吸入一氧化氮在心胸外科的应用进展

一氧化氮 (NO)是体内重要的生物活性因子 ,吸入外源性的NO可选择性地降低肺动脉压、改善动脉氧合、减少肺内分流。本文论述了NO治疗心脏手术围术期肺动脉高压的适应证、吸入浓度、治疗结果及注意事项 ;NO在肺移植围术期的应用进展以及在肺切除术后成人呼吸窘迫综合征的治疗价值。

婴幼儿先天性心脏病的外科治疗(附116例分析)

为了提高婴幼儿先天性心脏病手术治疗成活率，回顾分析了１１６例婴幼儿心脏病手术治疗情况。平均年龄（１７．０６±５．５７）个月，平均体重（８．４５±１．３７）ｋｇ。病种有室间隔缺损合并肺动脉高压６１例，法乐四联症１２例，动脉导管未闭３５例，房间隔缺损２例，完全性大血管错位２例，三房心、完全性肺静脉异位引流、完全性房室管畸形及部分性房室管畸形各１例。除单纯动脉导管未闭外，均在体外循环下行心内直视手术。结果死亡７例，死亡率为６．０３％。表明婴幼儿心肌有其特殊性，手术死亡率高，必须在手术时机、心肌保护、体外循环及术后监护诸方面不断改进。

Ⅲ型先天性食管闭锁的外科治疗

目的探讨Ш型食管闭锁的早期诊断与治疗方法。方法回顾性分析我院1995年01月￣2005年07月收治的26例Ш型食管闭锁患儿的临床资料。结果26例均行手术治疗,治愈24例(92.3%),死亡2例(7.7%);其中1例死于肺炎合并硬肿症,1例死于肺不张合并硬肿症;术后随访6个月￣3年,1例死于合并先天性心脏病(完全性大动脉转位),2例术后有食管吻合口狭窄,行球囊扩张好转,其余21例进食良好。结论早期诊断和及时的手术治疗有助于提高先天性食管闭锁及食管气管瘘患儿的手术存活率。

体外循环术中白细胞滤过技术对幼犬心肌组织cNOS和iNOS表达的影响

目的通过检测未成熟心肌组织中结构型及诱导型一氧化氮合酶(cNOS和iNOS)的表达,及用RT-PCR法观察cNOSmRNA的异常基因表达,从分子水平上探讨在体外循环(CPB)中应用白细滤过技术对幼犬心肌组织的影响。方法将12只杂种幼犬随机分为两组:白细胞滤过组(LD-CPB组和对照组(NO-LD组)。针对幼犬建立CPB模型,仅在LD-CPB组的动脉通路中加上白细胞滤过器。主脉开放30min,测定静脉血中NO浓度;术毕测心肌组织中一氧化氮同功酶的活性,并用RT-PCR法观cNOSmRNA的基因表达。结果再灌注30min后,LD-CPB组的血清NO浓度明显高于NO-LD组(P0.0001)。术毕LD-CPB组的心肌NOS活性和cNOS活性均明显高于NO-LD组(P<0.001,P<0.001),iNOS的活性两组间无显著性差异(P=0.39)。LD-CPB组心肌组织cNOSmRNA基因表达较NO-LD组调(P<0.05)。结论在体外循环手术中应用白细胞滤过技术可以上调cNOSmRNA的基因表达,保cNOS在未成熟心肌血管内皮细胞的高表达,相对提高由cNOS催化分泌的NO的浓度,从而减轻CPB成的因中性粒细胞激活而对未成熟心肌组织的炎症反应,达到保护未成熟心肌的作用。

甲泼尼龙对深低温脑缺血再灌注大鼠血清S-100β蛋白的影响

目的:通过比较血清S100β蛋白变化来观察甲泼尼龙对深低温脑缺血再灌注大鼠脑损害的作用。方法:120只SD大鼠随机分为三组。假手术组8只;模型组、甲泼尼龙组各56只,分为缺血再灌注后2、6、12h和1、2、3、7d共七个小组,每小组8只,建立深低温鼠脑缺血再灌注模型后,用酶联免疫检测技术定量检测不同时相点血清S100β蛋白水平。结果:假手术组血清S100β为(0.24±0.02)μg/L,模型组全部七个小组和甲泼尼龙处理组6h～3d血清S100β蛋白水平均比假手术组高(P<0.05),甲泼尼龙组6h～3d血清S100β蛋白水平比模型组低(P<0.01)。结论:甲泼尼龙对大鼠深低温脑缺血再灌注损伤有干预治疗作用。

缺氧诱导因子-1α与脑缺氧缺血性损伤

缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-lα)是近来发现的广泛存在于哺乳动物和人体内的一种缺氧应答调控因子,在调节缺氧诱导的基因表达中起关键性作用。它可调节表达多种靶基因如血管内皮生长因子、促红细胞生成素等,对改善脑缺氧缺血后能量代谢障碍、促进脑血流动力学恢复、抑制兴奋性氨基酸毒性、减少细胞凋亡等起重要作用。通过进一步对HIF-lα及其靶基因的研究,可能为临床治疗脑缺氧缺血性损伤提供了一种新的治疗策略。

脐带间充质干细胞治疗心肌梗死的旁分泌作用研究

间充质干细胞是一类可以自体来源、具有自我更新和多向分化潜能的干细胞，目前研究认为间充质干细胞移植能够促进梗死心肌的再生和心脏功能恢复，但其具体的作用机制仍未完全阐明。我们以脐带问充质干细胞为种子细胞，观察细胞移植治疗心肌梗死中的旁分泌作用。

脐带干细胞分化为心肌样细胞的实验研究

目的研究5-氮胞苷能否诱导脐带干细胞向心肌细胞分化。方法取无污染的足月剖宫产健康胎儿脐带，采用胶原酶胰酶消化法分离脐带干细胞。取克隆化生长的4～6代脐带干细胞，经流式细胞仪和骨、脂肪细胞诱导鉴定后，采用5μmol／L5-氮胞苷作用24h，对细胞进行诱导，连续观察5周，倒置显微镜下观察其形态变化。RT-PCR分析肌钙蛋白T基因的表达，免疫细胞化学鉴定心肌特异性肌球蛋白、肌动蛋白α—actin的表达，电镜对细胞的超微结构进行分析。结果诱导后，细胞的形态不断发生变化，但没有观察到可以跳动的心肌细胞。RT-PCR检测显示分化后的细胞表达心肌特异性基因肌钙蛋白T，免疫组织化学发现诱导后的细胞表达心肌特异性肌球蛋白和α-肌动蛋白。电镜下观察，诱导4周后有明显的肌丝样结构形成。结论脐带干细胞具有分化为心肌细胞的潜能，可作为心肌组织工程和细胞移植研究新的干细胞来源。

部分性房室隔缺损的外科治疗探讨

目的:探讨小儿先天性心脏病(CHD)部分性房室间隔缺损(PAVSD)的外科治疗方法,以期提高疗效。方法:对1999年6月至2009年8月收治27例PAVSD临床资料进行分析,男16例,女11例,年龄1.3～14岁,平均6.08岁。术前均经彩色多普勒超声心动图(Echo)和部分心导管检查确诊。手术全部在中低温体外循环(CPB)下行根治术。结果:无手术死亡。22例获1个月～10年随访,1例术后3个月因重度二尖瓣返流(MR),心力衰竭死亡,1例Ⅱ°房室传导阻滞(AVB)6个月后自行恢复,2例仍有轻度二尖瓣关闭不全;余生活、学习正常,心功能Ⅰ级。结论:一旦确诊应尽早手术治疗。修补原发孔缺损,注意避免损伤传导束,二尖瓣裂修复完善是手术成功和减少并发症的关键。

去铁胺预处理对幼龄大鼠深低温脑缺血／再灌注损伤的影响

复杂先天性心脏病外科手术中往往需要采用深低温停循环或深低温低流量，但一旦时间过长，均可能造成不同程度的神经系统后遗症。我们通过建立幼龄大鼠深低温缺血／再灌注模型，并检测脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）及一氧化氮（NO），探讨去铁胺对脑损伤的影响及可能的保护机制。

PI3K／Akt对深低温低流量小鼠模型的脑保护作用

目的探讨PI3K／Akt信号通路对深低温低流量小鼠模型的脑保护作用及初步分析其发挥作用的机制。方法将90只3周龄的C57BL／6健康小鼠数字随机分为假手术组（sham）、模型组（model）和wortmannin组，每组30只。模型组和wortmannin组建立深低温低流量动物模型，假手术组不阻断双侧颈总动脉，其余操作与模型组一样。应用WesternBlot技术分别检测各组脑组织中总akt、p-aktl、p-gsk3β的蛋白表达变化；应用realtimeRT-PCR方法检测AktlmRNA、Akt2mRNA和Akt3mRNA的变化及对各时间段脑组织进行2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色、固定、拍照及分析脑组织损伤的情况。结果各组中总akt蛋白的表达差异无统计学意义（P〉0．（15）；再灌注24h和72h模型组的p-aktl、l〉gsk-3β蛋白表达增高，差异有统计学意义（P〈0．05）；而应用wortmannin后p-aktl、p-gsk-3β蛋白表达降低，差异有统计学意义（P〈0．05），与假手术组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。再灌注24h和72h模型组和wortmannin组相比脑损伤的程度减轻，且差异有统计学意义（P〈0．05）。再灌注2hAktlmRNA、Akt2mRNA和Akt3mRNA的表达三组问差异无统计学意义（P〉0．05）；再灌注24h和72h模型组的AktlmRNA和Akt3mRNA表达高于sham组和wort—mannin组，且差异有统计学意义（P〈0.05），而Akt2mRNA的表达三组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论深低温低流量小鼠模型有脑保护作用，其发挥作用的机制可能是通过激活P13K／Akt信号通路，进而调节Akt下游蛋白糖原合成激酶一3J3的磷酸化水平而实现的。AktlmRNA和Akt3mRNA表达增高可能与p-aktl和p-gsk3β蛋白表达增高有关。

超声波联合曲拉通X-100制备猪去细胞的主动脉支架

目的探讨超声波联合曲拉通X-100制备猪升主动脉去细胞支架的方法及效果。方法从体质量相近的中华实验猪制备新鲜主动脉标本280份，随机分为4组：空白对照组、曲拉通X-100（Triton X-100）和SDS（十二烷基磺酸钠）组、曲拉通X-100组、超声波联合曲拉通X-100组，通过组织学及电镜观察、生物力学性能测定、免疫组织化学检测Ln和Fn的蛋白表达变化等分析比较各组去细胞的效果。结果超声波联合曲拉通X-100组可完全去除动脉内膜细胞，组织形态、生物力学等保持良好。层粘连蛋白（Ln）和纤维连接蛋白（Fn）的阳性面积×平均吸光度值分别是0．01470±0．00160、0．01340±0．00029，明显优于传统的化学去细胞方法。结论超声波联合曲拉通X-100组去细胞效果优于传统化学去污剂，是较理想的制备猪动脉去细胞支架的方法。