姜黄素对肾小球系膜细胞增殖的影响及其意义

目的:观察姜黄素对体外培养的人肾小球系膜细胞(MC)增殖的影响。方法:采用不同浓度姜黄素处理体外培养的人肾小球系膜细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定系膜细胞活性(A值),并与地塞米松进行比较。结果:当姜黄素浓度≥6.25μmol/L时,系膜细胞增殖明显受到抑制,且表现为浓度依赖性;当姜黄素浓度≥50 μmol/L时,姜黄素抑制系膜细胞增殖的作用明显强于地塞米松(P<0.05)。结论:姜黄素能抑制体外培养的人肾小球系膜细胞增殖,且作用强于地塞米松。

核心蛋白聚糖抑制转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化机制研究

目的研究核心蛋白聚糖抑制转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞．间充质细胞-转分化（EMT）的机制。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2）分为4组：（1）阴性对照组；（2）100ng／ml核心蛋白聚糖组；（3）10ng/ml TGF-β1组；（4）100ng/ml核心蛋白聚糖和10ng／mlTGF-β1组。Westernblot法检测信号通路ERK、P13K、Smad3的磷酸化水平和β-catenin的蛋白水平；实时定量-PCR检测snailmRNA的表达情况，逆转录-PCR检测淋巴细胞增长因子1（LEF-1）mRNA的表达情况。结果（1）与对照组相比，TGF-β1诱导组ERK（1．11±0．09：0．47±0．07）、P13K（14．79±1．02：2．48±0．06）、Smad，（0．95±0．02：0．08±0．01）的磷酸化水平明显增高，snail（2．59±0．70：1．02±0．13）、LEF-1（1．85±0．08：0．30±0．11）的mRNA的表达鼍明显增高，β—catenin（1．46±0．20：0．49±0．05）的量明显增高；（2）单纯核心蛋白聚糖组与对照组相比，所得结果差异均无统计学意义。核心蛋白聚糖和TGF—β1共同刺激组与TGF-β1组相比，ERK（0．58±0．08）的磷酸化水平及snailmRNA（1．24±0．03）的表达量明显降低而PI3K（15．84±01．64），Smad，（0．90±0．04）的磷酸化水平，LEF—1的mRNA（1．64±0．07）、β-catenin（1．42±0．09）的量差异无统计学意义。结论核心蛋白聚糖抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞EMT可能是通过阻止ERK信号转导通路实现的。

核心蛋白聚糖对转化生长因子-β1诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响及其机制

目的应用转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(EMT),探讨核心蛋白聚糖对人肾小管上皮细胞转分化的影响及其发生机制。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)分为4组:阴性对照组;100μg/L核心蛋白聚糖组;10μg/LTGF-β1组;100μg/L核心蛋白聚糖加10μg/LTGF-β1组。应用倒置相差显微镜观察其细胞形态变化;反转录聚合酶链反应、蛋白质印迹(Western blot)法检测其波形蛋白、钙黏蛋白表达水平;Western blot法检测信号通路细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化水平;实时定量聚合酶链反应检测snail mRNA表达水平。结果1.与对照组比较,TGF-β1诱导肾小管上皮细胞从原有典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞样形态;波形蛋白和snail mRNA表达上调,钙黏蛋白表达下调,ERK的磷酸化水平增高;2.单纯核心蛋白聚糖组与对照组比较无统计学差异,而核心蛋白聚糖和TGF-β1共同刺激组与TGF-β1组比较波形蛋白和snail表达下调,钙黏蛋白表达上调,ERK磷酸水平降低。结论核心蛋白聚糖能够负性调控TGF-β1诱导EMT,核心蛋白聚糖对EMT的负性调节作用可能是通过ERK信号转导途径实现的。