TEA敏感型钾电流在gp120引起的海马神经元损伤中的作用

目的:探讨gp120对TEA敏感型钾电流的作用以及该电流在gp120引起神经元损伤中的作用。方法 :分离怀孕18d SD大鼠胎鼠的海马神经元作为实验对象,分为对照组和gp120处理组,利用全细胞膜片钳的方法记录外向延迟钾电流的变化,通过MTT和TUNEL的方法分别观察gp120处理后神经元的活力和凋亡情况。Western blot观察Kv2.1钾通道的蛋白表达变化以及在TEA敏感型钾电流中的贡献度。结果:gp120能引起外向钾电流明显增大,具有浓度依赖性,其中TEA敏感型成分参与了外向钾电流的增大。此外,MTT和TUNEL实验发现,gp120能引起神经元活力的下降和凋亡,而钾通道抑制剂TEA能缓解由gp120引起的细胞损伤。进一步实验表明,gp120可上调TEA敏感型成分中Kv2.1钾通道的表达,且其特异性抑制剂Gx TX-1E能显著抑制神经元中TEA敏感型钾电流成分。结论:TEA敏感型钾电流参与了gp120引起的神经元损伤过程,其重要组成成分Kv2.1通道蛋白上调,提示该通道蛋白可能参与了gp120引起的细胞损伤。

甲基苯丙胺对瞬时外向钾电流影响

目的观察甲基苯丙胺(Meth)对瞬时外向钾电流的影响及原因。方法将怀孕18 d SD大鼠胎鼠海马神经元分为对照组和Meth处理组,利用全细胞膜片钳方法记录外向瞬时钾电流变化;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)观察Meth引起的细胞损伤作用;利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察瞬时外向电流成分中Kv1.4、4.1、4.2和4.3表达,并通过western-blot方法观察Kv4.2蛋白表达。结果与对照组[(87.4±12.5)pA/pF]比较,Meth能引起瞬时外向钾电流增大[(120.1±19.6)pA/pF](P<0.01),与对照组(1.00±0.18)比较,Meth处理组凋亡率为对照组的(7.11±0.95)倍(P<0.01),钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-AP)明显抑制神经元凋亡(P<0.01);Kv4.2可能是外向电流成分中主要贡献者,Meth能上调Kv4.2通道蛋白表达;与Kv4.2上调密切相关的Kchip2/3、Kchip4、CaMK2蛋白表达增高。结论 Meth引起的瞬时钾电流增大可能通过Kv4.2上调来实现,但其机制仍需进一步探讨。