CacyBP/SIP介导的Parkin依赖型线粒体自噬对DA能神经元凋亡及细胞周期的调控作用

目的探讨钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)介导的Parkin依赖型线粒体自噬对多巴胺(DA)能神经元凋亡及细胞周期的调控作用。方法将SH-SY5Y细胞分为模型组、对照组、CacyBP/SIP组, 其中模型组细胞用1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+, 0.5 mmol/L)处理24 h, 对照组及CacyBP/SIP组细胞分别模型组细胞基础上进一步转染空载慢病毒或CacyBP/SIP-sgRNA慢病毒。采用Western blotting实验检测各组细胞中CacyBP/SIP、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、磷酸酶张力蛋白诱导激酶1(Pink1)、Parkin、P53、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平, 采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡水平及细胞周期情况, 采用免疫荧光单染法检测各组细胞中LC3、LAMP2的表达情况, 采用免疫荧光双染法检测各组细胞中CacyBP/SIP与Parkin的共表达情况。结果与模型组、对照组比较, CacyBP/SIP组CacyBP/SIP、LAMP2、Pink1、Parkin蛋白的表达明显减少, LC3-Ⅱ/Ⅰ值明显降低, LC3-Ⅱ、LAMP2的免疫荧光染色强度明显降低, Bcl-2蛋白表达明显减少, Bax蛋白表达明显增加, Bcl-2/Bax值明显降低, 细胞凋亡率明显提高, P53蛋白的表达明显增加, G1期细胞占比明显增加, CacyBP/SIP与Parkin共表达的免疫荧光染色强度明显降低, 差异均有统计学意义(P<0.05)。结论敲除CacyBP/SIP基因后, Parkin蛋白降低导致细胞阻滞于G1期, 并介导Parkin依赖型线粒体自噬功能降低, 从而导致细胞凋亡水平提高。

血清尿酸预测急性缺血性卒中患者静脉溶栓后转归

目的探讨血清尿酸(serum uric acid,SUA)与急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者静脉溶栓后短期临床转归的相关性及预测价值。方法回顾性纳入2018年7月1日至2022年3月31日在南京医科大学康达学院第一附属医院接受静脉溶栓的AIS患者。检测入院后次日上午空腹SUA、血糖和血脂等指标。出院时采用改良Rankin量表评价功能转归情况,0~2分定义为转归良好,3~6分定义为转归不良。应用多变量logistic回归分析确定AIS患者静脉溶栓后短期转归不良的独立危险因素。应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价SUA对静脉溶栓后短期转归不良的预测价值。结果研究期间共纳入291例患者。其中,男性197例(67.70%),年龄(65.02±11.56)岁。中位基线美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分为5分(四分位数间距3~11分),SUA为(322.06±90.54)μmol/L。单变量分析显示,转归不良组年龄、心房颤动和心源性栓塞的患者构成比以及基线空腹血糖和NIHSS评分显著高于转归良好组,而静脉溶栓后SUA显著低于转归良好组(P均<0.05)。多变量logistic回归分析显示,较高的SUA与转归良好相关[优势比(odds ratio,OR)0.986,95%置信区间(confidence interval,CI)0.985~0.991;P<0.01],而较高的年龄(OR 1.047,95%CI 1.021~1.075;P<0.01)和基线NIHSS评分(OR 1.155,95%CI 1.063~1.254;P<0.01)与转归不良独立相关。ROC曲线分析显示,SUA预测转归不良的曲线下面积为0.642(95%CI 0.552~0.732;P=0.002),最佳截断值为307.45μmol/L,预测敏感性和特异性分别为57.7%和68.0%。结论较高的SUA与AIS患者静脉溶栓治疗后短期转归良好相关,但其预测转归的价值有限。