人Lipocalin型前列腺素D合成酶真核载体的构建及酵母表达菌株的建立

目的 :在毕赤酵母中表达人睾丸Lipocalin型前列腺素D合成酶 (L PGDS) ,以利于生物学功能及临床应用研究。 方法 :用PCR的方法从质粒pGEX 2T htL PGDS上扩增出人睾丸L PGDS基因编码序列 ,构建该基因的酵母表达质粒 ;将表达质粒电转化毕赤酵母 ,甲醇诱导L PGDS的表达。 结果 :PCR扩增的L PGDS成熟肽基因编码序列克隆T载体后 ,经测序证明与所报道的人睾丸L PGDScDNA完全一致。对培养上清进行SDS PAGE分析显示 ,在相对分子质量为 2 70 0 0处有重组蛋白的表达 ,与理论值完全一致。 结论 :人Lipocalin型前列腺素D合成酶在毕赤酵母中获得了高效。