脑出血大鼠脑组织ROCK2与脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡的关系

目的 观察脑出血(ICH)大鼠脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡的变化,探讨Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(ROCK2)是否与ICH后脑损伤相关。方法 60只大鼠采用自体不凝血注入法制备ICH模型,随机分为6组:假手术组、ICH12h组、ICH1d组、ICH3d组、ICH5d组、ICH7d组。分别于相应时间点断头取脑,苏木精-伊红染色观察血肿形成及血肿周围组织炎性细胞浸润情况,并用干湿重法检测脑组织含水量,采用ELISA法检测脑组织IL-6、TNF-α水平,Westernblot法检测血肿周围组织ROCK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果 大鼠ICH后12h、1d、3d血肿周围组织ROCK2蛋白表达与假手术组相比明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠ICH后12h、1d、3d、5d、7d脑组织含水量、IL-6、TNF-α相对含量明显增高,与假手术组相比差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠ICH后12h、1d、3d、5d、7d血肿周围组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达与假手术组相比明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ROCK2可能参与了ICH后脑水肿、炎性损伤及细胞凋亡等病理过程,可能为ICH的治疗提供新的靶点。

8盐酸法舒地尔对脑出血大鼠炎性反应及继发性脑损伤的影响研究

目的探讨盐酸法舒地尔对脑出血大鼠炎性反应和继发性脑损伤的影响。方法117只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为正常gt（n=9）、假手术组（n=36）、脑出血组（n=36）、盐酸法舒地尔组（n=36）；后2组采用非抗凝自体股动脉血注入右侧尾状核方法制备脑出血模型并在12h后开始每日腹腔注射生理盐水2mL或生理盐水2mL＋盐酸法舒地尔（12mg／kg）3mg；正常组不做任何处理；假手术组除不注血外，其余处理同脑出血组。分别在脑出血后1d、3d、7d、14d时，应用Bederson法进行神经功能缺损评分，采用ELISA法检测血清中自介素（IL）-6、肿瘤坏死因子-a（TNF-a）含量，采用干湿重法检测脑组织含水量，采用HE染色观察血肿形成及血肿周围脑组织炎性细胞浸润情况，采用Nissl染色观察神经元形态学变化，采用免疫组化染色检测血肿周围脑组织细胞中Caspase．3、Bcl-2表达。结果（1）盐酸法舒地尔组脑出血后1d、3d时神经功能缺损评分均较脑出血组明显降低，差异均有统计学意3L（P〈O．05）。（2）盐酸法舒地尔组脑出血后1d、3d、7d时IL．6含量均较脑出血组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。盐酸法舒地尔组脑出血后各时间点TNF．d含量均较脑出血组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）盐酸法舒地尔组脑出血后各时间点脑组织含水量均较脑出血组明显降低，差异均有统计学意义fP〈0．05）。（4）HE染色显示：盐酸法舒地尔组脑出血后1d、3d时血肿大小与脑出血组相一致，但7d时血肿明显变小，14d时血肿基本消失并出现胶质细胞增生等改变。脑出血组及盐酸法舒地尔组脑出血后1d、3d时可见大量中性粒细胞浸润，但盐酸法舒地尔组脑出血后1d时中性粒细胞数[（20．56±6．37）个／视野]较脑出血组[（41．50±8．91）个／视野】明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。（5）Nissl染色显示：脑出血组脑出血后1d、3d、7d时可见神经元坏死损伤及大量缺失，而盐酸法舒地尔组脑出血后各时间点神经元数量均较脑出血组明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（6）盐酸法舒地尔组脑出血后3d、7d时Caspase-3表达均较脑出血组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。盐酸法舒地尔组脑出血后各时间点Bcl-2表达均较脑出血组明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论盐酸法舒地尔可通过降低脑出血后血清中IL-6、TNF-a含量，减少血肿周围脑组织炎性细胞浸润及神经元缺失，降低Caspase．3表达，升高Bcl-2表达，从而抑制脑出血后细胞凋亡、减轻脑水肿、改善神经功能。