细胞蜡块和分子检测在恶性胸腔积液病理诊断中的应用

目的探讨恶性胸腔积液制备细胞蜡块技术在病理诊断中的优势,并阐述其与免疫组化及分子检测相结合在实现个体精准化治疗中的运用价值。方法回顾性分析我院248例胸腔积液细胞学涂片及细胞蜡块的HE形态,评价细胞蜡块免疫组化的特点,并对80例标本行荧光定量微滴式数字PCR及二代测序NGS。结果与传统细胞学涂片及液基细胞学相比,胸水细胞蜡块细胞数量增多且具有一定的空间结构,免疫组化以CK7,NapsinA,TTF-1阳性最多见,提示肿瘤原发灶多为肺来源。常规细胞学组和细胞蜡块组诊断恶性胸腔积液的灵敏度、特异度及准确性分别为87%、75%、87%和99%、87%、99%。常规细胞学组与细胞蜡块组两种诊断方法一致性较差(Kappa值为0.269)。常规细胞学和细胞蜡块诊断之间具有显著差异(P<0.05)。46%(37/80)患者胸水细胞蜡块行ddPCR及NGS分子检测出现基因突变,主要为EGFR、PD-L1、KRAS和TP53等,其中EGFR突变率分别约为34%。27%(7/26)患者PD-L1免疫组化结果示阳性。结论细胞蜡块技术在胸腔积液良恶性诊断及鉴别来源中具有重要的作用,不仅为基因检测提供了有价值的标本,并且提高了晚期癌症患者临床靶向治疗的可能性。

脑膜癌病的临床与病理特点

目的探讨脑膜癌病的临床与病理特点。方法回顾性分析142例脑膜癌病患者的临床及脑脊液(CSF)细胞学资料和免疫细胞化学标记结果。结果本组患者临床特点:头痛123例(86.62%),头晕19例(13.38%),发热26例(18.31%),视物模糊10例(7.04%)。CSF检查及免疫标记:全部患者CSF中均发现癌细胞;癌细胞上皮膜抗原(EMA)(+),细胞角蛋白(CK)(+),CD14(-),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)(-)。其中99例(69.72%)CK低分子(+)、高分子(-),诊断为转移性腺癌;33例(23.24%)CK高分子(+)、CK低分子(-),诊断为转移性鳞癌;10例(7.04%)CK高分子(+)、CK低分子(+),考虑为腺鳞癌。105例找到原发灶,其中67例(47.18%)确诊为肺癌;23例(16.20%)在消化道内找到原发灶;9例(6.34%)为乳腺癌;子宫内膜癌、卵巢癌、肝癌各1例。另有37例(26.06%)未找到原发灶。诊断明确的患者中,15例失访,另90例中有82例(91.11%)于确诊后3～14个月死亡。未找到原发灶的患者中,有6例失访,另31例中有28例(90.32%)在确诊后2～13个月内死亡。结论脑膜癌病患者以头痛、头晕为主要临床表现,并可伴有发热及视物模糊。CSF细胞学检查是诊断脑膜癌病的主要依据,通过免疫细胞化学的方法,可以确定转移癌细胞。脑膜癌病患者预后较差。

脊索瘤样脑膜瘤的临床与病理特点

目的探讨脊索瘤样脑膜瘤的临床与病理特点。方法应用组织病理学、组织化学以及免疫组织化学方法对1例脊索瘤样脑膜瘤患者进行观察,结合文献分析其临床与病理特点。结果脊索瘤样脑膜瘤在临床上可以伴有或不伴有Castleman综合征。以黏液样基质中有呈分叶状或条索状排列的肿瘤细胞为病理学特点,细胞质呈淡染或嗜酸性染色,部分细胞呈液滴状,分布于黏液样基质中,类似脊索瘤样细胞;肿瘤组织中亦可见由典型脑膜皮细胞型脑膜瘤细胞组成的区域。组织化学方法过碘酸雪夫染色呈阳性反应。免疫组织化学染色显示,肿瘤细胞上皮膜抗原、波形蛋白及表皮生长因子受体表达阳性,细胞角蛋白、S-100蛋白呈灶性阳性反应,癌胚抗原表达阴性,Ki-67抗原标记指数<1%,35%肿瘤细胞p53蛋白表达阳性。结论脊索瘤样脑膜瘤为临床罕见的特殊类型脑膜瘤,通过临床病史、组织病理学、组织化学和免疫组织化学检测可以明确诊断。预后尚有待进一步观察。

中枢神经系统神经节细胞胶质瘤/神经节细胞瘤的病理特点

目的探讨神经节细胞胶质瘤/神经节细胞瘤的病理特点。方法对19份神经节细胞胶质瘤/神经节细胞瘤标本进行光镜、免疫组化标记及电镜观察。结果(1)肿瘤细胞呈弥漫分布,排列紊乱、疏密不匀,部分区域成团分布;(2)肿瘤细胞与神经节细胞形态相似,呈多形性,核大、不规则,可见双核,核仁清楚,胞浆丰富,突起不明显;(3)胶质瘤成分为世界卫生组织分级标准Ⅱ～Ⅲ级;(4)瘤细胞免疫组化表型:胶质纤维酸性蛋白(-)、S100蛋白(+)、突触素(+);(5)电镜观察瘤细胞胞浆中可见溶酶体、核糖体及粗面内质网,线粒体丰富,并有神经内分泌颗粒。结论神经节胶质细胞瘤/神经节细胞瘤是罕见的中枢神经系统肿瘤,诊断主要依靠病理组织学、免疫组化标记及电镜观察;瘤的性质取决于胶质瘤成分。

儿童中枢神经系统肿瘤的临床及病理特征

目的 探讨儿童中枢神经系统 (CNS)肿瘤的临床及病理特征。方法 总结分析 12 0例儿童CNS肿瘤患者的临床及病理资料 ,并与成年患者进行比较。结果 儿童患者多急性起病 ,病程短 ,缺乏恶病质特征。小脑肿瘤 2 8例 (2 3.3% ) ,髓母细胞瘤 11例 (9.2 % )、颅咽管瘤 10例 (8.3% )、蛛网膜囊肿 2 0例(16 .8% )及原始神经外胚叶肿瘤 8例 (6 .7% ) ,发病率均高于成年组 (均 P <0 .0 0 1) ;而脑膜瘤和神经鞘瘤各4例 (3.3% ) ,发病率明显低于成年组 (均 P<0 .0 0 1)。胶质瘤两组发病率相近 ,儿童组颞叶多见 ,多为 级 ,而成人组以额叶多见 ,多为 ～ 级。结论 儿童 CNS肿瘤类型以髓母细胞瘤、颅咽管瘤、蛛网膜囊肿及原始神经外胚叶肿瘤多见。

中枢神经系统Rosai-Dorfman病4例临床病理分析

目的探讨中枢神经系统Rosai-Dorfman病(Rosai-Dorfman disease,RDD)的临床病理特点、免疫表型、诊断及鉴别诊断、治疗及预后。方法回顾性分析2011年~2018年南京医科大学附属脑科医院诊治的4例中枢神经系统RDD的临床病理资料并复习相关文献,其中2例曾误诊为富于淋巴浆细胞型脑膜瘤。结果4例RDD中男性2例,女性2例,平均年龄48.75岁。镜下见病变组织细胞混合淋巴细胞、浆细胞成分呈结节状浸润,伴有纤维化或胶原化背景。组织细胞中可见典型的“伸入运动”,即胞质内可见吞噬的淋巴细胞、浆细胞及红细胞。免疫表型:组织细胞S-100、CD68、vimentin阳性,CD1a、BRAF V600E阴性,IgG4/IgG比值均<40%。结论中枢神经系统RDD是一种罕见的良性组织细胞增生性疾病,临床及影像常误诊为脑膜瘤。因此要提高对此类病变的认识,做出正确诊断,防止误诊。

老年原发性中枢神经系统淋巴瘤的病理学特征和免疫表型

目的探讨老年原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)的病理特征及免疫表型。方法对22例老年PCNSL患者手术切除的肿瘤标本进行常规HE染色、网状纤维染色和免疫组织化学染色检查。结果 22例患者的病灶大体观察均为质地较软的不规则灰白色肿块,无包膜,与周围组织界限不清。HE染色光镜观察示,肿瘤细胞弥漫或局灶性浸润脑组织,以及围血管现象。围血管现象有3种类型:(1)肿瘤细胞浸润小动脉壁,似洋葱皮样构型15例;(2)在小血管周围,呈球状浸润,不贴血管壁14例;(3)浸润小血管,呈袖套样,破坏并侵入血管壁10例。免疫组织化学染色示,CD45表达均(+),B细胞标记物CD20(+)18例(82%),CD79a(+)15例(68%),其他免疫标记均(-);22例患者均为B细胞性淋巴瘤,符合弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。结论 DLBCL是老年PCNSL的主要病理类型,病理特点为肿瘤细胞弥漫或局灶性浸润脑组织及围血管现象。免疫表型为B淋巴细胞标记物表达阳性,其对PCNSL的诊断有重要的价值。

脑胶质瘤细胞增殖和凋亡及病理分级关系的研究

目的:研究脑胶质瘤细胞增殖和细胞凋亡与肿瘤病理分级的关系。方法:免疫组化方法检测60例脑胶质瘤的增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况。并计算增殖/凋亡指数。结果:不同级别胶质瘤PCNA的表达及细胞凋亡不同,但部分级别间无显著差异,增殖/凋亡指数各级别间差异显著,与肿瘤病理级别呈显著正相关(r=0.782,P<0.001)。结论:增殖/凋亡指数可更准确的反应胶质瘤的恶性程度和临床特点,对判断预后有重要意义。

脑淀粉样血管病所致脑出血的免疫性血管病理损害初步研究

目的回顾性分析外科手术治疗的自发性脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)病理标本中脑淀粉样血管病(cerebral amyloid angiopathy,CAA)及相关免疫-血管因子共表达情况,探讨CAA-ICH的免疫性血管病理损害可能机制。方法收集2010-2011年46例ICH患者的手术病理标本,其中男27例,女19例,平均年龄(56±15)岁。免疫组化荧光检测β-淀粉样蛋白(amyloidβ,Aβ)与晚期糖基化终产物受体(glycosylation end products,RAGE)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low-density lipoprotein receptor related protein-1,LRP1)蛋白的共表达情况。结果 46例ICH患者中8例(男5例,女3例)确诊为CAA,占17.39%,确诊为CAA的8例患者脑组织标本均有Aβ、RAGE、LRP1蛋白的共表达(阳性率100%),而在非CAA自发性脑出血患者中均无共表达。CAA-ICH组的LRP1表达水平较非CAA-ICH组显著降低(P=0.031),而CAA-ICH组的RAGE表达水平较非CAA-ICH组显著升高(P=0.015)。结论 CAA是ICH的重要病因之一,CAA相关的免疫-血管因子RAGE、LRP1蛋白异常表达,在ICH发病机制中可能有重要作用。

肌肉病理检查中ATP酶(pH9.4)和ATP酶(pH4.6)染色的合并孵育

肌肉标本ATP酶染色对各种肌病的病理诊断和临床诊断有很大的价值。但由于肌酶组化染色工作量大、步骤多和耗时长,有必要对个别的肌酶组化染色进行简化。为此,本研究对ATP酶（pH9.4）和ATP酶（pH4.6）染色进行合并孵育,取得非常满意的效果,现报告如下。

老年人脑膜癌病临床病理分析

目的 探讨老年人脑膜癌病临床病理特点。 方法 对 78例≥ 60岁的脑膜癌病患者的临床症状、体征进行分析 ,对其脑脊液细胞片进行免疫细胞化学标记 (ABC法 ) ,并随访。 结果 1.临床表现 :85 90 % (67例 )的患者以头痛为主要临床表现 ;14 10 % (11例 )表现为头晕 ;有 17 95 % (14例 )伴有发热 ;另有 6 41% (5例 )伴有视物模糊。 2 .标记结果 :全部癌细胞上皮膜抗原 (EMA) (+ ) ,细胞角蛋白 (CK) (+ ) ,CD14 (-) ,胶质酸性蛋白(GFAP) (-)。其中 ,5 4例CK高分子 (+ ) ,CK低分子 (-) ,诊断为转移性腺癌 ;18例CK高分子 (-) ,CK低分子(+ ) ,诊断为转移性鳞癌 ;6例CD高分子 (+ ) ,CK低分子 (+ )考虑为腺鳞癌。 3 .随访结果 :3 6例 (4 6 15 % )确诊为肺癌 ;11例 (14 10 % )在消化道内找到原发灶 ;4例 (5 13 % )为乳腺癌 ;子宫内膜癌、卵巢癌、肝癌各 1例。另有 2 4例(3 0 77% )未找到原发灶。 5 4例诊断明确者中 ,5 0例 (92 5 9% )的患者于确诊后 3～ 14月死亡。未找到原发灶的患者中 ,2 2例 (91 67% )在 2～ 13月内死亡。 结论 1.脑膜癌病患者以头痛、头晕为主要临床表现 ,并可伴有发热及视物模糊。 2 .脑脊液细胞学检查是诊断脑膜癌病的主要依据 ,通过免疫细胞化学的方法 ,可以准确判定转?

胶质瘤中MGMT和P53蛋白表达与临床病理的关系

目的初步探讨脑胶质瘤中MGMT、P53蛋白表达与胶质瘤临床病理的关系。方法免疫组织化学(Envi-sion两步法)检测49例脑胶质瘤中MGMT蛋白表达及P53蛋白表达。结果49例脑胶质瘤MGMT蛋白表达阳性率为55.10%(27/49)。脑胶质瘤病理分级Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级MGMT蛋白表达阳性率分别为59.09%、50.0%、45.45%,各组间差异无统计学意义(P=0.754),MGMT蛋白表达在男性为59.26%,女性为50.0%,两者之间差异无统计学意义(P=0.517);MGMT蛋白表达在>50岁患者中为53.84%,≤50岁患者中为61.11%,两者之间差异无统计学意义(P=0.915)。27例MGMT蛋白表达阳性的组织中7例P53蛋白表达阳性;22例MGMT蛋白表达阴性的组织中12例P53蛋白表达阳性,胶质瘤组织MGMT与P53的表达呈负相关(r=-0.292,P<0.05)。结论MGMT蛋白表达可能与脑胶质瘤发生和预测放化疗敏感性有关,而与胶质瘤病理分级和临床特征无显著关系。

泛素结合酶E2Q1表达与肺腺癌临床病理特征及预后相关性分析

目的探究泛素结合酶E2Q1(Ubiquitin-conjugating enzyme E2Q1,UBE2Q1)的表达与肺腺癌临床病理特征及预后的相关性。方法回顾性了选取了2013年1月-2016年12月南京市胸科医院接受根治性手术治疗的74例I~Ⅲ期肺腺癌患者的癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组化染色检测UBE2Q1蛋白表达水平,根据染色评分,将患者分为高表达组和低表达组,用卡方检验分析UBE2Q1蛋白水平与临床病理特征的相关性,KaplanMeier生存曲线分析UBE2Q1与肺腺癌患者预后相关性,单因素和多因素Cox比例风险模型分析影响肺腺癌患者生存期的危险因素。结果UBE2Q1在肺腺癌组织中高表达,且表达水平与肿瘤直径、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),与患者性别、年龄、吸烟史、肿瘤分化程度无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,UBE2Q1低表达较UBE2Q1高表达患者有更长的无病生存期(disease-free survival,DFS)和总生存时间(overall survival,OS)(P均<0.05)。Cox比例风险模型显示肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期以及UBE2Q1高表达是DFS、OS的危险因素,其中TNM分期是DFS、OS的独立危险因素。结论UBE2Q1在肺腺癌组织中高表达,且与肺腺癌肿瘤直径大、淋巴结转移、TNM分期晚及较差预后相关,UBE2Q1是肺腺癌的危险因素。

中央轴空病2例及文献复习

目的 :探讨中央轴空病的病理特点。方法 :通过HE、特殊染色及透射电镜的方法 ,观察 2例中央轴空病患者的肌肉活检标本 ,并复习文献。结果 :HE染色肌纤维中央有圆型深红色区 ,NADH TR染色见肌纤维中央有圆型无着色的轴空区 (尤其在Ⅰ型纤维 ) ,该区PAS染色不着色 ,MGT染色呈紫色 ,电镜观察显示 :轴空区肌节结构消失 ,肌丝排列紊乱 ,Z线物质呈水纹状 ,肌原纤维间未见线粒体、肌管、糖原和脂滴结构。结论 :中央轴空病的确诊主要依靠肌活检病理诊断 ,组织化学、酶组织化学染色及电镜观察对该病确诊有重要意义。

荧光导航技术在颅内恶性胶质瘤手术中的应用

目的探讨荧光导航技术在切除恶性脑胶质瘤的应用价值。方法应用荧光导航技术对14例大脑半球恶性胶质瘤患者进行手术切除。结果术后行头颅CT或MRI复查,见肿瘤全切除11例(78·6%)。患者一般情况均得到改善,无并发症发生,所有病例手术时间和住院日均较常规开颅手术缩短。结论荧光导航技术对于切除邻近重要功能区的恶性胶质瘤具有定位准确、微侵袭等特点,有助于提高恶性胶质瘤的全切除率,降低手术的并发症。

免疫荧光细胞化学染色联合激光扫描共聚焦显微技术对脑膜癌病的诊断价值

目的探讨免疫荧光细胞化学染色与激光扫描共聚焦显微技术联合检测在脑膜癌病诊断中的价值。方法采用免疫荧光细胞化学染色法,以小鼠抗人单克隆上皮膜抗原(EMA)标记脑膜癌细胞及对照组脑脊液细胞,激光扫描共聚焦显微技术获得脑膜癌细胞扫描图像并定量检测上皮膜抗原相对荧光强度。结果上皮膜抗原主要表达于脑膜癌细胞的细胞质和细胞膜,着红色荧光,相对荧光强度为(44.84±1 3.05),与对照组(3.98±1.58)相比差异有统计学意义(t=43.954,P=0.001)。免疫荧光细胞化学染色联合激光扫描共聚焦显微技术对上皮膜抗原的检测阳性率为90%(1 8/20),高于常规MGG染色法[60%(12/20)],组间差异具有统计学意义(x^2=4.800,P=0.010)。结论免疫荧光细胞化学染色与激光扫描共聚焦显微技术联合检测脑脊液细胞上皮膜抗原表达变化,可为脑膜癌病的诊断、组织来源提供实验室依据。

颅内原发性Rosai-Dorfman病:附3例报告并文献复习

目的探讨颅内原发性Rosai-Dorfman病(RDD)的MRI表现及病理特点,提高对该病的认识。方法对3例经病理证实的RDD患者MRI及病理特点进行回顾性分析,并对相关文献进行复习。结果 3例患者均行头颅MRI平扫加增强检查。2例为多发病灶,1例为单发病灶,均位于脑实质外;T1WI和T2WI均显示呈等信号影,其中2例基于脑膜生长,1例位于脑室内;增强后病灶呈明显均匀强化。显微镜下见较多组织细胞,淋巴细胞及浆细胞浸润伴纤维化,其中巨大组织细胞浆内可见大小不等的淋巴细胞;免疫组化显示这些组织细胞S-100蛋白和CD68标记阳性。结论颅内Rosai-Dorfman病较少见,易误诊,免疫组化检查有助于鉴别诊断。若MR检查发现基于脑膜生长的多发或孤立性病灶,应考虑到Rosai-Dorfman病的可能。

室管膜下巨细胞型星形细胞瘤

研究背景室管膜下巨细胞型星形细胞瘤为中枢神经系统少见肿瘤,多发生于20岁以下的儿童或青少年,好发于侧脑室室间孔区,大多数患者具有独特的组织病理学和免疫组织化学特征。方法与结果女性患者,13岁。临床表现为头晕、头痛伴呕吐;MRI显示左侧侧脑室室间孔区异常信号,增强后病灶呈不均匀明显强化。组织学观察肿瘤细胞大小不一、形态多样,大片束状排列的梭形细胞背景中可见成片的胖细胞样肿瘤细胞,胞质丰富呈毛玻璃样,以及少量节细胞样巨细胞和多核瘤巨细胞;肿瘤细胞胞核呈空泡状、核仁明显,无明显血管内皮增生或坏死区域;肿瘤细胞弥漫表达波形蛋白,部分表达S-100蛋白、上皮膜抗原和胶质纤维酸性蛋白,少量胖细胞样肿瘤细胞表达突触素,不表达神经微丝蛋白、神经元核抗原和细胞角蛋白,Ki-67抗原标记指数<1%。结论室管膜下巨细胞型星形细胞瘤为中枢神经系统良性肿瘤(WHOⅠ级),具有独特的临床表现和组织学特征,需注意与肥胖细胞型星形细胞瘤、室管膜瘤、神经节细胞胶质瘤和巨细胞型胶质母细胞瘤等相鉴别。

脑胶质瘤组织中胸腺嘧啶核苷激酶1的表达和意义及其与细胞增殖抗原Ki67表达的关系

目的研究脑胶质瘤组织中胸腺嘧啶核苷激酶1(TK1)的表达和意义,以及其与细胞增殖抗原Ki67表达的关系。方法 202例脑胶质瘤患者,经病理检查进行脑胶质瘤病理分级及组织类型分型。采用免疫组化染色法检测脑胶质瘤组织中TK1和Ki67的表达。比较不同级别及类型患者脑胶质瘤组织中TK1表达的阳性率;分析TK1与Ki67表达的关系。结果本组患者脑胶质瘤按WHO分级:Ⅰ级12例,Ⅱ级85例,Ⅲ级60例,Ⅳ级45例;组织类型分型:少突胶质细胞瘤28例,星形胶质细胞瘤174例。本组患者TK1阳性119例(58.9%);其中良性组(WHOⅠ级)患者无TK1阳性,低度恶性组(WHOⅡ级)阳性31例(36.5%),高度恶性组(WHOⅢ、Ⅳ级)阳性88例(83.8%);三组间TK1阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05～0.001)。星形胶质细胞瘤及复发患者的TK1阳性率分别显著高于少突胶质细胞瘤和初发的患者(均P<0.05)。TK1与Ki67的表达水平呈正相关(r=0.711,P<0.01)。结论恶性程度高、星形胶质细胞瘤及复发的脑胶质瘤患者瘤组织中TK1的表达增高;提示TK1表达可作为脑胶质瘤病理分级、分型及复发的重要参考指标。TK1与Ki67正相关,提示TK1亦可反映脑胶质瘤细胞的增殖情况。

脑脊液细胞蜡块技术在脑膜癌病诊断中的应用

脑膜癌病(meningeal carcinomatosis,MC)是中枢神经系统转移癌的一种特殊类型,其诊断依赖于反复多次脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)的细胞学检查;目前国内多采用玻璃管离心法收集CSF细胞,经MGG染色或免疫细胞化学(immunocytochemistry,ICC)后镜检而诊断[1]。但患者常由于各种原因导致不能多次获取CSF标本或对脑组织活检,从而对疾病诊断及分子分型造成困难。Nathan等[2]研究发现,恶性胸腔积液患者细胞蜡块制备能部分或全部代替组织标本,对疾病的诊断、恶性肿瘤的组织分型及进一步分子分型作出判断。目前尚未有CSF细胞蜡块技术的文献报道。本实验针对26例临床及CSF病理细胞学明确诊断的MC患者的CSF,应用CSF细胞蜡块制备对MC诊断的回顾性评估及技术探讨。