钙纳米粒子的制备及表征鉴定

目的:制备钙纳米粒子并进行表征鉴定。方法:采用液相沉淀法,在不同温度、缓冲液、液体混合方式下制备钙纳米粒子,并用透射电镜(TEM)、粒度分布仪、X射线能谱仪(XPS)等测试手段对该纳米粒子的结构、大小和形状等进行表征。结果:低温下向柠檬酸钠中匀速缓慢加入等量氯化钙和磷酸氢二钠并搅拌,可得到颗粒状钙纳米粒子,平均粒径260 nm,XPS结果显示其化学成分为磷酸钙。结论:通过液相沉淀法,成功制备了大小、形态较理想的钙纳米粒子。

抗独特型抗体NP30诱导虫卵肉芽肿细胞凋亡的分子机制

目的 研究抗独特型抗体 NP30诱导虫卵肉芽肿细胞凋亡的分子机制。方法 BAL B/c小鼠随机分为两组 ,实验组腹腔注射 NP30 10μg/次 ,连续 3次 ,对照组腹腔注射生理盐水 ,分别在尾蚴攻击感染后第 39、4 9、6 4、10 8、112天处死 ,应用免疫组化 S- P法检测凋亡相关基因 Bax、Bcl- 2、Fas、Fas L和 c- Fos的表达 ,原位分子杂交检测 Bax与 Fas m RNA。结果 虫卵肉芽肿细胞均表达Bax、Fas、Fas L和 c- Fos蛋白 ,其中实验组 Bax和 Fas L蛋白表达均高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;实验组Fas和 c- Fos蛋白表达在第 6 4天和第 112天低于对照组 ,其余各时间点均高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;Bcl- 2蛋白在实验组和对照组均无表达。实验组 Bax和 fas m RNA表达均高于对照组。结论 死亡受体 Fas和 Fas L途径启动了 NP30诱导肉芽肿细胞凋亡的信号 ,NP30通过凋亡相关基因 Bax和

日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48单特异性双链抗体的构建表达与初步鉴定

目的构建和表达日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48单特异性双链抗体,并初步鉴定表达产物活性。方法应用SOE法扩增双链抗体基因VH-linker-VL(Diabody,简称D)。将D重组入原核表达载体pBAD/gⅢ。表达质粒转化E.coliTOP10,左旋阿拉伯糖诱导表达。对D的表达产物进行分离纯化,采用Dot-ELISA法检测纯化蛋白与NP30、可溶性虫卵抗原(SEA)、可溶性成虫抗原(SWAP)的结合活性。结果测序证实双链抗体基因D构建成功;构建了D的原核表达系统,诱导表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约为27kD;经纯化、变性复性后用Dot-ELISA法鉴定结果表明,D表达的纯化蛋白可与NP30特异性结合。结论所构建、表达的NP48单特异性双链抗体具有亲本单抗的部分特性。

日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48可变区基因的克隆及序列分析

目的 克隆日本血吸虫单克隆 anti- anti- id NP4 8轻链及重链可变区基因并分析其序列。方法 从杂交瘤细胞 NP4 8提取总 RNA、RT- PCR扩增目的基因片段 ,分别克隆于 p MD18- T载体 ,测序并作核苷酸序列分析。结果 VL 基因全长 336 bp,属鼠免疫球蛋白κ链第 亚类 ,由种系基因he2 4与 Jκ4 重排而来。该 VL基因序列已被 Gene Bank收录 (accession No.AY 30 90 10 )。 VH 基因全长35 4 bp,属鼠免疫球蛋白重链第 亚类 ,由种系 J5 5 8.4 7、Dsp2 .2和 JH4 基因重排而来。该 VH 基因序列已被 Gene Bank收录 (accession No.AY312 4 33)。结论 序列比对分析表明该 VL、VH基因为日本血吸虫单克隆 anti- anti- id NP4 8可变区基因。