全长型脾酪氨酸激酶在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系

目的通过检测口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中全长型脾酪氨酸激酶[SYK(L)]的表达、与淋巴结转移的相关性分析,探讨SYK(L)对OSCC发生发展和转移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫印迹(Western blot)、免疫组织化学法检测SYK(L)在27例OSCC及其癌旁组织中表达的差异,并采用14例正常口腔黏膜作为对照,探讨其与OSCC发生及转移的关系。结果 OSCC组织中SYK(L)表达量明显低于正常牙龈组织(P<0.01),同一患者癌组织中SYK(L)表达量比癌旁组织低(P<0.05);淋巴结转移组患者的SYK(L)表达量普遍低于未转移组患者(P<0.05)。结论 SYK(L)可能与OSCC的发生和发展有关,作为抑癌基因在肿瘤的淋巴结转移过程中起至关重要的作用。

Claudin-7在口腔鳞状细胞癌中的表达和作用研究

目的探究Claudin-7在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及作用。方法通过免疫组化实验和蛋白质免疫印记实验检测OSCC中Claudin-7的表达情况,并分析Claudin-7和不同病理参数的关系。通过慢病毒转染Cal27和HN6细胞系上调Claudin-7表达,通过CCK-8和Transwell实验检测细胞增殖及迁移能力的变化;通过蛋白质免疫印迹实验和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测Claudin-7对上皮间充质转化(EMT)指标的影响。结果Claudin-7在OSCC中低表达(P<0.05),其表达水平和OSCC患者肿瘤大小、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05)。过表达Claudin-7可抑制Cal27和HN6细胞增殖和迁移,并且上调E-钙黏蛋白(E-cadherin)及下调N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白和mRNA(P<0.05)。结论Claudin-7在OSCC中低表达,上调其表达可通过影响上皮间充质转化抑制OSCC细胞的增殖和迁移。Claudin-7可作为OSCC治疗的一个新靶点。

内质网应激头颈部鳞状细胞癌细胞通过外泌体miR⁃26a⁃5p调控PTEN/AKT通路促进巨噬细胞PD⁃L1表达

目的探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的头颈部鳞状细胞癌(head and neck squa⁃mous cell carcinoma,HNSCC)细胞分泌的外泌体miRNA表达变化对巨噬细胞的影响机制。方法本研究已通过单位伦理委员会审查批准。通过蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)和实时荧光定量PCR实验(RT⁃qPCR)检测HNSCC肿瘤组织及癌旁组织ERS相关蛋白,包括蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R⁃like endoplas⁃mic reticulum kinase,PERK)和葡萄糖调节蛋白78(glucose⁃regulated protein 78,GRP78)的表达水平;以500 U/mL干扰素⁃γ(interferon⁃γ,IFN⁃γ)处理人喉鳞癌细胞系HN4细胞48 h,诱发HN4细胞产生内质网应激反应,收集HN4细胞分泌的外泌体,通过生物信息学分析鉴定外泌体的miRNA种类,预测miRNA的靶基因,将巨噬细胞转染miRNA、与收集的外泌体共培养、并敲低巨噬细胞PTEN表达,以WB和RT⁃qPCR检测外泌体miRNA调控的下游信号通路蛋白酪氨酸磷酸酶(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)及程序性死亡受体⁃1配体(programmed death receptor ligand 1,PD⁃L1)表达变化。结果HNSCC肿瘤组织相比癌旁组织ERS相关蛋白表达水平升高(P<0.05);RNA测序及实验验证表明ERS的HN4细胞分泌的外泌体miR⁃26a⁃5p表达上调(P<0.05);PTEN是miR⁃26a⁃5p的靶基因,miR⁃26a⁃5p升高巨噬细胞PD⁃L1表达水平,并下调PTEN表达(P<0.05);巨噬细胞与ERS外泌体共培养,miR⁃26a⁃5p和PD⁃L1表达上升,PTEN表达下降,p⁃AKT表达升高(P<0.05);敲低巨噬细胞PTEN表达,PD⁃L1表达上升(P<0.01)。结论ERS的HNSCC细胞通过外泌体miR⁃26a⁃5p调控PTEN/AKT通路及PD⁃L1的表达。

LDH5在舌鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨LDH5蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的表达特点,及其与临床病理和患者生存预后的关系。方法:应用免疫组织化学染色法检测LDH5蛋白在63例舌癌组织标本和16例正常舌黏膜组织标本中的表达。结合患者临床病理资料和随访资料,应用SPSS17.0软件分析LDH5的表达与相关临床病理参数(Fisher精确概率法)以及患者总生存率之间的关系(KaplanMeier法)。结果:LDH5在部分舌鳞癌组织中呈高表达(33/63,52.38%),与其在正常舌黏膜组织的表达水平相比有显著统计学差异(P<0.01)。LDH5蛋白表达水平与肿瘤大小、颈淋巴结转移、临床分期具有相关性(P<0.05),而与患者的性别、年龄、病理分级、局部浸润等无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier法分析患者总体生存情况结果显示:LDH5高表达组患者的总体生存率明显低于LDH5低表达组患者(P=0.006,Log-rank检验)。结论:LDH5在部分舌鳞状细胞癌组织中呈异常高表达,其表达水平与肿瘤的病理学特征及患者预后具有相关性。

FAT10在4-硝基喹啉-1-氧化物诱导舌癌模型中的表达特点

目的:建立与人舌黏膜鳞癌相近的大鼠舌癌模型,并研究其发生发展过程中双泛素FAT10的表达变化。方法:实验组SD雄性大鼠使用含有40μg/m L的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)饮水喂养,分别在8、16、24周时取大鼠舌体中病灶部位组织,行组织学观察;对照组大鼠正常饮用水喂养24周。使用免疫组织化学法检测FAT10、p53在舌黏膜不同程度病变组织中的表达。结果:大鼠舌黏膜经过4-NQO不同时间的刺激,可发展成不同程度的上皮异常增生以及鳞状细胞癌。从正常黏膜到不同程度的不典型增生以及最后高分化的鳞癌中,FAT10的表达强度呈逐渐增高趋势;p53在正常黏膜为阳性表达,在不典型增生中表达升高,而在癌组织中表达降低。结论:在舌癌的发生、发展过程中,FAT10可能发挥了癌基因的作用。

微波热凝对兔面神经损伤的实验研究

目的 探讨微波热凝不同输出功率和作用时间对兔面神经的影响。方法 30只新西兰大白兔 ,采用外科手术显露面神经干 ,针状辐射器距神经干 5mm ,分别以 2 0W和 4 0W输出功率行微波热凝作用 10、2 0和 30s。术后进行临床观察 ,神经电生理测定和神经组织学检查。结果 微波热凝术后除 2 0W 10s组外 ,其余动物实验侧耳和胡须都有不同程度下垂。术后第 4周面神经传导速度测定结果显示 ,2 0W 2 0s和 4 0W 10s组手术前后差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;2 0W 30s和 4 0W 30s组手术前后以及组间比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。微波热凝后面神经的病理表现主要为脱髓鞘和轴突变性 ,术后 4周时 2 0W 2 0s和 4 0W 10s组神经结构基本恢复。结论 微波热凝辐射剂量小于 2 0W 2 0s或 4 0W 10s,针状辐射器距面神经 >5mm时 ,面神经损伤在 4周后可以基本恢复。

Bmi-1在舌鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Bmi-1蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理的关系。方法:应用免疫组织化学染色法检测Bmi-1蛋白在52例舌癌和12例正常舌黏膜组织标本中的表达。结合患者临床病理资料和随访资料,应用SPSS 17.0软件分析Bmi-1的表达与相关临床病理参数(Fisher精确概率法)以及患者总生存率之间(Kaplan-Meier法)的关系。结果:Bmi-1在舌癌组织中呈高表达,与其在正常舌组织的表达水平有显著统计学差异(P<0.000 1)。Bmi-1蛋白表达与患者颈淋巴结转移有关(P=0.036 7),而与患者的性别、年龄、肿瘤大小、局部浸润、临床分期等无关(P>0.05)。Bmi-1高表达组患者的总体生存率明显低于Bmi-1低表达组患者(P=0.017 9,Log-rank检验)。结论:Bmi-1在舌鳞状细胞癌组织中呈高表达,其表达水平与颈淋巴结转移及患者的预后有关。

4-硝基喹啉-1-氧化物诱导大鼠舌癌过程中Notch1的表达特点

目的:研究Notch1在大鼠舌癌模型发生发展过程中的表达变化。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组(A组10只)和实验组(B、C、D组各10只),使用质量百分比浓度为0.004%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)饮用水喂养实验组SD大鼠,用蒸馏水喂养对照组SD大鼠。B、C、D组分别于8、16、24周取大鼠舌体组织;A组在8、16、24周同时各取3只、3只、4只作为正常对照。行常规组织学观察,并使用免疫组织化学法检测Notch1在病变不同阶段的舌粘膜内的表达。结果:4NQO可以有效诱导大鼠舌黏膜鳞状细胞癌的发生。在不同的给药时间点,可以诱导大鼠舌黏膜产生不同程度的癌前病变。Notch1在正常舌黏膜、癌前病变、舌鳞癌中的表达逐渐增高(P<0.01)。随着异常增生程度的增加,阳性表达部位逐渐由基底层向表层扩展,且Notch1的膜型表达逐渐增多。结论:Notch1的高表达及其在细胞膜上的集中表达可能与舌癌的发生、发展过程相关。

大鼠颌下腺上皮间紧密连接蛋白表达特点

目的:观察大鼠颌下腺上皮间紧密连接蛋白表达特点。方法:分离大鼠颌下腺,冰冻切片,免疫荧光染色检测ZO-1、Occludin、Claudin-3和Claudin-4等紧密连接蛋白的表达。结果:Claudin-3表达于涎腺腺泡上皮及导管上皮,与Occludin及ZO-1共表达提示位于紧密连接处。Claudin-4只表达于导管,腺泡中不表达。结论:Claudin在鼠颌下腺中表达具组织特异性。