含抗内耳抗原特异性抗体的体液转移免疫致豚鼠先天性感音神经性聋的实验研究

目的:证实针对内耳组织抗原特异性抗体通过胎盘可造成子鼠先天性自身免疫性感音神经性聋。方法:同种粗制内耳抗原(CIEAgs)免疫豚鼠,造成自身免疫性感音神经性聋(ASNHL)动物模型。ELISA法测定示其血清抗体水平升高,耳蜗电图(ECochG)示其听神经复合动作电位和(或)耳蜗微音器电位阈值或伪阈升高。取其血清(含特异性抗内耳组织抗原抗体)持续转移免疫妊娠豚鼠,采用ECochG测试被动免疫妊娠母鼠和子鼠的听觉功能,再采用颞骨火棉胶切片和苏木精-伊红染色,光镜观察内耳组织形态学改变。结果:各组出现听觉损伤的动物是:采用ASNHL模型动物血清被动免疫的8只妊娠母鼠中有5只(7耳)和其所产子鼠8只中有6只(10耳),采用非ASNHL模型动物血清免疫的妊娠豚鼠所产子鼠5只中有1只(2耳)。出现听力损失的被动免疫母鼠和子鼠内耳病理形态学改变主要为螺旋神经节细胞变性和Rosenthal管中炎性细胞(以单个核细胞为主)浸润,部分动物出现膜迷路积水。结论:同种体液转移免疫可造成自身免疫性内耳病变,子鼠产生听觉功能障碍主要是由于母鼠所产生的特异性抗内耳组织抗原抗体经胎盘到达子鼠体内所致。

同种内耳抗原免疫致聋豚鼠的子代内耳功能和形态学观察

目的 观察自身免疫性感音神经性聋 (autoimmunesensorineuralhearingloss ,ASHL)母鼠所产子代内耳听觉和前庭生理功能、病理形态学的变化 ,初步探讨母鼠体内针对内耳组织抗原免疫反应是否可以造成子代的内耳损伤。方法 同种内耳抗原 (homogeneousinnerearantigens ,HIEAg)持续免疫孕豚鼠 ,采用耳蜗电图 (包括听神经复合动作电位 )、总和直流电位、耳蜗微音器电位和眼震电图仪 (记录自发性和冷热空气试验 )测试母鼠和子鼠的听觉和前庭功能 ,并检测针对HIEAg的血清特异性体液和细胞免疫反应 ,采用火棉胶切片和HE染色 ,光镜观察内耳病理组织学改变。结果ASHL母鼠所产子鼠中 ,部分 (3/7)出现听觉损伤 ,并发现其血清中特异性抗体水平升高 ,内耳出现免疫炎性病理损伤。非ASHL母鼠和对照组母鼠所产子代未见明显异常。结论 ASHL雌鼠所产子代可出现感音神经性聋 ,其内耳损伤和功能障碍极可能与针对内耳组织的自身免疫反应 (尤其是体液免疫 )

豚鼠自身免疫性梅尼埃病模型的主要内耳抗原分析

目的探寻导致豚鼠自身免疫性梅尼埃病（autoimmune Meniere＇s disease，AIMD）的主要内耳组织抗原成分。方法采用同种粗制内耳抗原免疫豚鼠，观察听觉功能、前庭功能及内耳组织形态学方面的变化，判断AIMD模型与非模型动物。采用免疫印迹法（Western blotting）对比分析模型动物与非模型动物血清内针对内耳组织抗原不同成分特异性免疫反应的差异，寻找只针对AIMD模型动物的特异性成分。结果内耳组织所含抗原成分较多，免疫后酶联免疫吸附试验（ELISA）结果显示，AIMD模型与非AIMD模型动物均不同程度地存在针对内耳组织抗原的血清抗体水平升高。听功能检测，非AIMD模型动物听力损失不明显。Western boltting结果显示，AIMD模型动物出现针对相对分子质量为68000、58000、42000及28000蛋白质成分的反应条带，而非AIMD模型动物则未显示这些条带的特异性抗原抗体反应。结论可能只有出现针对导致内耳自身免疫性疾病的主要抗原成分的特异性免疫反应，才会造成明显的内耳免疫病理损伤和功能障碍。相对分子质量为68000、58000、42000及28000的内耳组织抗原可能是导致豚鼠自身免疫性膜迷路积水的主要抗原成分。