弓形虫感染体外培养细胞的电镜观察

用电镜观察了弓形虫在人脑恶性胶质瘤细胞（ＨＧＣ）、人胚肺细胞（ＨＥＰＣ）、人Ｋ５６２细胞和猴肾细胞（Ｖ－１１６）中感染和寄生状况及受感染细胞的病理变化。结果显示，ＨＧＣ、ＨＥＰＣ对弓形虫的感染率和受感细胞含虫数量均高于Ｖ－１１６。提示中枢神经系统的细胞和胚胎细胞对弓形虫的易感性较强。在一些超微结构损伤较严重的Ｖ－１１６细胞中，见弓形虫攻击溶解细胞核膜并进入核内寄生，可能细胞浆结构的损伤和环境的改变是弓形虫进入细胞核的原因之一。此外，上述各种细胞感染弓形虫后均可见线粒体空泡化和髓样变、细胞肿胀、核溶解和细胞崩解等病理变化。

长期低铅染毒大鼠脾脏光镜及电镜结构的观察

应用光镜和透射电镜技术观察长期低铅染毒后大鼠脾脏的结构改变。光镜下可见 ,脾脏边缘带相对面积减小 ,脾小结个为数明显减少。电镜观察可见 ,脾脏免疫细胞出现不同程度的线粒体肿胀、空泡化或固缩 ;内质网肿胀、脱颗粒。上述变化均随着铅染毒剂量的增加而加重。结果提示 ,长期低铅染毒可导致脾脏免疫细胞的损伤。

弓形虫在培养细胞及小鼠体内繁殖的电镜观察

本实验用电镜观察了弓形虫ＮＴ株在猴肾细胞、人胚肺细胞、恶性胶质瘤细胞及小鼠腹水、肝脏和子宫等组织中的生长繁殖形式，并计数各种繁殖方式出现的百分率，结果显示，大多数弓形虫以内芽殖方式繁殖，少部为等分裂繁殖，裂殖繁殖最少见。裂殖繁殖时弓形虫体内的子细胞生长发育常不是同步的。成熟的子细胞以出芽的方式脱离母体，并围绕母体形成玫瑰花状或蜂窝状等群落。三种繁殖方式在各种宿主细胞和组织中出现的频率各不相同，小鼠肝和子宫组织中弓形虫等分裂繁殖较在其它细胞中少见，裂殖繁殖仅见于培养细胞和小鼠腹水中。提示宿主细胞种类的不同可能影响弓形虫的繁殖方式。

康宁克通-A对大鼠胸腺及肾上腺皮质作用的电镜观察

选用雄性大鼠1次肌注康宁克通-A,小剂量2.1 mg/kg,大剂量10.5 mg/kg。另设阳性对照每日20 mg/kg 氢化泼尼松,肌注4周,并设空白对照。用药后4天及4周末电镜观察胸腺及肾上腺皮质。小剂量组无明显变化,大剂量组及阳性对照组均见到胸腺淋巴细胞数量明显减少、胞核固缩、细胞崩解,上皮性网状细胞及巨噬细胞增多。肾上腺皮质束状带变薄,细胞线粒体及脂滴减少。提示,大剂量用药对肾上腺皮质和胸腺等有损伤作用,临床用药在达到疗效前提下,尽量减少用药量为好。

电镜酶细胞化学样品微波制备技术

在电镜酶细胞化学技术中.我们在样品的固定、温育、包埋剂浸渍和聚合等主要过程中均使用微波照射,不仅缩短了制样时间,而且由于使用了小标本、间歇微波照射、低温水浴及适当延长样品在固定液中的时间等改进技术,使细胞超微结构和酶的活性都得以更好保存。酶染色清晰,无扩散,定位准确。

牙齿釉柱的扫描电镜观察法

牙齿釉柱的扫描电镜观察法黄立，王玲，余未一，范媛（南京医科大学电镜室，南京医科大学口腔系，南京２１００２９）牙齿的外层是一层釉质，牙釉质是由釉柱和釉间质所组成，釉柱由牙本质界面处向牙齿表面呈放射状排列，在牙齿浅表层，大约有３０μｍ平行于牙齿表面排列，...

雌激素受体电镜定位的微波制样技术

介绍使用电镜确定细胞内雌激素受体位置的微波制样新技术。使用胶体金与酶联雌二醇的结合物胶二醇-辣根过氧化物酶-胶体金(E_2-HRP-CG)作标记物,在样品的固定、包埋、聚合及孵育过程中,使用改进行微波照射技术,既提高了样品固定质量,又减少了样品制备时间。

雌激素受体电镜定位的微波照射技术

将微波照射与电镜细胞化学技术相结合确定雌激素受体在细胞内的位置。在样品的固定、包埋、聚合及孵育过程中,使用改进的微波照射技术,既提高了样品的制备质量,又将样品制备时间缩短到原来的1/3。

大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变气虚血瘀证动物模型的研制

目的 探讨慢性萎缩性胃炎 (CAG)癌前病变气虚血瘀证动物模型的研制方法。方法 2 5只大鼠随机分为 2组 ,正常对照组不予造模 ,造模组采用甲硝基亚硝基胍 (MNNG)溶液自由饮用 ,雷尼替丁灌胃 ,饥饱失常的综合法造模 2 0周 ,观察 2组大鼠周身状况 ,血液红细胞免疫功能、LPO、SOD、GSH -Px、TXB2 、6 -keto -PGF1α、TXB2 / 6 -keto -PGF1α及胃粘膜病理等变化。结果 模型组大鼠周身状况较差 ,肝、脾、胸腺重量减轻 ,血液RBC -IC花环率、LPO、TXB2 、6 -keto -PGF1α含量及TXB2 / 6 -keto -PGF1α比值增高 ,RBC -C3b受体花环率、SOD、GSH -Px活力降低 ,肉眼、光镜及电镜观察胃粘膜形态均有典型的CAG癌前病变病理改变。结论 该动物模型经多学科、多指标观察 ,与临床CAG癌前病变气虚血瘀证表现有较好的一致性 ,稳定可靠 ,重复性好 。

人肾近端小管上皮细胞的原代培养、传代及鉴定方法研究

目的:创建一种重复性好、细胞量多的人肾近端小管细胞(PTC)培养方法.方法:取新鲜正常人肾组织分离纯化,用含10%新生牛血清等营养充分的DMEM/F12(1:1)液进行近端小管细胞的原代培养及传代,并以免疫组化、酶化学染色、透射电镜鉴定.结果:培养5～6天后融合成单层细胞,形态呈鹅卵石样,可传代7～9代,鉴定确定为人肾近端小管细胞,重复培养10次,均能稳定获得同样细胞,每克肾皮质可分离培养出(6～12)×106个PTC.结论:此培养方法可在7天内获得人肾近端小管细胞,且重复性好,细胞数量多,为进行肾小管细胞治疗提供必需的细胞,也为研究肾小管病变提供实验平台.

阿奇霉素抗弓形虫感染的体外实验研究

目的 为探索孕期弓形虫感染治疗效果好的药物。方法 本实验采用体外细胞培养技术 ,MTT(四甲基偶氮唑盐 )比色法 ,观察阿齐霉素抗弓形虫侵袭的猴肾细胞的活力及功能状态及通过透射电镜、扫描电镜观察猴肾细胞内弓形虫的形态、体积并超微结构的改变。结果 猴肾细胞的增殖在不同浓度的阿齐霉素加药组比未加药组差异均有显著性 ,P <0 0 1。经透射电镜观察发现 :虫体在药物作用下有的发生破裂、崩解 ,细胞内留下空泡 ,有的呈团块 ,没有明显的细胞器可见。扫描电镜观察显示猴肾细胞内的虫体与未加药组相比明显皱缩。结论 阿齐霉素具有很好的抗弓形虫效应 ,而对猴肾细胞无显著影响。

人表皮黑素细胞、毛囊无色素黑素细胞和鼠黑素瘤细胞的原子力显微镜观察

目的:观察培养的人表皮黑素细胞、毛囊无色素黑素细胞和S91鼠黑素瘤细胞的形态结构。方法:培养并纯化来自正常人包皮的黑素细胞以及来自毛囊的无色素黑素细胞,同时复苏S91细胞株,传代后接种到内置云母片的培养板中,细胞贴附到云母片上后固定,用原子力显微镜扫描观察。结果:正常人表皮黑素细胞有3级分支,在主干及分支的顶端和侧缘可见膨出的球形结构。鼠黑素瘤细胞仅有很短的2级分支,在2级树突近端可见黑素小体。毛囊无色素黑素细胞只有1级树突,并只在树突近端有少数黑素小体。结论:表皮黑素细胞在形态上比黑素瘤细胞、毛囊无色素黑素细胞更成熟,有更多的黑素颗粒从树突的顶端和侧缘以胞吐的形式被输出。

长期低铅染毒大鼠脾脏超微结构的观察

目的 :探讨长期低铅染毒对大鼠脾脏免疫细胞超微结构的影响。方法 :建立低铅染毒的大鼠模型 ,8周后测定血铅并应用透射电镜技术观察大鼠脾脏免疫细胞的超微结构。结果 :1电镜观察 ,脾脏免疫细胞出现不同程度的线粒体肿胀、空泡化或固缩 ;内质网肿胀、脱颗粒 ;2以上变化均随着铅染毒剂量的增加而加重。结论 :长期低铅染毒即可导致脾脏免疫细胞的损伤 。

人胎儿腭扁桃体隐窝上皮超微结构研究

以电镜观察第４～８月龄人胎儿腭扁桃体的超微结构。第４月龄扁桃体上皮开始形成上皮芽并长入其下的结缔组织形成隐窝；隐窝上皮内出现淋巴细胞、交错突细胞、巨噬细胞等浸润。随胎龄增长浸润细胞数量增多并渐扩展到上皮表层。第８月龄胎儿隐窝上皮表层有少数Ｍ细胞，具有较一般上皮细胞为多的微绒毛并以胞质突起包绕和覆盖淋巴细胞。隐窝上皮下结缔组织中常见淋巴细胞、巨噬细胞等；毛细血管较丰富，有的血管紧贴上皮基膜分布。扁桃体固有层中初级淋巴小结在第４月龄已渐形成，此后增大并成熟，小结间弥散淋巴组织区窄小，可见呈立方内皮的毛细血管后微静脉。

弓形虫感染孕鼠T淋巴细胞亚群在外周血及蜕膜变化的研究

目的 探讨弓形虫感染孕鼠T淋巴细胞亚群在外周血及蜕膜的变化。方法 正常及弓形虫感染 (感染后 72h)孕鼠均于孕 1 8天 ,采用流式细胞仪技术检测外周血及蜕膜CD+ 4、CD+ 8T细胞百分率。结果 (1 )在外周血 ,T淋巴细胞的变化表现为CD+ 4T细胞增多 (P <0 0 1 ) ,CD+ 8T细胞几乎无改变 ,CD+ 4/CD+ 8细胞比值增大 (P <0 0 1 )。 (2 )在蜕膜 ,T淋巴细胞的变化表现为CD+ 4T细胞减少 (P <0 0 5) ,CD+ 8T细胞增多 (P <0 0 5) ,CD+ 4/CD+ 8细胞比值减小 (P <0 0 1 )。

外源性胰磷脂酶A_2对大鼠中枢作用的研究

目的 探讨胰磷脂酶 A2 (phospholipase A2 ,PL A2 )在胰性脑损害发生发展中的作用。方法 对 SD大鼠进行 PL A2血管内及脑内注射 ,应用苏木精 -伊红染色、髓鞘特染 (Klurer and barrera,KB法 )及电镜检查研究观察 PL A2 对动物脑脊髓的作用。结果 1以每 10 0 g体重 80 U PL A2 经血管内注射后 ,6 h脑脊髓即见局灶性脱鞘 ,板层结构局部紊乱及神经元固缩等 ;2 4h病变达高峰 ,髓鞘板层结构消失 ,呈弥漫性脱鞘 ,严重变性、融合、空泡化 ,小胶质细胞增生 ,脑软化 ;超微病理同时发现线粒体肿胀 ,粗面内质网脱颗粒等 ;至第 11天上述病变依然存在 ,但似有减轻。2脑组织对 PL A2 极为敏感 ,低浓度 PL A2 脑内注射即可致脱鞘损害。结论 血中过量的 PL A2

胶体金-酶联雌二醇法、酶联雌二醇法和单克隆抗体免疫组化法的比较

目的 :进一步验证作者自行设计的胶体金 -辣根过氧化物酶 -雌二醇 (CG- HRP- E2 )标记组织内雌激素受体技术的可靠性和准确性。方法 :采用 CG- HRP- E2 与酶联雌二醇 (E2 - HRP)法、单克隆抗体免疫组化法 ,通过电子显微镜在细胞超微结构水平上研究了子宫内膜组织内的雌激素受体。结果 :3种方法标记的雌激素受体主要分布在细胞核内 ,少部分分布在胞质中 ,其结果完全是一致的。