Pax8在女性生殖道肿瘤诊断与鉴别诊断中应用价值

目的探讨Pax8蛋白在女性生殖道肿瘤中的诊断及鉴别诊断作用。方法收集Mǔllerian管各种类型上皮48例和肿瘤152例,采用免疫组化SP法检测Pax8蛋白表达。结果 Pax8在输卵管上皮阳性率为100.0%(10/10)、子宫内膜上皮为100.0%(10/10)、子宫颈黏液腺上皮为35.7%(5/14)、子宫颈鳞状上皮为0(0/14);在卵巢输卵管、宫体、子宫颈的浆液性腺癌、交界性浆液性肿瘤、子宫内膜样腺癌、透明细胞腺癌均为100.0%;在卵巢输卵管黏液性肿瘤为70.0%(7/10)、子宫颈黏液腺癌为41.7%(5/12);在卵巢性索-间质肿瘤、卵巢无性细胞瘤、子宫颈鳞状细胞癌、子宫内膜鳞状细胞癌、卵巢类癌、卵巢或子宫颈的小细胞神经内分泌癌、消化道转移性癌均为0;在盆腔腺癌为100.0%(3/3)。结论 Pax8是Mǔllerian管腺上皮敏感且特异性的标志物,对女性生殖道上皮性肿瘤的鉴别诊断起重要作用。

CyclinD1、p16INK4在低度恶性子宫内膜间质肉瘤中的表达

目的探讨低度恶性子宫内膜间质肉瘤(LGESS)组织中Cyclin D1、p16INK4的表达。方法采用免疫组织化学法检测36例手术切除后经病理确诊的LGESS瘤组织中Cyclin D1和p16INK4蛋白的表达,分析它们与临床病理特征和预后的关系。结果 Cyclin D1、p16在LGESS中的表达率分别为47%、39%,且它们的表达与患者的年龄、是否绝经、孕产次、肿瘤大小、肌层浸润深度、是否脉管侵犯、有无淋巴结转移均无相关性,但Cyclin D1与临床手术病理分期及LGESS预后有关(P<0.05)。结论 Cyclin D1阳性表达的低度恶性子宫内膜间质肉瘤与肿瘤侵袭性的临床行为有关。

细胞量少的卵巢癌腹腔液漏诊和过度诊断的实验分析

目的探讨细胞量少的卵巢癌腹腔液的漏诊及过度诊断情况及原因。方法建立卵巢癌腹水模型,分阴性组和4个阳性组,即4 ml良性腹腔冲洗液中有0、5、10、20、40个卵巢癌SKOV3细胞,每组重复3次,以观察HE和免疫细胞化学染色切片、磁激活细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)联合流式细胞鉴定的方法检测该模型。结果判断阴性组的样本中无癌细胞,部分阳性组样本中有癌细胞;Ep CAM、Calretinin均阳性,Pax-8、CK5/6部分阳性;5组中均有EBA-1免疫荧光阳性的上皮细胞,阳性率分别为13.6%、6.7%、9.0%、6.2%、6.3%。结论卵巢癌腹腔液中的细胞量少时,形态学观察癌细胞易造成漏诊,免疫细胞化学染色易出现假阳性,MACS不能有效分离其中的癌细胞,应采用新方法以识别分离腹腔液中的少量癌细胞。

肿瘤相关巨噬细胞亚型在子宫内膜癌中的表达和意义

目的:探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophage,TAM)标志物CD163和CD68蛋白在子宫内膜癌中的表达,分析其与子宫内膜癌患者临床病理特征及5年总生存率的相关性。方法:收集2010年1月—2015年12月在南京医科大学附属常州市妇幼保健院院就诊的46例子宫内膜癌患者作为观察组,并以同期就诊的25例正常增生期子宫内膜患者作为对照组,采用免疫组织化学法检测两组患者的CD163、CD68的表达水平,以TAM计数的中位数为界,将子宫内膜癌病例分为CD163、CD68高表达组和低表达组,将CD163/CD68比值以中位数为界分为CD163/CD68高比值组和低比值组,分析CD163、CD68的表达水平和CD163/CD68比值与子宫内膜癌患者临床病理参数及其预后的关系。结果:子宫内膜癌组织中CD163、CD68的表达水平均显著高于正常增生期子宫内膜患者(P<0.05)。CD163表达水平与病理分级、有无淋巴结转移和FIGO分期显著相关(P<0.05),CD68表达水平与肌层浸润深度和FIGO分期显著相关(P<0.05),CD163/CD68比值的高低与年龄、病理学分级、淋巴结转移和FIGO分期显著相关(P<0.05),CD163、CD68的表达及CD163/CD68比值与患者生存率无显著相关性(P>0.05),而淋巴结转移与患者的预后相关。结论:TAM可能参与子宫内膜癌的发生发展,CD163和CD68的表达可能在子宫内膜癌的进展中起到重要作用。

PAX8和SATB2在卵巢黏液性肿瘤的诊断与鉴别诊断的意义

目的探讨PAX8和SATB2在卵巢黏液性肿瘤的诊断与鉴别诊断的价值。方法回顾性复习25例卵巢原发性黏液性肿瘤、9例卵巢转移性黏液腺癌、5例结直肠黏液腺癌的临床资料,病理形态学分析,免疫组织化学染色方法检测PAX8、SATB2、CK7、CK20、CDX2等蛋白的表达。结果卵巢原发性黏液性囊腺瘤组10例,3例PAX8(+)、SATB2均(-)。交界性卵巢黏液性囊腺瘤组10例,4例PAX8(+),SATB2均(-)。卵巢原发性黏液腺癌组5例:SATB2均(-),2例PAX8(+)。卵巢转移性黏液腺癌组:其中结直肠黏液腺癌转移组SATB2 4例(+),PAX8均(-);胃转移性腺癌组PAX8、SATB2均(-),5例结直肠腺癌病例中4例SATB2(+)。结论 PAX8、SATB2抗体是鉴别卵巢黏液性肿瘤来源的重要免疫标记物,具有重要的临床意义。

输卵管组织LIF和LIFR的表达与慢性输卵管炎和输卵管异位妊娠的关系

目的:探讨白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)与慢性输卵管炎和输卵管异位妊娠的关系。方法:采用免疫组化技术检测15例正常非孕妇女、20例慢性输卵管炎患者和40例输卵管异位妊娠患者的输卵管组织中LIF和LIFR的表达水平,半定量分析其在各组间的表达差异。结果:LIF和LIFR在各组输卵管腺上皮和间质细胞均有表达,且主要定位于腺上皮细胞胞浆。无论是月经分泌期还是增生期,慢性输卵管炎组输卵管腺上皮和间质细胞中LIF的表达明显强于正常组和输卵管妊娠组(P<0.05)。慢性输卵管炎组输卵管腺上皮中LIFR的表达显著高于输卵管妊娠组和正常非孕组(P<0.05);而在输卵管间质中,LIFR在正常非孕组的表达明显高于输卵管妊娠组和慢性输卵管炎组(P<0.01)。结论:慢性输卵管炎的输卵管微环境改变可能是输卵管炎患者易发异位妊娠的原因。

As_2O_3磁性Fe_3O_4白蛋白微球的制备与表征

目的 ：制备用于肿瘤热化疗和逆转多药耐药的As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球并表征。方法：化学共沉淀法制备Fe3O4磁性纳米粒,运用透射电镜、X射线衍射分析进行表征,溶血实验及MTT试验进行毒理学评定。去溶剂化交联法制备As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球,运用透射电镜和能谱仪进行表征,在交变磁场作用下进行体外升温试验,体外释药方法研究其释药速率。结果：Fe3O4磁性纳米粒近似球形,粒径约20 nm,无溶血作用,细胞毒性为1级。As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球近似球形,大小均匀,粒径约193.4 nm,其不同浓度的磁流体在交变磁场下可升温至39.5～58.0℃并保持恒定。体外释药实验证实As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球具有明显的缓释功能。结论：Fe3O4磁性纳米粒作为药物载体具有良好的生物相容性。用去溶剂化交联法可以成功制备出As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球,As2O3磁性Fe3O4白蛋白微球释药速率缓慢,为研究肿瘤热化疗和逆转多药耐药提供理论和实验基础。

分选卵巢癌腹水中癌细胞的实验研究

目的探讨免疫荧光细胞化学法(ICC)联合荧光原位杂交法(FISH)分离卵巢癌腹水中癌细胞的可行性。方法复制卵巢癌腹水模型,分阴性对照组和4个阳性组(A、B、C、D组),即4 ml良性腹腔冲洗液中分别有0、5、10、20和40个标记线粒体绿色荧光(Mito-Tracker Green)的卵巢癌SKOV3细胞,每组样本制备3份。复制卵巢癌裸鼠原位移植模型,分阳性组和阴性对照组,每组6只BALB/c裸鼠,阳性组裸鼠在卵巢接种SKOV3细胞,各组分别在接种后4、6和8周取2只裸鼠收集腹水。采用磁激活细胞分选法富集癌细胞,用ICC-FISH鉴别分离样本中的癌细胞,以8号染色体探针(CEP8)信号>2个为FISH阳性标准,规定DAPI+/EBA-1+/Mito-Tracker Green+/CEP8+细胞为检测癌细胞。结果腹水模型:阴性对照组和阳性组均可见EBA-1阳性细胞,阳性组均有标记的SKOV3细胞,癌细胞的回收率为20%~50%,12个阳性样本中9个样本的检测率为100%。裸鼠模型:在200倍显微镜视野下,4、6和8周每个视野的SKOV3细胞数最多分别为3、8和15个。结论将卵巢癌腹水磁富集后,ICC-FISH可以准确地识别其中的癌细胞,该方法为研究和治疗卵巢癌提供了新思路。

血清雌孕激素及输卵管组织白血病抑制因子及其受体表达与输卵管妊娠的关系

目的探讨白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)和血清雌孕激素[雌二醇(E2)、孕酮(P)]与输卵管异位妊娠的关系。方法采用免疫组化技术检测11例非孕组、12例宫内妊娠组和36例输卵管异位妊娠组输卵管组织中LIF和LIFR的表达水平,半定量分析其在各组间的表达差异。电化学发光法检测32例正常宫内孕组、40例异位妊娠组血清E2和P。结果 LIF在非孕组、宫内妊娠组和异位妊娠组间的表达无明显差别;在输卵管腺上皮中,异位妊娠组LIFR的表达高于其他两组(P<0.05),而非孕组和宫内妊娠组上皮间表达无明显差异(P>0.05);但是在间质中,LIFR的表达在输卵管妊娠组明显低于其他两组(P<0.01),而非孕组和宫内妊娠组上皮间其表达无明显差异(P>0.05)。异位妊娠组血清E2、P水平明显均低于正常宫内妊娠组(P<0.05,P<0.01)。相关性分析显示输卵管妊娠时输卵管腺上皮LIFR和患者血清E2正相关,间质LIFR和E2负相关。结论 LIFR的异常表达可能与输卵管异位妊娠的发生密切相关。输卵管异位妊娠组血清E2、P均明显低于正常宫内妊娠组。E2能上调输卵管腺上皮的LIFR表达,下调输卵管间质LIFR的表达。

输卵管组织LIF及其受体LIFR的表达与输卵管妊娠的关系

目的:探讨白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)与输卵管异位妊娠的关系。方法:采用免疫组化技术检测11例非孕组和36例输卵管异位妊娠组输卵管组织中LIF和LIFR的表达水平,半定量分析其在各组间的表达差异。结果:无论是在输卵管腺上皮还是间质中,LIF在非孕组和异位妊娠组间的表达无明显差别;但是在输卵管腺上皮中,LIFR的表达异位妊娠组高于非孕组(P<0.05);而在间质中,LIFR的表达输卵管妊娠组明显低于非孕组(P<0.01)。结论:LIFR的异常表达可能与输卵管异位妊娠的发生密切相关。

Slug基因在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变组织中的表达与意义

目的研究转录因子Slug mRNA在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达情况及意义。方法采用实时定量PCR方法检测56例宫颈癌组织、60例CIN组织中Slug mRNA的相对表达量,以35例正常宫颈组织及慢性宫颈炎组织作为对照,并分析其与宫颈癌各临床病理参数的相关性。结果对照组、CIN组、宫颈癌组Slug mRNA相对表达水平分别为(1.33±0.32)×10-2、(2.99±0.95)×10-2、(4.69±1.02)×10-2,宫颈癌组、CIN组Slug mRNA相对表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);宫颈癌组Slug mRNA相对表达水平高于CIN组,差异有统计学意义(P<0.01)。宫颈癌组织中Slug的表达与国际妇产科学联盟(FIGO)分期、淋巴结转移相关,差异有统计学意义(P<0.05),但与年龄、肿瘤大小、病理类型、分化程度无关,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Slug基因在CIN、宫颈癌组织中表达上调,可能与宫颈癌的发生、发展及转移密切相关。

局部晚期宫颈癌术前放化疗联合腹腔镜手术的预后分析

目的探讨术前放化疗联合腹腔镜手术对局部晚期宫颈癌预后的影响。方法选取52例宫颈肿瘤最大径≥4cm且≤5cm的IB2、IIA2期宫颈癌患者，术前26例放化疗患者为观察组，26例直接手术患者为对照组。观察组术前采用静脉化疗1～2疗程＋阴道近距离放疗1～2疗程，治疗期间行临床评估，如无效改根治性放疗，如有效放化疗结束后2周手术。两组手术方式均采用腹腔镜宫颈癌根治术，年龄≤45岁鳞癌患者保留双侧卵巢。统计观察组术前放化疗疗效，比较两组患者腹腔镜手术相关质量因素、术中术后并发症、术后病理资料及术后补充放化疗及复发生存情况。结果观察组肿瘤病灶完全消失3例，部分缓解18例，1例无进展改根治性放疗，总临床有效率80．77％。观察组手术时间、切除宫颈阴道旁组织宽度优于对照组（P〈0．05），术中出血量、术后肛门排气时间及拔尿管时间两组差异无统计学意义（P〉0．05），两组1月内均无输尿管瘘、肠瘘。观察组与对照组的盆腔淋巴结转移率为24．00％和53．85％、淋巴脉管间隙浸润阳性率20．00％和46．15％、宫颈深间质浸润率40．00％和76．92％，差异均有统计学意义（P〈0．05）。根治性宫颈癌手术后接受补充放化疗的患者观察组17例，对照组22例。观察组与对照组的4年累积无疾病进展生存率分别为93．54％和75．20％，且与盆腔淋巴结转移、宫颈深间质浸润相关。结论局部晚期宫颈癌患者术前放化疗联合腹腔镜手术安全可行，能使部分患者达到病理治愈，免于术后追加补充放化疗，并有可能进一步提高患者的无进展生存期、远期生存率，有良好的临床应用前景。

超声三步法快速筛查胎儿先天性心脏畸形的临床价值

目的探讨超声三步法快速筛查胎儿先天性心脏畸形(CHD)的临床应用价值。方法回顾性分析75例孕16~28周孕妇的产前产后资料。以胎儿超声心动图为参考标准,评估同期超声三步法对胎儿CHD的诊断效能。结果 75例孕妇中,超声心动图检出CHD胎儿60例;超声三步法检出CHD胎儿57例,漏诊3例,误诊3例。超声三步法快速筛查与胎儿超声心动图具有较好的一致性(Kappa值为0.75,P<0.01);超声三步法筛查胎儿CHD灵敏度为95%,特异度为80%,准确度为92%,阳性预测值为95%,阴性预测值为80%。超声三步法对胎儿CHD的病因诊断与胎儿超声心动图结果一致者45例,诊断符合率为79%(45/57)。结论超声三步法快速筛查胎儿CHD有较高的灵敏度和准确度,操作简便,可作为胎儿CHD的筛查方法。

两例合并3q微缺失的先天性心脏病胎儿的遗传学分析

目的明确2例先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）胎儿的基因组拷贝数变异（copy number variations，CNVs）的性质，探讨3q微缺失与cHD的关系。方法提取CHD胎儿脐带组织的DNA，用全基因组低覆盖度测序检测其CNVs。结果2例CHD胎儿均携带3q微缺失。病例1表现为室间隔缺损、唇腭裂，携带3q29区1．66Mb的缺失，涉及3q29微缺失综合征的所有关键基因。病例2表现为主动脉骑跨、室间隔缺损，携带3q28区240kb的缺失，未发现明确与该片段相关的致病信息。结论3q29微缺失可能导致CHD、唇腭裂等多发畸形。全基因组低覆盖度测序可用于检测CNVs。