亚砷酸钠所致人胚肺成纤维细胞增殖兴奋效应与氧化应激的关系

目的探讨亚砷酸钠（Na2AsO2）所致人胚肺成纤维细胞（HELF）增殖兴奋效应与氧化应激的关系。方法0．0、0．1、0．5、1．0、5．0和10．0μmol／LNa2ASO2处理HELF细胞4h或24h后，检测Na2AsO2对HELF细胞增殖率、细胞中活性氧（ROS）水平、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和还原性谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力的影响。结果0．1和0．5μmol／L Na2ASO2引起HELF细胞增殖率均明显升高，差异有统计学意义（P〈0．01），细胞增殖高峰表现在0．5μmol／L，而5．0和10．0μmol／L Na2ASO2引起HELF细胞增殖率均明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01），其剂量-反应关系曲线呈倒U形；0．5—10．0μmol／L Na2ASO2引起ROS水平均明显升高，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），ROS水平与Na2ASO2处理剂量有明显的正相关关系（r=0．934，P〈0．01）；5．0和10．0μmol／L Na2ASO2引起MDA含量均明显升高和GSH-Px活力明显降低。与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）；0．5μmol／L Na2ASO2引起SOD活力明显升高。而5．0和10．0μmol／L Na2ASO2引起SOD活力均明显降低，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01），其剂量-反应关系呈倒U形曲线。结论Na2ASO2可引起HELF细胞增殖明显兴奋效应，其剂量-反应关系呈倒U形曲线，其机制可能与不同浓度Na2ASO2引起HELF细胞小同程度的氧化应激有关。

新的环境应答蛋白JWA在MCF-7细胞应答氧化应激中的表达

目的 研究氧化应激诱导MCF 7 细胞氧化损伤过程中,JWA表达的调节规律及其作用,尤其是与热休克蛋白(HSPs)间的关系。方法 以不同浓度的H2O2(0.01、0.10、1.00 mmol/L)分别处理MCF 7细胞10、30、60、180 min,建立MCF 7细胞氧化损伤模型并用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定;用四唑蓝(MTT)法分析H2O2 对MCF 7细胞的相对细胞增殖率和细胞毒性的影响;采用Western blot方法检测JWA、HSP70、HSP27和热休克转录因子(HSF1)蛋白表达水平的变化。结果 H2O2 对MCF 7细胞的增殖抑制和细胞毒性呈时间和剂量依赖关系,MCF 7细胞在最高剂量、最长处理时间(1.00 mmol/L、180 min)时,细胞增殖几乎完全受抑制。H2O2 活跃地调节JWA的表达,氧化损伤使JWA、HSP70 和HSF1表达上调并呈剂量依赖关系,而且JWA、HSP70和HSF1的表达规律相似,而HSP27 表达似乎与氧化应激的信号调节无关。结论 在H2O2 致MCF 7 细胞氧化应激时,JWA作为有效的环境应答蛋白,其与HSP70共同参与的信号通路可能受HSF1调控。

JWA在N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍诱导的人支气管上皮细胞凋亡中的作用

目的探讨JWA在化学致突变物烷化剂N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导人支气管上皮(HBE)细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Western blot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检测JWA基因近端启动子的结合蛋白。结果MNNG处理HBE细胞24 h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系；MNNG诱导HBE细胞凋亡过程中伴随着JWA蛋白表达升高。进一步用2．0μg/ml MNNG处理HBE细胞24h后,用Southwestern方法从HBE细胞核蛋白中检测出一与JWA近端启动子能特异性结合的转录因子。结论MNNG激活HBE细胞中核转录因子与JWA近端启动子结合后可能激活了细胞内凋亡的信号通路。