YAP在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用及其机制

目的探究Yes相关蛋白(YAP)在小鼠肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及机制。方法雄性C57BL/6小鼠40只,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、溶血磷脂酸(LPA)+Sham组、IRI组、LPA+IRI组,每组10只。缺血-再灌注6 h后,收集肝组织和血清标本。检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的水平,苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学(免疫组化)染色检测肝组织病理学改变和巨噬细胞浸润情况,蛋白印迹法分析肝组织YAP的蛋白表达水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法评估炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL)-1和IL-6的信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果蛋白印迹结果显示,LPA+IRI组YAP的蛋白表达水平较IRI组明显升高。与Sham组相比,IRI组ALT和AST显著增高(均为P<0.05);LPA+IRI组较IRI组血清ALT和AST显著降低(均为P<0.05)。HE染色显示,Sham组和LPA+Sham组肝细胞形态正常;LPA+IRI组和IRI组出现肝脏淤血、肝细胞肿胀和肝小叶结构异常等病理改变;LPA+IRI组相较于IRI组病理改变程度减轻。RT-PCR提示,LPA+IRI组中炎症因子TNF-α、iNOS、IL-1和IL-6的mRNA表达水平较IRI组降低(均为P<0.05)。免疫组化显示,LPA部分抑制了IRI后缺血组织巨噬细胞浸润。结论YAP能明显缓解肝脏IRI,其作用机制与调控巨噬细胞募集和活化相关。