高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病血清相关因子变化的探讨

目的了解高压氧(HBO)治疗中、重度新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)后血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血浆内皮素(ET)的变化,探讨高压氧治疗对新生儿HIE的保护作用。方法81例HIE患儿,其中15例为轻度组、66例为中重度,又将中重度HIE患儿随机分为高压氧治疗组(32例)、同期治疗对照组(34例)。另外12例为正常新生儿组。在治疗前后分别用酶联免疫分析法检测血清NSE、放射免疫分析法检测血浆ET。结果中重度HIE66例(高压氧治疗组和对照组)治疗前血清NSE犤分别为(15.4±4.2)和(16.3±5.1)μg/L犦、血浆ET水平犤分别为(80±16)和(78±19)ng/L犦,均高于轻度HIE组与正常新生儿组犤分别为(6.86±0.64)μg/L和(54.52±10.54)ng/L犦。治疗后两组NSE和ET明显降低,分别为(6.4±1.7)、(9.8±3.5)μg/L和(49±6)、(55±9)ng/L与各自治疗前相比差异亦有显著性意义(t=0.41～5.07,P<0.001),但高压氧治疗组血清NSE、血浆ET下降程度与对照组比较差异有显著性意义(t=9.31～13.18,P<0.001)。结论高压氧早期治疗中、重HIE可能通过降低ET水平,而减轻脑血管床的阻力,维持HIE损伤后脑的正常血流灌注,稳定细胞生成的内环境,减轻继发性脑损伤,达到脑保护作用。

新生儿死因与多器官衰竭的探讨

目的 探讨新生儿死因与多器官衰竭 (MOF)的关系。方法 对经尸体解剖的 943例死婴 ,逐例对其死因与MOF的关系作分析研究。结果 1.发病日龄≤ 7日者 2个器官衰竭 2 6 4例明显高于 >7日组 90例 ,P <0 0 1;2 .早产儿≤ 3个器官衰竭 2 5 0例 (74 4% ) ;3.943例死因与MOF的关系 (1)依次为肺 382例 ,脑 2 6 7例 ,感染症 12 2例 ,心 71例 ,肠 6 0例 ;(2 )器官衰竭依次为呼衰 897例 ,脑衰 5 83例 ,心衰 485例 ,循环衰竭 2 2 0例 ,肾衰 172例 ,肺出血 16 2例 ,全身器官衰竭 15 0例。结论 新生儿脏器未成熟 ,遇缺氧、感染等高危因素容易发生多器官衰竭 (MOF) 。

重组人促红细胞生成素对缺氧缺血新生鼠脑损伤学习记忆能力的保护

目的:观察重组人促红细胞生成素对缺氧缺血性脑损伤新生鼠海马CA1区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的影响及对学习、记忆能力的保护作用。方法:实验于2002/2003在南京医科大学儿科医学研究所完成。选用7d龄SD大鼠62只,随机分为缺氧缺血模型组(n=22),重组人促红细胞生成素治疗组(n=20)和假手术组(n=20)。缺氧缺血模型组和治疗组结扎左侧颈总动脉,并吸入体积分数0.08的O2。假手术组不结扎颈总动脉,不缺氧。①缺氧缺血模型组和假手术组缺氧前腹腔注射生理盐水,治疗组腹腔注射生理盐水稀释的重组人红细胞生成素(500U/mL),剂量均为0.01mL/g。观察模型组和治疗组大鼠在缺氧过程中的躁动和抽搐情况;记录缺氧后0,6,12,24h时间点两组大鼠发生抽搐情况(自发左旋、夹尾左旋及夹尾尖叫)只数。②缺氧24h后随机取缺氧缺血模型组9只,治疗组10只,假手术组9只,取脑组织,在海马及小脑部位进行冠状切片,免疫组织化学法检测各组海马CA1区活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达。③取缺氧缺血模型组,治疗组和假手术组各10只,模型组与假手术组再行腹腔注射生理盐水,治疗组注射重组人红细胞生成素,剂量均为0.01mL/g,48h各组再注射一次。利用跳台实验观察各组大鼠生后75d学习、记忆潜伏期和错误次数。结果:模型组动物在缺氧缺血模型制作过程中死亡3只,治疗组及假手术组动物无死亡,均进入结果分析。①行为学结果:治疗组缺氧后24h自发左旋、夹尾左旋、夹尾尖叫的发生率与模型组比较明显降低大鼠[(16.7%、50%、50%),(66.7%、83.3%、91.7%),P<0.05]。②缺氧缺血后大鼠脑组织内活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞明显增多,在海马、大脑皮质分布较为密集。模型组、治疗组、假手术组海马CA1区单位面积内阳性细胞数差异有显著性意义[(41.38±2.09),(22.63±3.17),(10.52±2.70)个/mm2,F=296.20,P<0.01]。模型组明显高于假手术组,治疗组较模型组明显减少,但仍高于假手术组,差异非常显著(q=21.28,P<0.01)。③跳台试验:模型组学习潜伏期与假手术组相比明显延长;错误次数明显增多;记忆潜伏期明显缩短;错误次数显著增加。而治疗组较模型组学习、记忆能力明显改善,表现为学习潜伏期明显缩短;错误次数明显减少;记忆潜伏期明显延长;错误次数显著减少。结论:缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性显著增高,重组人红细胞生成素能抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3激活,减轻对新生鼠缺氧缺血的脑损伤,改善动物学习、记忆能力。

正常胎儿肺发育调节研究进展

胎儿肺的宫内发育情况与新生儿呼吸系统的严重疾病密切相关,如新生儿呼吸窘迫综合征。除产后的对症、支持治疗外,对产前胎儿肺发育规律的研究已成为国内外围生医学的研究热点。本文对调节正常胎儿肺发育的内分泌激素、细胞因子及其他调节因子的国内外研究进展作一综述。

同步间歇正压通气治疗新生儿呼吸衰竭的探讨

目的探讨同步间歇正压通气较传统通气治疗新生儿呼吸衰竭的优越性及其临床应用价值。方法64例因呼吸衰竭需用机械通气治疗的新生儿,34例用同步间歇正压通气(SIPPV),30例用间歇正压通气(IPPV)。将两组患儿的呼吸机参数氧浓度(FiO2)、吸气峰压(PIP)、呼吸频率(RR)和肺氧合功能指标在0、2、6、12、24h进行组内比较,并比较两组患儿机械通气中镇静剂的使用次数、平均上机时间以及并发症的多少。结果SIPPV组在上机后6hFiO2、PIP有显著下降(P<0.05),RR在上机12h有显著下降。而IPPV组在上机12hFiO2开始下降、上机24hPIP才有显著下降(P<0.05),RR在上机24h仍无显著改变。上机2hSIPPV组肺氧合功能指标较上机前明显改善,差异显著(P<0.01),而IPPV组在上机后6h出现显著改变。SIPPV组机械通气中镇静剂的使用次数较IPPV组明显减少(P<0.05),平均上机时间明显缩短(P<0.05),机械通气并发症也较IPPV组明显减少(P<0.05)。结论需用机械通气的新生儿,SIPPV通气方式能更快地降低FiO2和PIP,改善通气和氧合,缩短上机时间,减少机械通气中镇静剂的使用次数和并发症的发生率。

经幽门喂养和经胃管喂养对极低出生体质量儿的喂养耐受性比较

目的通过比较经幽门喂养(TP)和经胃管喂养(IG)对极低出生体质量儿(VLBWI)的喂养耐受性,探讨TP在VLBWI儿胃肠内营养中的应用价值。方法将43例胎龄为28～33周的VLBWI儿随机分为TP组(n=20)和IG组(n=23)。喂养开始于出生2～3d,且生命体征平稳。喂奶量由10～20mL/(kg.d)开始,间断喂养每3～6小时1次,VLBWI儿均同时进行部分外周静脉营养,逐渐过渡到完全肠道内营养。观察二组患儿喂养耐受性、呼吸暂停、体质量增长速度、达出生体质量时间、住院天数、并发症发生情况。结果喂养耐受性中呕吐发生率TP组显著低于IG组(χ2=4.74P<0.05),呼吸暂停发生次数TP组显著低于IG组(t=3.098P<0.05)。二组患儿腹胀、体质量增长速度、达出生体质量时间、平均住院天数经比较均无显著性差异(χ2=0.378;t=1.243,0.388,0.834Pa>0.05),坏死性小肠结肠炎发生率二组比较无显著性差异(χ2=0.027P>0.05),且二组患儿均无肠穿孔发生。结论TP能显著减少VLBWI儿呼吸暂停及呕吐的发生率,改善喂养的耐受性,TP可用于不能耐受IG而反复出现胃食管反流的VLBWI儿。

骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性脑损伤的基础研究与应用前景

近年研究发现骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)在体外适当的诱导条件下可分化为具有成熟神经元功能的神经细胞,移植到脑损伤模型体内后能明显改善神经功能。本文就BM-MSCs诱导分化为神经细胞的基础研究及其在缺血性脑损伤治疗中的应用作一综述。

Nogo-66受体特异性小干扰RNA对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经再生功能的影响

目的探讨化学合成Nogo-66受体(NgR)特异性小干扰RNA(siRNA)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经再生和功能的影响。方法建立新生大鼠HIBD模型50只,随机分为si NgR治疗组和生理盐水(NS)对照组各20只,HIBD组10只,si NgR治疗组脑室内注射si NgR及转染试剂10μl,NS对照组脑室内注射NS及转染试剂10μl,HIBD组不做脑室内注射;另外选择10只新生大鼠为假手术组,只分离颈总动脉,不结扎,不做缺氧缺血处理和脑室内注射。应用水迷宫实验分析大鼠逃生时间,并用免疫组化法结合图像分析大鼠脑组织NgR及生长相关蛋白(GAP)-43蛋白表达水平。结果 RT-PCR凝胶电泳结果显示,si NgR治疗组NgR c DNA条带不明显,NS对照组NgR c DNA条带清晰,两组管家基因GAPHD c DNA条带均清晰。免疫组化显示NS对照组可见较多NgR免疫反应产物阳性颗粒;si NgR治疗组NgR免疫反应产物阳性颗粒明显减少。假手术组、HIBD组、NS对照组和si NgR治疗组GAP-43免疫组化阳性细胞数分别为(33.2±1.3)、(20.1±1.2)、(18.7±1.4)和(28.1±1.8)个,假手术组和si NgR治疗组高于HIBD组和NS对照组(P<0.05),假手术组和si NgR治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。水迷宫实验结果显示,HIBD组新生大鼠3天平均逃生时间[(58.1±10.3)、(47.2±10.1)、(42.5±7.6)s]较假手术组[(34.2±5.6)、(25.7±6.2)、(21.2±8.1)s]明显延长(P<0.05);si NgR治疗组[(37.5±9.8)、(29.1±9.8)、(27.2±9.3)s]较HIBD组和NS对照组[(60.7±5.2)、(49.1±9.9)、(45.3±9.3)s]明显缩短(P<0.05)。结论化学合成特异性siRNA能够干扰新生大鼠脑组织NgR表达,并在一定程度上促进大鼠神经再生和神经功能恢复。

促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤海马CA1区Caspase-3激活的影响

目的 探讨重组人促红细胞生成素 (rhEPO )对新生鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)的保护作用及对海马CA1区Caspase 3激活的影响。 方法 将 7日龄SD大鼠分为缺氧缺血模型组 (n= 11)、rhEPO治疗组 (n =11)和假手术对照组 (n =10 ) ,模型组和治疗组建立新生鼠缺氧缺血性脑损伤模型。观察模型组和治疗组缺氧后 0、6、12、2 4h不同时间点自发左旋、夹尾左旋、夹尾尖叫现象。用免疫组织化学方法检测活化的Caspase 3的表达 ,观察Caspase 3阳性细胞在脑组织内分布情况 ,计算各组海马CA1区单位面积内阳性细胞数 (个 / 1mm)。 结果 模型组 2只、治疗组 1只在缺氧过程中因持续抽搐死亡。缺氧后 0h两组动物均出现自发左旋 (治疗组 10 / 10 ,模型组 9/ 9) ,2 4h治疗组自发左旋发生率明显减少 (治疗组 1/ 10 ,模型组 6/ 9,P =0 .0 198)。免疫组化显示Caspase 3阳性细胞在对照组脑组织内散在分布 ,模型组和治疗组在海马、大脑皮层较为密集。模型组CA1区阳性细胞数显著高于对照组 (41.3 8± 2 .0 9vs 10 .52± 2 .70 ,P <0 .0 1)。治疗组阳性细胞数显著低于模型组(41.3 8± 2 .0 9vs 2 2 .63± 3 .17,P <0 .0 1)。 结论 Caspase 3在新生鼠HIBD中活性显著增高 ,应用rhEPO能有效抑制Caspase 3激活 。

肌松剂在早产儿非急诊气管插管前的应用

目的探讨肌松剂-司可林在早产儿(<34周)非急诊气管插管前应用的安全性和疗效。方法将2007年1-7月在加拿大渥太华大学附属渥太华总医院和东安大略省儿童医院NICU行非急诊气管插管的早产儿,在共同应用芬太尼和阿托品的基础上,分为肌松剂组(A组,予阿托品、芬太尼,加用司可林);非肌松剂组(B组,仅用阿托品、芬太尼)。根据统一的气管插管程序,比较一次插管成功率、插管的总次数、插管人水平、Goldberg评分及不良反应。采用t检验和χ2检验行统计学分析。结果共44例患儿纳入研究,A组25例,B组19例,2组一般情况无统计学差异。A组一次插管成功率为56.0%(14例),B组为21.1%(4例),2组比较具有统计学差异(P<0.05)。A组平均插管次数[(1.8±1.3)次]低于B组[(2.5±1.3)次],A组Goldberg评分[(4.3±2.0)分]低于B组[(4.7±1.8)分],A组口鼻腔出血例数[5例(20.0%)]多于B组[2例(10.5%)],A组心动过缓(心率<100次/min)者[6例(24.0%)]少于B组[6例(31.6%)],A组氧饱和度<80%者[16例(64.0%)]少于B组[15例(78.9%)],A组皮囊加压给氧困难者[3例(12.0%)]少于B组[6例(31.6%)],但2组比较均无统计学差异(Pa>0.05)。结论阿托品、芬太尼、司可林联合用药,安全可靠,能提高一次插管成功率,避免反复插管引起的声门损伤,有利于年轻医师快速掌握气管插管术。

化学合成小干扰RNA对PC12细胞NgR表达的影响

目的 Nogo及Nogo-66受体(Ng R)对抑制中枢神经系统再生有重要的作用。本文主要观察化学合成Ng R特异性小干扰RNA(si RNA)对具有神经元分化潜能的克隆细胞系PC12细胞Ng R m RNA和蛋白表达的影响。方法培养大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞PC12细胞,神经生长因子(NGF)诱导使其分化为类神经细胞,化学合成一段针对大鼠Ng R基因编码区的si RNA,用阳离子脂质体使之转染类神经细胞,转染后48 h,采用实时荧光定量PCR检测m RNA水平;并采用蛋白免疫印迹检测Ng R蛋白表达的变化,检测干扰的效果。结果荧光定量PCR结果显示:转染后48 h Ng R m RNA水平明显下降,差异具有显著性(P<0.05);同时蛋白免疫印迹结果显示,Ng R蛋白表达水平与对照组比较也降低,差异同样具有显著性(P<0.05)。结论化学合成Ng R特异性si RNA可以实现大鼠神经细胞内源性Ng R基因沉默。