目的:探讨二次超排方案对提高成年小鼠超排效果和胚胎发育潜能的可行性。方法:首先比较常规双排卵方案与自然排卵、随机超排实验方案所获总卵数的差异,然后在初步研究外源孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)对...目的:探讨二次超排方案对提高成年小鼠超排效果和胚胎发育潜能的可行性。方法:首先比较常规双排卵方案与自然排卵、随机超排实验方案所获总卵数的差异,然后在初步研究外源孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)对自然受孕一次胚胎发育影响的基础上,进一步对常规双排卵实验方案进行优化。结果:优化后的双排卵实验组单只鼠平均总卵数高达61.7枚,与自然排卵组、随机超排组和常规双排卵组差异显著,提升了成年小鼠的超排卵效果。结论:优化后的超数双排卵方案为同步大量获得小鼠多细胞胚胎及受精卵提供了一种新的、高效的技术方法。展开更多
目的该研究旨在评估全血中镉(Cd)、铅(Pb)、锰(Mn)、汞(Hg)、硒(Se)5种重金属含量和内脏脂肪组织(VAT)累积之间的关联。方法基于2011—2018年美国国家健康和营养调查(NHANES)数据库,选取4668名8~19岁的青少年,进行人群横断面研究。应用...目的该研究旨在评估全血中镉(Cd)、铅(Pb)、锰(Mn)、汞(Hg)、硒(Se)5种重金属含量和内脏脂肪组织(VAT)累积之间的关联。方法基于2011—2018年美国国家健康和营养调查(NHANES)数据库,选取4668名8~19岁的青少年,进行人群横断面研究。应用广义线性回归估计全血5种金属水平和VAT累积之间的关联;应用限制性三次样条法(RCS)评估非线性关联;根据年龄、身体质量指数(body mass index,BMI)、文化程度和家庭收入-贫困比率(poverty income ratio,PIR)对研究人群进行分层分析。结果2011—2018年美国青少年全血Cd、Pb、Mn、Hg、Se的几何平均浓度为0.13μg/L、0.53μg/dL、10.34μg/L、0.41μg/L、183.67μg/L,VAT质量的中位数为186.89 g。VAT质量的分布具有明显的性别差异。在男性青少年中,全血Pb水平与VAT质量呈负相关(β=-0.037,95%CI:-0.052~-0.021),而在女性中,全血Cd水平与VAT质量呈正相关(β=0.041,95%CI:0.004~0.077)。男性和女性的全血Mn水平均与VAT具有正相关,且在女性中关联更强(男性:β=0.107,95%CI:0.079~0.136;女性:β=0.238,95%CI:0.180~0.295)。RCS分析发现,全血Cd水平和VAT质量之间的关联呈J型,男性的全血Pb水平和VAT质量呈反J型关联。结论美国青少年的全血5种金属水平与VAT质量有关。本研究有助于识别重金属暴露对代谢健康的危害,但未来仍需要开展进一步的研究来阐明重金属暴露对VAT毒性效应的潜在机制。展开更多
目的:验证程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)在小鼠雄性生殖细胞中的表达。方法:RT-PCR检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸的基因表达情况;Western blot法检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸中蛋白表达水平;免疫荧光法检测PDCD4...目的:验证程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)在小鼠雄性生殖细胞中的表达。方法:RT-PCR检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸的基因表达情况;Western blot法检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸中蛋白表达水平;免疫荧光法检测PDCD4在雄性生殖嵴以及在不同周龄小鼠睾丸的定位情况。结果:RT-PCR和Western blot结果均显示PDCD4在0周龄小鼠睾丸中开始有表达,并持续表达至成年;免疫荧光显示PDCD4在胚胎期雄性小鼠生殖细胞中也有表达;在出生后0周和1周龄小鼠睾丸中,PDCD4特异表达于精原细胞;在2周龄小鼠睾丸中,PDCD4分布于精原细胞和精母细胞;而在3、4和5周龄小鼠睾丸组织中,PDCD4主要分布于精原细胞、精母细胞与圆形精子细胞。结论:PDCD4分布于胚胎期和出生后各阶段生精细胞,这为进一步研究PDCD4在精子发生中的作用打下基础。展开更多
目的:通过构建基因敲除小鼠模型探究锌指蛋白212(Zinc finger protein 212,Zfp212)对于雌性生育力的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Zfp212基因敲除小鼠;利用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光实验检测Zfp212蛋白表达、定位...目的:通过构建基因敲除小鼠模型探究锌指蛋白212(Zinc finger protein 212,Zfp212)对于雌性生育力的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Zfp212基因敲除小鼠;利用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光实验检测Zfp212蛋白表达、定位情况,并对Zfp212基因敲除效率进行验证;通过卵巢切片和HE染色、体外受精及早期胚胎培养和生育力测试实验对Zfp212基因敲除雌性小鼠的生殖表型进行分析。结果:Zfp212基因在卵母细胞和早期胚胎中高表达,且呈母源表达模式;基因敲除效率验证实验结果显示Zfp212敲除小鼠构建成功;Zfp212基因敲除雌性小鼠的卵泡发育、卵母细胞成熟、受精、植入前胚胎发育以及平均每窝产仔数量与对照组小鼠相比,差异均无统计学意义。结论:Zfp212基因对雌性小鼠的生育力建立不是必需的。展开更多
文摘目的:探讨二次超排方案对提高成年小鼠超排效果和胚胎发育潜能的可行性。方法:首先比较常规双排卵方案与自然排卵、随机超排实验方案所获总卵数的差异,然后在初步研究外源孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)对自然受孕一次胚胎发育影响的基础上,进一步对常规双排卵实验方案进行优化。结果:优化后的双排卵实验组单只鼠平均总卵数高达61.7枚,与自然排卵组、随机超排组和常规双排卵组差异显著,提升了成年小鼠的超排卵效果。结论:优化后的超数双排卵方案为同步大量获得小鼠多细胞胚胎及受精卵提供了一种新的、高效的技术方法。
文摘目的该研究旨在评估全血中镉(Cd)、铅(Pb)、锰(Mn)、汞(Hg)、硒(Se)5种重金属含量和内脏脂肪组织(VAT)累积之间的关联。方法基于2011—2018年美国国家健康和营养调查(NHANES)数据库,选取4668名8~19岁的青少年,进行人群横断面研究。应用广义线性回归估计全血5种金属水平和VAT累积之间的关联;应用限制性三次样条法(RCS)评估非线性关联;根据年龄、身体质量指数(body mass index,BMI)、文化程度和家庭收入-贫困比率(poverty income ratio,PIR)对研究人群进行分层分析。结果2011—2018年美国青少年全血Cd、Pb、Mn、Hg、Se的几何平均浓度为0.13μg/L、0.53μg/dL、10.34μg/L、0.41μg/L、183.67μg/L,VAT质量的中位数为186.89 g。VAT质量的分布具有明显的性别差异。在男性青少年中,全血Pb水平与VAT质量呈负相关(β=-0.037,95%CI:-0.052~-0.021),而在女性中,全血Cd水平与VAT质量呈正相关(β=0.041,95%CI:0.004~0.077)。男性和女性的全血Mn水平均与VAT具有正相关,且在女性中关联更强(男性:β=0.107,95%CI:0.079~0.136;女性:β=0.238,95%CI:0.180~0.295)。RCS分析发现,全血Cd水平和VAT质量之间的关联呈J型,男性的全血Pb水平和VAT质量呈反J型关联。结论美国青少年的全血5种金属水平与VAT质量有关。本研究有助于识别重金属暴露对代谢健康的危害,但未来仍需要开展进一步的研究来阐明重金属暴露对VAT毒性效应的潜在机制。
文摘目的:通过构建基因敲除小鼠模型探究锌指蛋白212(Zinc finger protein 212,Zfp212)对于雌性生育力的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Zfp212基因敲除小鼠;利用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光实验检测Zfp212蛋白表达、定位情况,并对Zfp212基因敲除效率进行验证;通过卵巢切片和HE染色、体外受精及早期胚胎培养和生育力测试实验对Zfp212基因敲除雌性小鼠的生殖表型进行分析。结果:Zfp212基因在卵母细胞和早期胚胎中高表达,且呈母源表达模式;基因敲除效率验证实验结果显示Zfp212敲除小鼠构建成功;Zfp212基因敲除雌性小鼠的卵泡发育、卵母细胞成熟、受精、植入前胚胎发育以及平均每窝产仔数量与对照组小鼠相比,差异均无统计学意义。结论:Zfp212基因对雌性小鼠的生育力建立不是必需的。