脉 (ACA)阳性神经纤维密度明显减少但并没有消失。双侧手术后 ,除ACA尚残留小部分阳性神经纤维外 ,其余血管 (BA、PCA、ICA、ACA)的阳性纤维完全消失。BⅠ组与BⅡ组之间 ,CⅠ与CⅡ之间 ,无明显差异。 结论 脑底动脉各段均有氮能神经纤维分布并交织成网状 ;靠近头端密度较高 ,靠近尾端则密度较低。不同脑底动脉氮能神经纤维的来源不同 ,BA、PCA和ICA的氮能神经纤维完全来自双侧的翼腭神经节 ;MCA的氮能神经来源于同侧的翼腭神经节 ,ACA的氮能神经则除双侧的?

正常足月胎盘和胎儿宫内生长迟缓胎盘中滋养细胞的凋亡及相关基因表达

目的比较正常足月胎盘与胎儿宫内生长迟缓胎盘(IUGR)中的滋养细胞凋亡指数,以及bcl-2和fas的表达,以探讨滋养细胞的凋亡与bcl-2和fas表达的关系。方法取正常足月胎盘组织和I-UGR胎盘组织各5例,固定、石蜡包埋、切片,每组分别TUNEL法以及ABC法抗bcl-2和抗fas免疫组织化学染色。镜下计数滋养细胞的凋亡指数并对bcl-2和fas的表达量进行显微图像分析。结果与正常足月胎盘相比,IUGR胎盘的凋亡指数显著增多(P<0.01),bcl-2表达量显著减低(P<0.01),而fas表达量无显著差异(P>0.05)。结论IUGR胎盘滋养细胞的凋亡指数明显增多可能与细胞bcl-2表达量减少有关,而不受fas表达量的影响。

大鼠中缝背核一氧化氮合酶神经元投射分布于大脑皮质一氧化氮合酶神经元

目的 :研究通过损毁脑干中缝背核 (DR) ,探讨中缝背核一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元是否投射分布于大脑皮质NOS阳性神经元。方法 :将 16只SD雄性成年大鼠分为实验组与对照组。对实验组动物DR微量注射喹啉酸 ,饲养 1周 ,灌注固定 ,然后将大脑及脑干作冠状冷冻切片 ,NADPH d组化染色。结果 :实验组动物的中缝背核被有效损毁 ,其NOS阳性神经元的数量减少了5 9 .1% (P <0 .0 0 1)。大脑皮质NOS阳性纤维终末减少了 2 8.2 % (P <0 .0 5 ) ,与大脑皮质NOS神经元构成接触的NOS阳性纤维终末减少了 3 3 .9% (P <0 .0 5 )。结论 :位于中缝背核的NOS阳性神经元投射分布于大脑皮质NOS神经元。推测中缝背核的NOS阳性神经元可能通过大脑皮质NOS阳性神经元间接对皮质脑血流量起调节作用。

去窦弓神经大鼠下丘脑室旁核和视上核FOS和NADPH-d共存分布

目的:探讨大鼠下丘脑室旁核和视上核神经元型一氧化氮合酶神经元是否参与中枢压力感受性反射通路。方法:应用Fos免疫组织化学结合还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学双重染色的方法,观察去窦弓神经术(SAD)后2hFos和NADPH-d在室旁核和视上核内的分布情况。结果:SAD大鼠室旁核小细胞部、大细胞部和视上核内有大量Fos表达,并与NADPH-d部分共存;NADPH-d/Fos双标记阳性神经元的比例分别为6.8%、72.1%和47.1%。在假手术组和正常对照组大鼠上述核团内偶见Fos阳性神经元,未观察到NADPH-d/Fos双标记神经元。结论:下丘脑室旁核和视上核内的神经元型一氧化氮合酶神经元可被SAD特异性激活,提示其参与了中枢压力感受性反射通路所介导的心血管活动的中枢调节。

背胰和腹胰源性胰头癌的研究进展

胰腺是由背胰和腹胰融合而成，背胰和腹胰在组织细胞学上存在差异。腹胰含有较多的胰多肽细胞，可分泌胰多肽．根据胰多肽的分布可以对背胰和腹胰进行区分和鉴别。背胰和腹胰源性胰头癌患者的生存时间存在差异，可能与背胰和腹胰源性胰头癌的组织细胞学不同，导致肿瘤的局部侵袭、淋巴结转移以及神经丛侵袭能力存在差异有关。

大鼠短暂性局灶性脑缺血模型的改进

目的:改进大鼠短暂性(<2小时)局灶性脑缺血模型的制作方法。方法:采用雄性SD大鼠24只,分实验组和对照组,实验组又分三组,用线栓法使大脑中动脉(MCA)分别缺血15min、30min、60min,每组6只;假手术对照组6只。所有实验动物均采用乙醚麻醉,在手术过程中用5-0丝线结扎颈外动脉,在结扎的近侧剪断颈外动脉或其分支-枕动脉,经颈外动脉断端或枕动脉将4-0单丝尼龙线插入颈内动脉直至大脑中动脉起始处。假手术对照组动物线栓插入颅内但不达大脑中动脉起始处。术后即可观察动物行走时是否转圈。结果:所有实验组动物都及时观察到动物行走时出现转圈的表现,符合实验的入组标准。假手术对照组动物术后没有观察到转圈的表现。结论:短暂性局灶性脑缺血模型制作方法经改进更易于制作、可行性更强、可信度更高且有利于进一步推广运用。

背胰和腹胰融合平面及其临床应用价值

胰腺由背胰和腹胰融合而成。背胰和腹胰之间存在融合平面。该融合平面可以利用免疫组织化学法对胰多肽染色进行识别，也可以根据CT影像上肠系膜上静脉．胆总管之间的连线进行大体判断。背胰和腹胰融合平面不仅可以指导胰头部良性或交界性肿瘤的手术治疗，还可以判断胰头部恶性肿瘤的临床病理特征及患者的预后。该融合平面对胰头部良恶性肿瘤的治疗具有重要的临床价值。本文对背胰和腹胰融合平面及其临床应用价值的研究现状进行综述。

Bmi1过表达通过促进增殖、抑制凋亡纠正活性维生素D缺乏引起的骨量降低

目的:探索B淋巴瘤Mo-MLV插入区1(B cell-specific MLV integration site-1,Bmi-1)过表达能否通过促进增殖、抑制凋亡改善1,25-二羟基维生素D(1,25-dihydroxy vitamin d,1,25(OH)_(2)D)缺乏引起的小鼠骨质骨量丢失。方法:取8月龄Bmi-1^(Tg)、Bmi1^(Tg)1α(OH)ase^(+/-)与1α(OH)ase^(+/-)小鼠以及同窝野生型(wild type,WT)小鼠椎骨组织,通过流式细胞术及TUNEL染色检测间充质干细胞周期变化及凋亡水平,通过PCNA染色及免疫组织化学染色检测小鼠椎骨组织中Bcl-2、Caspase-3等指标的变化,通过Western blot检测小鼠椎骨中Caspase-3、CDK4、CDK6、OPN、OCN等蛋白表达量的差异,通过ALP染色检查成骨细胞骨形成水平。结果:在骨髓间充质干细胞中过表达Bmi1可以通过促进增殖,抑制凋亡、增加成骨细胞骨形成来纠正1α(OH)ase^(+/-)小鼠的骨量降低。结论:Bmi1是1,25(OH)_(2)D的关键下游靶点,在防止1,25(OH)_(2)D缺乏引起的骨丢失方面起着至关重要的作用。