孕期血脂参考值范围对妊娠糖尿病孕妇血脂评估的意义

目的以妊娠期血脂特异性参考区间作为判断依据,对妊娠期糖尿病(GDM)患者及其胎儿脐血的血脂状态进行更为科学地评估。方法选取该院定期产前检查直至分娩的GDM患者81例设为GDM组,健康对照组86例,GDM患者胎儿脐血65例及健康孕妇胎儿脐血47例。采用全自动生化分析仪检测总胆固醇(CHOL)、三酰甘油(TRIG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、载脂蛋白A1(ApoA)、载脂蛋白B(ApoB)和脂蛋白(a)[LP(a)]含量。分别采用本研究组建立的正常妊娠特异性血脂参考区间(PSR)及正常非孕参考区间(NPR)对GDM患者血脂状态进行评估比较,并随访妊娠结局。结果与健康对照组相比,GDM组ApoA、HDL、LDL显著降低(P<0.05);GDM脐血HDL、LDL、LP(a)显著降低(P<0.05)。以妊娠特异性参考区间作为判断标准,低水平HDL的GDM孕妇其子代新生儿体质量明显增高(P<0.05),高水平LDL的GDM子代出生体质量明显偏低(P<0.05),而用健康非孕参考区间评估无此发现。母体HDL与新生儿体质量无相关性(r=-0.190,P=0.103);母体LDH与新生儿体质量明显负相关(r=-0.252,P=0.029)。结论本研究所建立的健康妊娠特异性血脂参考区间对GDM孕妇及其胎儿脐血的血脂状态的评估具有重要意义。

原发不育及反复自然流产史夫妇单纯男方染色体异常核型分析

目的探讨男方染色体异常核型对原发不育及女方反复自然流产的影响。方法通过外周血淋巴细胞培养对2009年11月至2014年12月在该院就诊的1 170对原发不育及1 601对反复自然流产史夫妇的染色体进行G显带染色分析,排除女方染色体核型异常,对单纯男方染色体核型异常的患者进行核型分析。结果 (1)1 170对原发不育夫妇中,单纯男方染色体核型异常共147例,检出率为12.6%。其中数目异常22例(15.0%),结构异常14例(9.5%)。同时检出染色体多态变异111例(75.5%),其中大Y染色体43例(29.3%),小Y染色体46例(31.3%)。(2)1 601对反复自然流产史夫妇中,单纯男方染色体核型异常共180例,检出率为11.2%。其中数目异常5例(2.8%),结构异常39例(21.7%)。同时检出染色体多态变异136例(75.6%),其中大Y染色体52例(28.9%),小Y染色体61例(33.9%)。(3)大Y染色体、小Y染色体在原发不育和反复自然流产史夫妇中的构成比比较,差异均无统计学意义(P>0.05);47,XXY核型在原发不育夫妇中的构成比(8.8%)高于反复自然流产史夫妇(0.6%),差异有统计学意义(P<0.05);染色体结构异常在反复自然流产史夫妇中的构成比(21.7%)高于原发不育夫妇(9.5%),差异有统计学意义P<0.05)。结论男方染色体异常是导致原发不育和女方反复自然流产的重要因素,Y染色体数目与形态结构的异常对男性生育能力有重要影响。

一例X连锁迟发性脊柱骨骺发育不良的产前诊断

目的对1例迟发性脊柱骨骺发育不良（X—linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda，sEDT）家系进行TRAPPC2基因突变分析。并为其提供遗传咨询和产前诊断。方法采用聚合酶链反应和DNA直接测序法对先证者及其父亲TRAPPC2基因的4个外显子与侧翼区进行序列分析。为先证者于孕18周时行羊膜腔穿刺术，提取胎儿羊水细胞基因组DNA，应用SRY基因对胎儿进行性别鉴定，同时对TRAPPc2基因进行序列分析。结果测序发现先证者父亲TRAPPC2基因第4外显子存在C．209G〉A位点突变，先证者cDNA第209位碱基存在G〉A杂合突变，上述突变为无义突变，可导致蛋白翻译提前终止。在正常对照中未发现相同的突变。应用SRY基因对胎儿进行性别鉴定结果为阳性。对胎儿TRAPP（誓基因序列分析发现其第4外显子亦存在C．209G〉A位点突变。结论TRAPPC2基因第4外显子c．209G〉A位点突变是该家系中3例男性患者的主要病因。先证者是致病突变的携带者，胎儿为男性并携带与先证者相同的突变，因此具有较高的患病风险，建议患者应及早终止妊娠。产前基因诊断是预防和控制该类疾病的有效手段。

唐氏综合征胎儿、新生儿及其孕母血清铜蓝蛋白的表达特点

目的探讨胎儿、新生儿及其孕母血清铜蓝蛋白的表达与唐氏综合征（Down syndrome，DS）的关系。方法采用双向凝胶电泳＋质谱的蛋白组学技术检测6例DS胎儿孕母和6例正常胎儿孕母血清中差异蛋白的表达，采用Western印迹技术验证蛋白组学结果。采用酶联免疫吸附试验检测11例DS胎儿孕母、10例正常胎儿孕母、11例DS新生儿及10例正常新生儿血清铜蓝蛋白的含量。组间差异比较采用两独立样本t检验。结果在DS胎儿孕母血清中鉴定出29种差异蛋白，其中铜蓝蛋白上升最为显著，与正常胎儿孕母相比，蛋白表达密度比值达5．43，差异有统计学意义（t=2．7102，P〈O．05）。Western印迹结果显示，DS胎儿孕母血清中铜蓝蛋白表达水平（O．95±0．24）明显高于正常胎儿孕母（O．37±0．14）（t=2．9521，P〈O．05），而DS新生儿血清铜蓝蛋白表达水平（O．74±0．03）显著低于正常对照新生儿（O．89±0．06）（t=-2．9515，P〈O．05）。酶联免疫吸附试验显示，DS胎儿孕母血清铜蓝蛋白含量为（346．5士111．8）ng／ml，明显高于正常胎儿孕母血清的（248．6±78．3）ng／ml，差异有统计学意义（t=2．301，P（0．05）。然而，DS新生儿血清铜蓝蛋白水平[（166．1±55．O）ng／m1]却低于正常对照新生）L[（244．O±36．O）ng／ml]，差异有统计学意义（t=-3．873，P〈O．01）。结论孕母及新生儿血清铜蓝蛋白表达水平异常可能与DS存在密切联系。

妊娠期糖尿病母亲胰岛素水平与胎儿胰岛素抵抗的相关性研究

选取妊娠期糖尿病（GDM）孕妇（81例）与正常对照孕妇（86例），分别检测孕妇及其胎儿脐血的血糖、胰岛素，并计算胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）。GDM孕妇空腹血清胰岛素（24．79±1．70）mU／L，胰岛素抵抗指数（5．46±0．48）均显著高于正常对照组。GDM脐血血清胰岛素（15．08±1．52）mU／L，胰岛素抵抗指数（2．80±0．35）显著高于正常对照组。GDM母亲胰岛素与脐血胰岛素呈正相关（r=0．326，P〈0．05）；与脐血胰岛素抵抗指数呈正相关（r=0．378，P〈0．05）。GDM母亲子代在胎儿期已发生胰岛素抵抗，且胎儿胰岛素抵抗的发生受母亲胰岛素水平的影响。

应用同位素标记相对和绝对定量技术初步筛选Ts65Dn小鼠海马组织的差异蛋白

目的 探讨唐氏综合征导致智力低下的分子机制.方法 采用Ts65Dn小鼠作为唐氏综合征小鼠模型,周龄3～12周的雌雄鼠各3只,按雌雄比例1∶1合笼传代繁殖.第1代生育存活的17只新生小鼠中,保持了Ts65Dn 三体型别和正常型别小鼠分别为5只（Ts65Dn组）和12只,后者中随机选取5只为对照组,常规饲养至16～18周.采用同位素标记相对和绝对定量（isobarictags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）技术,筛选海马组织中差异蛋白,比较2组差异蛋白的表达.结果 2组小鼠的海马组织中共鉴定到蛋白质2805个,其中差异有统计学意义的蛋白共374个.与对照组相比,Ts65Dn小鼠海马组织中表达上调的蛋白195个,表达下调的179个.按P值由低到高排序,P值最低的7种蛋白质为C2orf47同源蛋白、细丝蛋白A1作用蛋白亚型2、锌指蛋白、中心体基质蛋白亚型1、SEC23作用蛋白、BAG分子伴侣蛋白3和丝氨酸蛋白酶抑制剂1.结论 Ts65Dn小鼠海马组织存在差异蛋白表达,可能与其神经缺陷密切相关.iTRAQ技术有助于筛选及鉴定海马组织中的差异蛋白.

妊娠期糖尿病孕妇血清载脂蛋白M与胰岛素和瘦素的关系

目的探讨妊娠期糖尿病（GDM）孕妇血清载脂蛋白M（ApoM）与胰岛素和瘦素之间的关系。方法GDM孕中期组（孕24—28周）87例、孕晚期组（分娩前1周）122例，对照组为同孕期正常孕妇，检测血清中载脂蛋白M（ApoM）、胰岛素、瘦素的表达水平，分析指标间的相关性。结果孕中期GDM孕妇ApoM表达水平（0．029±0．010）g／L显著低于同孕期正常对照组（0．036±0．013）g／L（t=-4．168，P=00001），孕晚期GDM孕妇ApoM表达水平（0．028±0．010）g／L显著高于同孕期正常对照组（0．023±0．008）g／L（t=3．529，P=0．0005）。孕中期GDM组的胰岛素表达水平、胰岛素抵抗指数均高于同孕期正常对照组[胰岛素表达水平：12．975（7．968～22．237）比6．885（4．805—10．015）μg/L，Z=-5．618，P=0．000；胰岛素抵抗指数2．808（1．705～5．158）比1．336（0．897—1．925），Z=-6．305，P=0．000]，瘦素水平[0．026（0．015～0．044）比0．024（0．014—0．036）ng／L]两组比较差异无统计学意义（Z=-0．927，P=0．354）；孕晚期GDM组和同孕期正常对照组比较，胰岛素表达水平[9．5（5．645～13．265）比9．82（6．708—15．885）μg/L，Z=0．971，P=0．332]、胰岛素抵抗指数[1．637（0．977～2．471）比1．781（1．121—2．686），Z=0．904，P=0．366]和瘦素[0．025（0．015—0．044）比0．029（0．015～0．043）ng／L，Z=0．494，P=0．621]差异均无统计学意义。采用多因素非条件Logistic回归分析显示，ApoM表达水平是GDM的独立危险因素。结论妊娠期糖尿病孕妇血清ApoM表达异常，ApoM可能与GDM的发生有一定的关系，但胰岛素和瘦素与ApoM之间无相关性。