角膜缘上皮细胞体外培养、冻存和复苏的实验研究

目的 建立兔角膜缘上皮细胞体外培养、冻存和复苏的方法。方法 兔角膜缘上皮细胞组织块接种培养。取第三代细胞进行冻存。于冻存后第2周,3、6个月复苏细胞。用MTT法测细胞生长曲线。结果 兔角膜缘上皮细胞体外生长良好。培养细胞AE1单克隆抗体染色阳性,PAS染色阴性。冻存细胞复苏成功。冻存细胞复苏后生长曲线良好。结论 兔角膜缘上皮细胞可以在体外培养、冻存和复苏。

兔角膜缘上皮细胞体外培养及其生物学特性的初步研究

目的 :建立体外培养兔角膜缘上皮细胞的方法 ,观察其体外生长的生物学特性。方法 :应用组织培养的方法 ,对兔角膜缘上皮细胞进行体外原代和传代培养。用倒置显微镜观察培养的兔角膜缘上皮细胞体外生长的特征。用苏木精 -伊红染色、糖原( PAS)染色、细胞角蛋白免疫组化染色和电镜检查的方法对培养细胞进行形态学检查和鉴定。结果 :兔角膜缘上皮细胞可以在体外成功的培养传代。原代培养细胞大多 4 8h贴壁 ,5天后旺盛生长 ,15天形成单层。传代培养细胞次日贴壁 10天形成单层。细胞角蛋白 AE1单克隆抗体染色阳性 ,PAS染色阴性。培养细胞呈多角形 ,细胞表面具有丰富的微绒毛 ,细胞之间有桥粒连接。结论 :应用组织培养的方法可以成功获得原代和传代培养的兔角膜缘上皮细胞 ,培养的细胞具有与正常兔角膜上皮细胞相一致的生物学特性。