钙结合蛋白S100A9在类风湿关节炎患者血清中的表达及意义

目的检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清中S100A9水平,探讨其在RA中的作用及与疾病活动度的关系。方法收集59例不同疾病活动度的RA患者及20例健康志愿者血清。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测RA患者及健康对照者血清中S100A9水平,分析其与临床及实验室指标相关性。结果 RA患者S100A9水平显著高于健康志愿者(P=0.041 9)。按DAS28评分分为轻、中和重度活动组RA,重度活动组RA S100A9水平显著高于中度(P=0.039 2)、轻度活动组RA患者(P=0.001 3)。相关性分析显示RA患者S100A9水平与DAS28、RF水平、关节肿胀及压痛数呈正相关(P<0.01)。结论 RA患者血清S100A9水平显著增高,与疾病活动度密切相关。血清S100A9水平可以作为评估RA疾病活动度标记物之一。

白细胞介素10在系统性红斑狼疮中的异常表达及其意义的初步研究

目的:分析Th2型细胞因子白细胞介素(IL)-10在系统性红斑狼疮(SLE)发生发展中的变化及其意义。方法:以37例符合美国风湿病学会(ARA)诊断标准的SLE患者为研究对象,与相匹配的正常人26名相对照,以ABC-ELISA法检测血清及细胞培养上清的IL-10水平,其中部分标本同时以荧光定量RT-PCR分析IL-10mRNA的表达。结果:SLE患者血清IL-10水平显著高于正常人(P<0.01),伴狼疮性肾炎者和抗双链DNA抗体阳性者其IL-10水平更高,活动期与缓解期患者相比,IL-10水平有所升高,但在统计学上差异无显著性;血清IL-10水平与外周血单个核细胞(PBMCs)中mRNA水平呈正相关性,相对于正常人而言,SLE患者的IL-10mRNA亦呈高表达。体外培养结果显示,SLE患者PBMCs自发分泌或植物血凝素(PHA)诱生IL-10的水平均显著高于正常人(P<0.05)。结论:细胞因子IL-10的蛋白水平和mRNA转录水平,在SLE患者均明显升高,高水平的IL-10可能与狼疮性肾炎的发生有关。SLE患者PBMCs产生IL-10的能力异常增高。

系统性红斑狼疮患者外周血CD_4^+CD_(25)^+ T细胞亚群的初步研究

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+T细胞亚群的比率改变。方法采用微量全血三色标记法,以流式细胞技术检测SLE患者外周血CD4+、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群,分析阳性细胞百分率和平均荧光强度(Meanfluorescenceintensity,MFI)。结果SLE患者外周血中CD4+T细胞百分率,活动期(29.29%±8.86)%和非活动期(29.55±8.96)%均低于正常对照(37.41±3.29)%(P均<0.05);CD4+CD25+T细胞百分率SLE活动期(10.30±5.60)%显著高于正常对照(5.39±1.43)%(P<0.05),非活动性SLE病人组(5.63±2.49)%和正常组差异无显著性(P>0.05);CD4+CD25+CD45RO+T细胞百分率SLE活动期(3.96±3.51)%显著高于正常对照(1.39±0.63)%,非活动期(0.75±0.66)%显著低于正常对照(P均<0.05)。平均荧光强度分析表明SLE患者组和正常组的CD25和CD45RO抗原密度差异并无显著性(P均>0.05)。结论SLE患者外周血中存在CD4+CD25+及CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群比率异常增高,且与病情活动性相关。

正常人及系统性红斑狼疮患者T细胞亚群流式细胞术初步分析

目的:研究正常人及系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血(PBMCs)T淋巴细胞亚群的平衡状态。方法:采用微量全血法在样本中标记多种荧光抗体,利用三色流式细胞技术对正常人及SLE患者外周血各T细胞亚群百分率进行检测和分析。结果:与正常人相比,在未经刺激的自然状态下,SLE患者PBMCs中表达白细胞介素(IL)-10的Th2细胞及Tc2细胞的百分率均显著增高;如经植物血凝素(PHA)和佛波醇乙酯(PMA)联合刺激,正常人表达干扰素-γ(IFN-γ)的Tc1细胞百分率显著升高,而SLE患者则仍表现为Th2和Tc2细胞百分率的明显增高。结论:SLE患者体内存在高IL-10应答、低IFN-γ应答状态,从而形成T细胞亚群平衡向Th2/Tc2偏移的态势。

系统性红斑狼疮26例IL-10及IL-12的异常表达及其相互作用

目的:了解系统性红斑狼疮(SLE)患者白细胞介素(IL)-10、IL-12异常表达的相互关系,探讨IL-10对IL-12分泌的影响。方法:取26例SLE患者及正常对照18例志愿者的外周血(PBMCs),用ELISA法测定其血清、单个核细胞(PBMCs)培养上清、植物血凝素(PHA)刺激培养上清中IL-10、IL-12水平;在SLE患者及正常对照PBMCs中分别加入正常人血清、SLE血清、SLE血清+IL-10抗体,PHA刺激培养24h,用ELISA法测培养上清中IL-12的水平。结果:SLE患者血清、PBMCs培养上清中自发产生和PHA刺激诱生的IL-10及IL-12P40水平均异常增高。然而仅血清IL-10水平与SLEDAI呈正相关,但血清IL-12P40水平、PBMCs培养上清自发产生的及PHA刺激诱生的IL-12P40水平均与SLEDAI呈正相关。尽管SLE患者血清IL-10水平与IL-12P40血清及PBMCs培养上清水平呈正相关,但体外实验时,在PBMCs培养中,加入SLE血清,可显著抑制IL-12的产生,采用IL-10抗体中和掉SLE血清中的IL-10后,正常人或SLE患者的PBMCs培养上清中IL-12可明显增多。结论:SLE患者IL-10及IL-12表达水平异常增高,且血清水平与SLE活动性正相关;体外细胞培养实验中SLE血清中IL-10可明显抑制IL-12的分泌,但在细胞因子网络环境中两者之间相互作用更为复杂。

系统性红斑狼疮血清对树突状细胞诱导作用的时间相关性

目的:研究系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)血清诱导正常单核细胞(Monocyte,Mo)向树突状细胞(Dendritic cells,DC)分化的时间相关性。方法:分离正常人单核细胞,分别以GM-CSF/IL-4系统和正常人血清(Normal serum)系统以及SLE患者血清(SLE serum)系统诱导培养,在培养的第3、5和第7天收集细胞。流式细胞术检测HLA-DR和CD80,混合淋巴细胞反应检测其功能。结果:诱导培养的第3天SLE血清组可见大量细胞集落,电镜下观察呈典型树突状形态;GM-CSF/IL-4组第4天亦可见大量集落;正常血清组始终无集落形成。HLA-DR在GM-CSF/IL-4系统中始终高表达,CD80随LPS的刺激而升高。正常血清中HLA-DR和CD80始终低表达。SLE患者血清中HLA-DR中等程度表达,CD80在第5天升高达中等程度表达并维持至第7天。MLR显示SLE患者血清组的SI在第5天升高,然而第7天明显下降。结论:SLE血清可以诱导正常单核细胞分化为DC,其功能状态与培养时间呈一定的相关性。

间质干细胞对系统性红斑狼疮患者外周血T细胞亚群的影响

目的观察间质干细胞(MSC)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T细胞亚群的影响。方法从健康志愿者骨髓中分离培养MSC,从SLE患者外周血中分离单个核细胞(PBMC),将MSC与混合淋巴细胞反应体系共培养。二乙酰羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记反应细胞群结合流式细胞术特异性分析反应细胞各细胞亚群。结果与MSC共培养后,SLE患者外周血T细胞增殖受抑制,各T细胞亚群比例降低,其中Th2亚群明显降低(P<0.05)。结论MSC对SLE患者体内Th1/Th2失衡状态有一定的纠正作用。

系统性红斑狼疮患者外周血T细胞CTLA-4表达及其临床意义

目的:研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)T细胞中CTLA-4的表达及临床意义。方法:分离正常人和SLE患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),以抗-CD3、抗-CD28刺激培养48 h,刺激培养前后收取细胞,以流式细胞术(FCM)检测CD4^+和CD8^+T细胞中CTLA-4^+细胞比例,并分析其与SLE疾病活动性指数(SLEDAI)和肾损害的关系。再以ELISA法检测培养上清中游离的CTLA-4水平。结果:SLE患者刺激前的CD4^+和CD8^+T细胞且主要是CD25^+T细胞中CTLA-4^+细胞的比例较正常人显著增高,与SLEDAI呈正相关;而其CD8^+CD28-T细胞中CTLA-4^+细胞比例也显著高于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性;经抗-CD3、抗-CD28抗体刺激后,其CD4^+CD25^+T细胞、CD8^+CD25^+T细胞或CD8^+CD28-T细胞中CTLA-4^+细胞的比例却显著低于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性,仅在活动性SLE患者中有肾损组的CD8^+CD28-T细胞中CTLA-4^+细胞的比例显著低于非肾损组;而且经刺激培养后SLE患者PBMC上清中游离的CTLA-4水平也显著低于正常人。结论:SLE患者新鲜分离的T细胞(CD4^+及CD8^+)中CTLA-4表达异常增高,反映T细胞异常活化和疾病活动;另一方面,SLE患者T细胞又存在CTLA-4诱导性表达障碍,可能与SLE T细胞体外再活化能力减弱有关。

血清B细胞激活因子和增殖诱导配体在原发性干燥综合征中的意义

目的研究血清B细胞激活因子(BAFF)与其同源类似物TNF家族增殖诱导配体(APRIL)在原发性干燥综合征(pSS)中的临床意义。方法采用ELISA法分别检测38例pSS确诊患者和40名正常健康体检者的血清BAFF、APRIL水平,比较两者关系及其与pSS患者临床指标的相关性。结果pSS的血清BAFF明显高于健康对照组[(7.10±4.06)ng/mlvs.(3.72±1.09)ng/ml,P<0.01],血清APRIL也高于健康对照组[(26.37±16.18)ng/mlvs.(16.33±15.61)ng/ml,P<0.05];且血清BAFF与pSS患者血清IgG浓度(r=0.504,P<0.01),血沉(r=0.513,P<0.05),总球蛋白水平(r=0.454,P<0.05),抗核抗体(ANA)滴度(r=0.448,P<0.05)明显相关,血清APRIL与血沉(r=0.427,P<0.05)、唇腺淋巴细胞灶数(r=0.446,P<0.05)呈一定程度相关性,两者均与外周血WBC、Plt计数呈负相关(P<0.05);血清BAFF与APRIL水平呈正相关(r=0.578,P<0.01)。结论pSS患者血清BAFF和APRIL水平异常增高,且与临床指标血清IgG浓度、血沉、唇腺淋巴细胞灶数等相关,提示BAFF和APRIL可能参与pSS的发病过程。

SLE病人NK细胞活性测定及临床意义

用MTT比色法测定:74例系统性红斑狼疮(SLE)发作期病人其中自身缓解组54例,另测缓解期一年以上47例缓解对照组及120例正常人对照组.前三组NK细胞活性明显低于正常人.且NK细胞活性与SLE疾病严重度相关,随着病情的缓解,NK细胞活性有一定的增高,自身缓解组和对照缓解组NK细胞活性基本接近,证明NK细胞活性在近期缓解组和远期缓解组无明显差异.

狼疮肾的治疗进展

本文综述了狼疮性肾炎的治疗进展。内容包括糖皮质激素治疗、免疫抑制剂，特别是环磷酰胺、环孢菌素Ａ、ＦＫ５０６等的应用。还包括抗凝、抗血小板、抗纤溶药物、血浆置换、透析治疗、肾移植、免疫增强剂及全身淋巴结照射治疗等。

系统性红斑狼疮肺动脉高压的临床特点分析

目的了解系统性红斑狼疮患者(SLE)肺动脉高压(PAH)的发生率及PAH与SLE其他临床表现、自身抗体的相关性。方法回顾性分析105例SLE患者(其中12例合并PAH)的临床表现、抗体谱、生化指标,并对合并PAH及不合并PAH的SLE患者进行了上述指标的比较。结果SLE伴发肺动脉高压的发生率为11.4%,其中PAH组的雷诺现象以及肺间质纤维化发生率明显高于无PAH组。结论SLE合并PAH的并不少见,与雷诺现象及肺间质纤维化有一定关系。

类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中的趋化因子CCL4对内皮细胞招募淋巴细胞的影响

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者滑膜成纤维细胞(SF)中趋化因子CCL4对调节内皮细胞招募淋巴细胞中的影响。方法采用ELISA检测25例RA患者与18例骨关节炎(OA)患者血清及滑液中CCL4的表达,检测TNF-α对SF表达CCL4的影响;Transwell共培养及平行板流动小室法观察CCL4中和抗体对SF诱导内皮细胞招募淋巴细胞的作用。结果趋化因子CCL4在RA患者血清及滑液中的表达高于OA患者(P<0.01);TNF-α可以诱导SF表达CCL4(P<0.05);CCL4中和抗体可抑制SF对内皮细胞招募淋巴细胞的促进作用(P<0.05)。结论SF通过表达CCL4促进内皮细胞招募淋巴细胞。

系统性红斑狼疮外周血CD4^+CD25^-T细胞诱导适应性Treg细胞障碍与IL-2受体γ链表达缺陷

目的研究适应性调节性T细胞(iTreg细胞)在系统性红斑狼疮(SLE)病理机制中的作用。方法根据SLE疾病活动度(SLEDAI)评分,将35例SLE患者(D组)分为非活动组(A组,12例)和活动组(B组,23例);另选取22例健康志愿献血者为正常对照组(C组)。用CD3抗体、CD28抗体、转化生长因子β(TGF-β)和IL-2诱导外周血CD4^+CD25^-T细胞,流式细胞术检测诱导转化获得的CD4+CD25+Foxp3+T细胞转化率、TGF-β受体和IL-2受体表达,并分析其与SLEDAI评分的相关性。结果与C组相比,B组CD4^+CD25^-T细胞经诱导后的CD4+CD25+T细胞比例降低[(9.74±20.50)%vs.(95.85±3.81)%](P<0.01)。D组诱导转化形成的iTreg细胞比例低于C组(P<0.01),且与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.77,P<0.05)。D组CD4^+CD25^-T细胞中IL-2受体γ链表达低于C组(P<0.05),且与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.66,P<0.05)。D组CD4^+CD25^-T细胞中TGF-β受体Ⅰ表达高于C组(P<0.05),但与SLEDAI评分无相关性(r=-0.27,P>0.05)。结论 SLE患者IL-2受体γ链表达缺陷所导致的IL-2受体信号受损可能引起iTreg细胞诱导形成障碍,从而参与SLE的发病机制。

补肾方骨青颗粒对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响

目的探讨补肾方骨青颗粒对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响。方法体外诱导破骨前体细胞系RAW264.7向破骨细胞分化,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞数目,图像分析计算骨吸收陷窝面积,荧光定量RT-PCR检测骨青颗粒对破骨细胞骨吸收功能标志性基因水平。结果与对照组相比,骨青颗粒可显著抑制TRAP染色阳性细胞的产生,减少破骨细胞骨吸收陷窝的面积,明显降低破骨细胞骨吸收功能标志性基因[组织蛋白酶K(Ctsk)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)]mRNA的表达。结论骨青颗粒可显著抑制破骨细胞的分化及骨吸收功能。

系统性红斑狼疮患者的Th细胞亚群平衡失调的初步研究

为分析Th亚群平衡失调在系统性红斑狼疮 (SLE )发生发展中的变化特点 ,以ELISA法检测血清IL 10、IL 12水平 ,以细胞内细胞因子的流式细胞术检测SLE患者PBMC的不同Th细胞亚群分泌细胞因子的变化特点 ,应用三色荧光标记技术分析Th1/Th2细胞表型。结果显示 :SLE患者血清IL 10水平显著高于正常人 ,而IL 12呈低水平表达。SLE患者CD4 + IFN γ IL 10 + 细胞亚群百分率显著高于正常人 ,IFN γ+ IL 10 与IFN γ IL 10 + 细胞亚群的比值明显降低 ,IFN γ+ IL 10 + 双阳性的CD4 + T细胞亦显著增多。SLE患者的CD4 + CCR5 CCR3+ 细胞亚群百分率与正常人比较显著升高 ,CD4 + CCR5 + CCR3 细胞亚群与正常人比较 ,示发现有显著差异 ,CD4 + CCR5 + CCR3 /CD4 + CCR3+ CCR5 比值显著低于正常对照组。这些结果提示 :SLE高水平IL 10与IL 12的低水平表达呈负相关 ;患者体内分泌IL 10的Th细胞数增多 ;Th细胞表面趋化因子受体的表达提示SLE存在CCR5 CCR3+ 细胞亚群的优势活化、数量增多 ,CCR5 + CCR3 /CCR3+ CCR5 细胞比例失调 ,从而导致免疫网络平衡被破坏。

42例大动脉炎临床实验检查血管造影的研究

目的：分析４２例大动脉炎，探讨早期诊治。方法：对散在９个临床科室的４２例病人分析临床表现的异质性、常规和免疫学检查结果，所有病例均做动脉造影。结果：早期临床表现无特异性，无脉和继发性高血压发生率分别占２１４％、７８６％，约７０％可听到血管杂音。一般化验及免疫学检查无意义，多普勒彩超和肾图阳性率各８０％。动脉造影示头臂动脉型８例、主肾动脉型２９例、广泛型５例，１８例行球囊导管扩张治疗，成功１４例，较早期的９例内科治疗，７例好转。结论：早期诊断仍是今后研讨的核心，抗内皮细胞抗体和血栓调节素已提出有助诊断，动脉造影可明确病变程度并行扩张治疗，应尽早选用。