PDCD4在雄鼠生殖细胞中的表达研究

目的:验证程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)在小鼠雄性生殖细胞中的表达。方法:RT-PCR检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸的基因表达情况;Western blot法检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸中蛋白表达水平;免疫荧光法检测PDCD4在雄性生殖嵴以及在不同周龄小鼠睾丸的定位情况。结果:RT-PCR和Western blot结果均显示PDCD4在0周龄小鼠睾丸中开始有表达,并持续表达至成年;免疫荧光显示PDCD4在胚胎期雄性小鼠生殖细胞中也有表达;在出生后0周和1周龄小鼠睾丸中,PDCD4特异表达于精原细胞;在2周龄小鼠睾丸中,PDCD4分布于精原细胞和精母细胞;而在3、4和5周龄小鼠睾丸组织中,PDCD4主要分布于精原细胞、精母细胞与圆形精子细胞。结论:PDCD4分布于胚胎期和出生后各阶段生精细胞,这为进一步研究PDCD4在精子发生中的作用打下基础。

N6-甲基腺嘌呤修饰异常对女性生殖系统疾病的影响

表观遗传学在人类生命过程中扮演着举足轻重的角色。环境的变化会引起女性体内RNA修饰发生改变,进而影响机体病理状态的发生及发展。N6-甲基腺嘌呤(m6A)已被多项研究证实是高等真核生物中RNA甲基化最常见的表观遗传现象;同时,它也动态可逆地调控着各种生命过程。该文主要介绍了m6A甲基化的相关调控蛋白、生物学功能及其与女性生殖系统疾病之间的关联,并对该研究领域目前机遇与挑战并存的状态进行探讨和展望。

辅助生殖技术取卵前信息化下阶段式健康教育模式的应用效果观察

目的探讨信息化下阶段式健康教育模式对辅助生殖技术(ART)助孕患者认知水平、遵医行为的影响效果。方法选取2018年3月—2019年2月因女方输卵管原因就诊行ART治疗患者72例作为对照组,接受常规健康宣教模式;选择2019年3月—2020年3月本院生殖中心因女方输卵管原因接受ART治疗的72例患者作为观察组,采取信息化下阶段式健康教育模式干预。比较两组干预后4个阶段ART认知水平,遵医行为以及妊娠成功率。结果观察组患者4个阶段ART认知水平评分均高于对照组(P<0.05);观察组患者遵医嘱用药、合理饮食、按时复诊3个维度遵医行为依从率均优于对照组(P<0.05);观察组患者优胚率98.61%和妊娠成功率95.83%均高于对照组的86.11%、84.72%,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论采取信息化下阶段式健康教育模式可有效改善患者对ART助孕患者认知水平,提升遵医行为及临床妊娠成功率,确保手术顺利进行与康复。

黄体酮阴道缓释凝胶在FET周期不同内膜准备方案中黄体支持的效果分析

目的分析黄体酮阴道缓释凝胶在冻融胚胎移植(FET)周期不同内膜准备方案中黄体支持的效果。方法回顾性分析2015年10月至2017年5月本院生殖中心260例激素替代FET周期患者(A组)及300例自然周期FET患者(B组)临床资料,并根据不同黄体支持方式将患者分为A1组(黄体酮针剂+地屈孕酮,186例)、A2组(黄体酮阴道缓释凝胶+地屈孕酮,74例)、B1组(黄体酮针剂+地屈孕酮,234例)、B2组(黄体酮阴道缓释凝胶+地屈孕酮,66例)。比较同一周期不同黄体支持方式黄体支持效果及妊娠情况。结果两种不同内膜准备方案组内不同黄体支持方式亚组(A1组与A2组、B1组与B2组)患者间年龄、体重指数(BMI)、不孕年限、移植日内膜厚度、移植优胚数等均无统计学差异(P>0.05);A2组的临床妊娠率、持续妊娠率均显著高于A1组(分别为58.11%vs.40.86%,50.00%vs.36.02%)(P<0.05),而B2组与B1组比较,临床妊娠率及持续妊娠率均无统计学差异(分别为42.42%vs.40.60%,39.39%vs.37.18%)(P>0.05)。结论激素替代周期FET患者使用黄体酮阴道缓释凝胶进行黄体支持,有利于改善临床妊娠率。

子宫内膜异位症大鼠内膜窗口期模型的建立

目的研究子宫内膜异位症(EMs)患者窗口期的子宫内膜容受性,构建EMs大鼠内膜窗口期动物模型。方法取性成熟SD大鼠22只,通过手术将SD大鼠自体子宫内膜组织移植至同侧腹壁及对侧子宫系膜上,建立诱发型EMs大鼠动物模型。术后4周随机选取2只大鼠解剖观察异位内膜的生长情况,确定造模成功后,将EMs模型大鼠与雄鼠同笼交配,次日观察阴栓,妊娠第5天剖腹观察20只模型大鼠异位内膜的存活情况,并对在位子宫内膜及异位内膜进行组织形态学观察。结果 20只妊娠第5天大鼠均有明显的异位病灶,在腹壁及系膜上均呈小包块样生长,且与周围组织有不同程度的粘连,光镜下见异位子宫内膜形态具有正常子宫内膜基本组织结构,EMs大鼠造模成功;所有EMs模型大鼠与雄鼠同笼交配次日均见阴栓,妊娠第5天大鼠非手术侧子宫腔内不同程度积液,在位及异位内膜均处于分泌期。结论通过自体子宫内膜移植法成功建立了EMs大鼠模型;EMs模型大鼠子宫内膜处于胚胎着床窗口期,为研究EMs子宫内膜容受性提供了动物模型。

子宫内膜异位症不孕患者叶酸水平对HOXA10基因甲基化水平的影响

目的探讨子宫内膜异位症(EMs)不孕患者的血浆叶酸水平对DNMTs和HOXA10基因甲基化水平的影响。方法选择2016年9月至2017年9月在常州市妇幼保健院生殖中心行体外受精(IVF)不孕患者30例,不孕原因为EMs的15例为试验组,不孕原因为输卵管因素的15例为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测两组患者的血浆叶酸水平;取排卵后7d子宫内膜组织,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测DNMTs的表达,采用BSP法检测HOXA10基因甲基化在子宫内膜的表达水平。结果对照组的叶酸含量显著高于试验组,对照组的DNMTs表达水平显著低于试验组;两组的DNA甲基化比较,差异有统计学意义(P>0.05);CpG点的平均甲基化水平,试验组(82%)显著高于对照组(57.00%);相关性分析结果显示,患者体内叶酸的水平与内膜组织的甲基化显著相关,体内的叶酸含量越低,内膜的甲基化程度越高。结论试验组患者甲基化的概率明显高于对照组患者,表明在EMs患者体内存在着HOXA10基因DNA异常甲基化。叶酸的水平与内膜组织的甲基化呈负相关,通过补充叶酸降低启动子甲基化率来阻止EMs的进展或许可作为今后治疗的新思路。

拉曼光谱技术在非侵入性优选卵裂期胚胎中的应用

目的 应用拉曼光谱技术对单个卵裂胚培养液滴中的胚胎代谢物进行测定分析,寻找一种新的客观评价胚胎质量的方法,优选具有发育潜力的胚胎。方法 收集2019年86例体外受精/卵细胞浆内单精子注射周期中第3天(D3)卵裂期胚胎培养液,其中D3优质卵裂胚形成优质囊胚27例,D3优质卵裂胚未形成囊胚29例,D3次级卵裂胚未形成囊胚30例。通过拉曼光谱系统收集卵裂胚培养液的拉曼光谱,采用主成分分析算法降低数据维度,提取光谱特征,并结合样本类别值建立可实现分类评估的统计模型。结果 优质卵裂胚与次级卵裂胚之间的信号存在明显差异,具有明确的聚类现象,分类准确性可达到85%以上;形成囊胚的卵裂期胚胎和未形成囊胚的卵裂期胚胎之间的信号无明显差异,分类准确性只有57%。结论 发育至D3的优质卵裂胚和次级卵裂胚存在代谢差异,拉曼光谱可区分D3优质卵裂胚和D3次级卵裂胚,但未能有效区分优质卵裂胚能否形成囊胚。

囊胚形成的影响因素及应用价值研究

目的探讨不同级别第3天(D3)卵裂期胚胎培养至第6天(D6)的囊胚形成情况,分析非优质胚胎继续培养至囊胚的形成率及形成速度的影响因素。方法选取2017年1—8月在该中心行辅助生殖技术助孕的180对夫妇患者,共收集1 009枚D3卵裂期冷冻后剩余胚胎,分为优质胚胎组(664枚)及非优质胚胎组(345枚),比较2组总囊胚形成率等。同时,据囊胚形成速度分为无囊胚形成亚组、第5天(D5)亚组、D6亚组和D5+D6亚组,根据囊胚形成情况分为A组、B组和C组,分析囊胚形成率和形成速率的影响因素。结果优质胚胎组中总囊胚形成率和D5、D6、D5+D6亚组优质囊胚形成率均优于非优质胚胎组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,B组、C组卵裂期优质胚胎构成比、长方案构成比、体外受精构成比、人线毛膜促性腺激素(HCG)日雌二醇(E2)水平较高,而拮抗剂方案构成比、卵细胞浆内单精子注射构成比较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与无囊胚形成亚组比较,D5、D6、D5+D6亚组卵裂期优质胚胎构成比、HCG日E2水平较高,卵裂期非优质胚胎构成比、排卵障碍因素较低;D6、D5+D6亚组长方案构成比较高,拮抗剂方案构成比较低,而D5亚组输卵管因素构成比较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 D3非优质胚胎仍具有发育至囊胚的潜能,但优质囊胚的形成率、种植率均低于优质卵裂期胚胎。用药方案、授精方式、不孕原因影响囊胚总形成率,总囊胚形成率高的周期胚胎种植率更高。

精子DNA碎片化指数与体外受精-胚胎移植结局的关系

目的:探究精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)与体外受精-胚胎移植的实验室指标和临床结局的关系。方法:选取在本院生殖中心就诊且符合纳入标准的90对夫妇为研究对象,以DFI值<15%、15%～30%、>30%分为正常组、低损伤组、高损伤组。统计男女双方年龄、男方精液常规参数、女方获卵数、受精率、卵裂率、优胎率、囊胚形成率、妊娠率和流产率,分析3组之间各指标的差异。结果:3组的男女双方年龄、男方精液常规指标、女方获卵数无明显差异(P> 0.05)。3组间受精率、卵裂率差异亦无统计学意义(P> 0.05);高损伤组的优胎率(59.65%±28.93%)和囊胚形成率(13.49%±17.74%)较正常组(74.34%±21.56%,31.27%±20.54%)明显降低(P <0.05);而与正常组相比,低损伤组囊胚形成率(21.00%±22.02%)明显降低(P <0.05)。高损伤组妊娠率(66.67%)较正常组(86.67%)明显降低(χ~2=4.356,P <0.05)。3组间的流产率无明显差异(χ~2=0.078,P> 0.05)。结论:DFI值的升高可能与优胎率、囊胚形成率以及妊娠率的降低有关,而与受精率、卵裂率和流产率无明显关联。

正常体重指数人群中长效促性腺激素释放激素激动剂对子宫内膜容受性及胚胎发育潜能的影响

目的探讨正常体重指数(body mass index,BMI)人群中长效促性腺激素释放激素激动剂(gonadrotropin releasing hormone agonist,GnRH-a)对子宫内膜容受性及胚胎发育潜能的影响。方法回顾性分析2018年1月至2021年9月在南京医科大学附属常州妇幼保健院行体外受精-胚胎移植的571例正常BMI患者为研究对象。在促排卵方案中,将采用早卵泡期GnRH-a长效长方案168例患者设为A组,将采用黄体期GnRH-a短效长方案403例患者设为B组,比较两组鲜胚移植病例的临床妊娠结局。随后根据冷冻胚胎移植前是否使用长效GnRH-a降调节,将使用长效GnRH-a降调节+激素替代25例A组患者和39例B组患者分为A1组和B1组,将使用单纯激素替代71例A组患者和174例B组患者分为A2组和B2组,并比较各亚组临床结局。结果A组抗缪勒氏管激素及窦卵数明显小于B组,差异有显著性(P<0.05);A组促性腺激素使用天数和总量、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)日孕酮明显高于B组,雌二醇和促黄体生成素、获卵数显著小于B组,差异有显著性(P<0.05);A组受精率显著高于B组,且A组优胚数、可移植胚胎数、卵裂率显著小于B组,差异均有显著性(P<0.05);A组鲜胚移植率、鲜胚临床妊娠率、鲜胚种植率显著高于B组,A组早期流产率显著小于B组,差异均有显著性(P<0.05);A1组临床妊娠率与种植率均明显大于A2组,其差异有显著性(P<0.05),B1组种植率大于B2组,差异有显著性(P<0.05)。结论早卵泡期GnRHa长效长方案相较于黄体期GnRH-a短效长方案在卵巢储备功能较低的情况下,其临床结局更好,提示正常BMI人群中该方案能改善其体外受精-胚胎移植治疗结局,而这可能与正常BMI人群中长效GnRH-a能提高其内膜容受性,但并不能改善其胚胎发育潜能有关。

高龄妇女冻融胚胎激素替代周期移植妊娠结局的相关因素分析

目的 :分析高龄妇女冻融胚胎激素替代周期移植的相关因素与妊娠结局的关系。方法 :回顾性分析152例(206个周期)患者的临床资料,对比妊娠组与未妊娠组的相关因素,Logistic回归分析妊娠结局的影响因素。结果:妊娠组与未妊娠组的年龄、子宫内膜厚度、移植优质胚胎数差异显著(P<0.05);年龄、子宫内膜厚度、移植优质胚胎数均作为影响妊娠结局的独立影响因素(P<0.05)。结论:对于行冻融胚胎激素替代周期移植的高龄患者而言,选择合适的子宫内膜厚度和移植胚胎数,对于改善妊娠结局具有积极作用。

精子DNA碎片指数对囊胚发育的影响

目的探讨分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中男方精子DNA碎片指数(DFI)对囊胚发育的影响。方法选取本中心2017年1～12月收治的579例进行囊胚培养的IVF周期作为研究对象,按照男方DFI检测值分为低DFI组(DFI<20%,470例)和高DFI组(DFI≥20%,109例),比较两组的囊胚培养情况。结果低DFI组的囊胚形成率高于高DFI组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组的可用囊胚率及优质囊胚率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DFI低于20%时进行囊胚培养能获得更多的囊胚,但是在可用囊胚率及优质囊胚率上却不能带来明显的提高。

孕37~40周不同年龄妇女甲状腺功能比较

目的:探讨孕37~40周不同年龄段孕妇的甲状腺相关激素水平,并分析甲状腺功能减退(甲减)的发病情况。方法:选取2018年5月至2019年2月既往无甲状腺及其他重大器官疾病史的孕37~40周孕妇,其中<28岁者890例、28~34岁者1137例、35~44岁者393例。电化学发光法检测游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)以及血清促甲状腺素(TSH)水平。结果:3组孕妇间TSH、FT3和FT4水平比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。35~44岁组的TSH水平较<28岁组和28~34岁组明显升高,差异均有统计学意义(P均<0.01);28~34岁组的TSH水平较<28岁组轻微下降,差异无统计学意义(P>0.05)。28~34岁组、35~44岁组的FT3和FT4水平较<28岁组明显下降,差异均有统计学意义(P均<0.01);35~44岁组的FT3和FT4水平较28~34岁组略下降,差异无统计学意义(P>0.05)。3组孕妇的甲减、亚临床甲减患病率比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:甲状腺激素水平与妊娠晚期孕妇的年龄密切相关。甲状腺功能检测对筛查和干预甲减有重要的指导作用,对妊娠晚期妇女极有必要。

全氟丙烷人血白蛋白微球注射液辅助3D-HyCoSy检查在不孕患者输卵管通畅性评价中的应用价值

目的:研究全氟丙烷人血白蛋白微球注射液辅助实时三维子宫输卵管超声造影(3D-HyCoSy)应用于不孕患者输卵管通畅性评价的价值。方法:选取我院不孕患者76例(2018年2月-2019年2月),均行3D-HyCoSy检查,造影剂选择全氟丙烷人血白蛋白微球注射液,观察输卵管通畅性结果、影像学表现及不良反应。结果:76例不孕患者中45例输卵管双侧通畅,其中24例为原发不孕患者,21例为继发不孕患者;9例输卵管双侧堵塞,其中6例为原发不孕患者,3例为继发不孕患者;22例输卵管一侧通而不畅,其中9例为原发不孕患者,13例为继发不孕患者。结论:全氟丙烷人血白蛋白微球注射液辅助3D-HyCoSy检查不孕患者输卵管通畅性显影效果显著,能指导临床治疗方案的确定。

叶酸缺乏对生殖发育的影响

妊娠期叶酸缺乏会引起孕妇及胎儿的一系列疾病。在早期的研究中,多认为叶酸可有效降低孕妇巨细胞性贫血的发病率,出于优生优育的考虑,将补充叶酸纳入到孕期保健中来,并将其作为公共卫生措施加以推广。此后,研究者发现母亲叶酸缺乏和胎儿畸形特别是神经管畸形有密切联系,这一观点也得到其他学者的肯定,并进一步指出,在孕期及时补充叶酸,可有效地预防胎儿神经管畸形的发生。