肺炎克雷伯菌医院感染的分布与耐药状况

目的了解医院感染肺炎克雷伯菌的分布与耐药现状,为临床合理用药提供依据。方法用ATB微生物鉴定仪鉴定细菌菌株,K-B法作体外药敏试验、纸片确证法检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株;用WHONET5.3软件对细菌耐药率进行统计分析。结果医院感染肺炎克雷伯菌分离菌株主要分布于ICU、神经科、呼吸科、肿瘤科及血液科,占91.6%,在各种标本中,痰液占74.4%;分离菌株ESBLs阳性率39.8%;医院感染肺炎克雷伯菌除美罗培南外,对其余13种抗菌药物存在不同程度耐药(7.6%～66.7%),比较敏感的有亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟及阿米卡星,产ESBLs菌株对抗菌药物(除碳青酶烯外)耐药率明显高于非产ESBLs株;2周内头孢三代抗菌素使用者与未使用者,分离株对头孢他定的敏感性存在明显差异。结论医院感染肺炎克雷伯菌分离株对常用抗菌药物耐药率及ESBLs携带率高,产ESBLs株多重耐药现象突出;需加强医院感染肺炎克雷伯菌的耐药性监测。

医院下呼吸道感染革兰阴性菌菌种分布与耐药性

目的:了解我院下呼吸道医院感染常见革兰阴性菌菌种分布与耐药性,为临床治疗提供参考依据。方法:对186株革兰阴性杆菌进行耐药性检测,采用ATB分析仪进行细菌鉴定,并用K-B法进行体外药敏试验。结果:病原菌以肺炎克雷伯菌检出率占首位(27.4%),其次是铜绿假单胞菌(21.5%)及不动杆菌属(17.2%);大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为41.2%、47.1%。药敏结果显示,病原菌耐药性严重,亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟及头孢他啶的耐药率相对较低(嗜麦芽窄食假单胞菌除外)。结论:下呼吸道医院感染革兰阴性菌具有多重耐药性,加强细菌的耐药性监测对指导临床合理用药、减缓耐药菌株的产生及控制医院感染的暴发流行具有重要意义。

多重耐药铜绿假单胞菌β内酰胺类抗生素耐药基因和膜孔蛋白基因研究

目的分析临床分离的20株多重耐药铜绿假单胞菌(MDR-PAE)中的β内酰胺类耐药基因和膜孔蛋白基因的存在状况。方法收集2009年2月至2010年4月南京医科大学第二附属医院住院患者中分离的MDR-PAE20株,采用PCR及序列分析方法对23种β内酰胺类抗生素耐药基因和膜孔蛋白基因进行检测及基因序列分析。结果 20株MDR-PAE菌中检出TEM、PER、DHA、OXA-10群等4种β内酰胺酶基因,阳性率分别为25%、20%、5%、20%,6株细菌检出1种以上β内酰胺酶基因;膜孔蛋白编码基因OprD2均缺失(缺失率为100%)。结论本组20株MDR-PAEβ内酰胺类耐药基因的携带率较低,该菌对亚胺培南耐药与其膜孔蛋白编码基因OprD2缺失有关,而对其他抗菌药物的耐药可能与其外排泵的增强表达有关。

多重耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解南京地区多重耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因的存在状况。方法自2007年7—10月间南京地区住院病人标本中分离并筛选出20株多重耐药鲍曼不动杆菌,微量肉汤稀释法测定11种抗菌药物的敏感性;PCR法检测16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因。结果20株多重耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶(armA、rmtB)基因均为阴性;氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅰ基因阳性株10株、aac(3)-Ⅱ阳性株1株、aac(6′)-Ⅰb基因阳性株13株、ant(3″)-Ⅰ基因阳性株12株;ant(2″)-Ⅰ基因、aac(6′)-Ⅱ基因及aac(6′)-Ⅰad基因均为阴性。结论南京地区多重耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷药物耐药的主要原因是aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ4种氨基糖苷类修饰酶基因的存在;尚未检出氨基糖苷类修饰酶新亚型———aac(6′)-Ⅰad基因和16S rRNA甲基化酶armA、rmtB基因。

2005-2007年医院感染大肠埃希菌产ESBLs、AmpC酶及耐药性分析

目的分析医院感染大肠埃希菌产ESBLs、AmpC酶的情况及耐药性状况。方法双纸片协同试验及纸片扩散确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),三维试验方法检测头孢菌素酶(AmpC酶);对医院及社区感染大肠埃希菌的ESBLs检出率、产与非产ESBLs医院感染大肠埃希菌在病原学结果出现前两周的抗菌药物应用情况及对17种抗菌药物的耐药率进行比较。结果医院感染大肠埃希菌的ESBLs检出率55.1%,AmpC酶的检出率为17.4%;病原学结果出现前两周使用头孢菌素及碳青酶烯类抗菌药物对医院感染大肠埃希菌产与非产ESBLs间差异有统计学意义;医院感染大肠埃希菌对碳青酶烯类药物以外的15种抗菌药物出现不同程度的耐药,比较敏感的抗菌药物尚有哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦及阿米卡星。结论医院感染大肠埃希菌ESBLs携带率高,可同时携带AmpC酶及其他耐药基因,造成多药耐药;需加强对抗菌药物应用的规范化管理,提高临床医师合理使用抗菌药物的意识。

鲍氏不动杆菌下呼吸道医院感染危险因素与耐药性

目的探讨鲍氏不动杆菌下呼吸道医院感染的危险因素及其耐药状况。方法回顾性分析2004~2009年医院47例鲍氏不动杆菌下呼吸道医院感染及96例鲍氏不动杆菌下呼吸道定植患者的临床资料及耐药情况,对鲍氏不动杆菌下呼吸道医院感染的危险因素分别进行单因素及多因素Logistic回归分析,并就鲍氏不动杆菌的下呼吸道医院感染株与定植株的耐药状况进行对比。结果导致鲍氏不动杆菌医院下呼吸道感染的危险因素主要包括,患者APACHEⅡ评分>15分、罹患慢性阻塞性肺疾病、2周内使用三代头孢菌素及糖皮质激素4种因素;对临床常用9种抗菌药物耐药率,鲍氏不动杆菌下呼吸道医院感染株明显高于定植株;感染株中多药耐药株比例为100.0%,而定植株中多药耐药株为27.1%;感染株对头孢哌酮/舒巴坦及碳青酶烯类抗菌药物保持较高敏感性。结论病情严重、罹患COPD、近期使用第三代头孢菌素及糖皮质激素易出现鲍氏不动杆菌下呼吸道医院感染,且感染株耐药现象严重。

综合重症监护病房肠杆菌科细菌致血流感染发生的危险因素

目的 探讨综合监护病房医院获得性肠杆菌科细菌血流感染（BSI）的危险因素.方法回顾性分析南京医科大学第二附属医院重症医学科综合监护病房2007年1月至2012年12月间南京医科大学第二附属医院重症医学科获得性肠杆菌科及非肠杆菌科细菌BSI患者的临床资料,分析肠杆菌科细菌BSI发生的危险因素,并以是否存活作为预后判定的终点指标,对肠杆菌科细菌BSI分别进行单因素及多因素Logistic回归分析,探究影响其存活的相关因素.结果 在96例医院获得性血流感染患者中35例为肠杆菌科细菌BSI,35例肠杆菌科细菌BSI患者中15例死亡,病死率42.9%;就肠杆菌科与非肠杆菌科细菌BSI患者的基础及临床特征对比后发现,影响肠杆菌科细菌BSI发生的危险因素包括急性胰腺炎、接受腹部手术及使用制酸剂（17.1%比4.9%,31.4%比16.4%,77.1%比45.9%;P＆lt;0.05 或0.01）.对肠杆菌科细菌BSI患者生存组和死亡组各项特征的单因素分析及多因素Logistic回归分析发现,对肠杆菌科细菌BSI患者存活的影响因素包括患者年龄、APACHEⅡ评分、气管插管或切开及ESBL阳性（P＆lt;0.05）.结论 在入住综合监护病房的患者中,急性胰腺炎、接受腹部手术及使用制酸剂的患者更易罹患肠杆菌科细菌BSI;而一旦发生细菌BSI,患者的年龄、APACHEⅡ评分、气管插管或切开及ESBLs阳性是影响其预后的重要因素.

医院多药耐药铜绿假单胞菌菌株亲缘关系研究

目的分析一所三级教学医院临床分离的20株多药耐药铜绿假单胞菌(MDR-PAE)的菌株亲缘关系。方法收集2009年2月-2010年4月,从医院住院患者分离出的MDR-PAE 20株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析方法对42种β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、甲基化酶基因、可移动遗传元件遗传标记以及毒力因子基因进行检测,并将检测结果作聚类分析以探讨MDR-PAE的菌株亲缘关系。结果 20株MDR-PAE中,TEM、PER、DHA、OXA-10群等4种β-内酰胺酶基因的阳性检出率分别为25.0%、20.0%、5.0%及20.0%,膜孔蛋白编码基因oprD2缺失率为100.0%;tnp513/ISCR1I、S26I、Spa7及intⅠ1等4种转座子、插入序列和整合子遗传标记基因的阳性检出率分别为20.0%、20.0%、30.0%及30.0%;氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ及ant(2″)-Ⅰ的阳性检出率分别为40.0%、10.0%、20.0%、15.0%及10.0%,甲基化酶基因rmtB的阳性率为15.0%;以42种β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、甲基化酶基因和可移动遗传元件遗传标记以及毒力因子基因作检测结果的样本聚类分析显示,编号为No.2、8等2株,4、5、6等3株及1、10、11、12、14、15、20等7株为三群克隆传播。结论多药耐药铜绿假单胞菌株在该院不同科室间存在3群克隆传播株,加强对MDR-PAE耐药基因检测并对结果进行聚类分析对其医院感染的实时监测很有意义。

凝固酶阴性葡萄球菌下呼吸道医院感染临床特点及耐药状况

目的探讨凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）下呼吸道医院感染临床特点及耐药状况。方法回顾性总结近3年（2006—2008年）37例凝固酶阴性葡萄球菌下呼吸道医院感染及68例凝固酶阴性葡萄球菌下呼吸道定植患者的临床资料及耐药情况，对CNS下呼吸道医院感染的易感因素、基本临床表现及CNS的耐药状况进行分析。结果导致CNS下呼吸道医院感染的因素，包括长期卧床、年龄〉65岁、COPD、长时间使用碳青酶烯类、第三代头孢菌素、氟喹诺酮类药物及合并真菌感染，CNS感染者较定植者死亡率高；CNS下呼吸道医院感染者体温多在37．5～38．5℃、外周血像多在正常范围内、肺部影像学约50％表现为双侧渗出性改变；CNS多为MRCNS，对多种抗菌药物耐药，对利福平及夫西地酸的耐药率相对较低，未检出万古霉素及替考拉宁耐药株。结论CNS下呼吸道医院感染者毒血症状轻、临床表现不典型；免疫状态低下及长期使用广谱抗菌药物易导致CNS下呼吸道医院感染；CNS临床分离株耐药现象严重。

耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶与膜孔蛋白编码基因以及KPC—ISKpn6连锁检测

目的探讨耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌的耐药机制。方法对南京地区两家三甲综合性医院的耐碳青霉烯抗菌药物肺炎克雷伯菌临床分离株，采用PCR方法对其40种β-内酰胺酶基因、膜孔蛋白编码基因及KPC-ISKr，n6连锁进行检测，PCR阳性产物进行测序，测序结果BLAST对比分析。结果24株耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌的A类β-内酰胺酶编码基因TEM-1及SHV的阳性检出率为100％（24／24）、KPC-2的阳性检出率为95．8％（23／24）、LAP-2的阳性检出率为45．8％（11／24），C类β-内酰胺酶编码基因DHA的阳性检出率为4．2％（1／24），KPC—ISKpn6连锁检测阳性率为95．8％（23／24），膜孔蛋白编码基因ompK35与ompK36的突变率分别为95．8％（23／24）及100％（24／24）。结论本组肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶TEM-1、SHV、KPC-2、LAP-2的携带率较高，其中KPC-2的高携带率及膜孔蛋白编码基因ompK35、ompK36的高突变率是本组肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制；插入序列ISKpn6可能参与了KPC-2基因的介导。

多药耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类耐药相关基因研究

目的研究临床分离的多药耐药铜绿假单胞菌(MDR-PEA)常见氨基糖苷类修饰酶及甲基化酶基因的存在状况。方法收集2009年2月-2010年4月从医院住院患者分离出来的MDR-PAE20株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析对6种甲基化酶及8种氨基糖苷类修饰酶基因进行检测及测序。结果 20株MDR-PAE中,甲基化酶基因rmtB阳性率为15.0%;氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ的阳性率分别为40.0%、10.0%、20.0%、15.0%、10.0%,未检出aac(3)-Ⅰ、ant(4′)-Ⅰ及aph(3′)-Ⅱb。结论产氨基糖苷类修饰酶是MDR-PAE对氨基糖苷类药物耐药的主要机制,非产氨基糖苷类修饰酶MDR-PAE株对氨基糖苷类药物耐药可能与其他机制有关。

产KPC型β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌对氟喹诺酮类耐药机制研究

目的探讨产KPC型β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制,为指导临床合理使用抗菌药物提供依据。方法两所三甲综合性医院临床分离的23株产KPC型β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌,采用K-B纸片法药敏试验,聚合酶链反应(PCR)方法对氟喹诺酮类药物作用靶位编码基因gyrA、parC和可移动遗传元件介导的aac(6′)-Ⅰb-cr、qnrA、qnrB、qnrS、qepA基因进行检测,对阳性产物进行测序,测序结果作BLAST对比分析。结果 23株产KPC型β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌检出拓普异构酶ⅡA亚单位编码基因,gyrA喹诺酮耐药决定区(QRDR)的第83位密码子TCC→ATC有义突变(氨基酸序列S→I),第87位密码子GAC→GGC有义突变(氨基酸序列D→G),且23株菌株均出现拓普异构酶ⅣC亚单位编码基因parC喹诺酮耐药决定区(QRDR)第80位密码子AGC→ATC有义突变(氨基酸序列S→I);但23株产KPC型β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌由可移动遗传元件可介导的氟喹诺酮类耐药相关基因(aac(6′)-Ⅰb-cr、qnrA、qnrB、qnrS、qepA)检测均为阴性。结论 23株产KPC型β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的gyrA与parC基因QRDR区的有义突变是氟喹诺酮类药物耐药的主要机制,加重了其耐药性,给临床抗菌药物选择带来困难,需引起重视。