自噬在精子发生中的作用研究进展

自噬是一种在溶酶体中降解细胞质物质的分解代谢过程,在各种生理或病理过程中起着重要的作用。自噬被认为是把双刃剑,因为它既可以通过清除受损细胞器为细胞更新提供能量来充当保护机制,也可能导致细胞损伤[1]。自噬相关基因(autophagy related gene,ATG)和酶在3种类型的自噬中被发现:巨自噬、分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)和微自噬。首先,巨自噬作为自噬的主要形式,是一个保守的动态过程,包括起始或诱导(吞噬泡形成)、成核、伸长、闭合(自噬小体的形成)、融合(自噬小体和溶酶体形成自噬溶酶体)和降解。根据靶点的不同,巨自噬可分为非选择性自噬(靶向细胞质)和选择性自噬(靶向特定细胞器)。选择性自噬根据底物降解可分为:线粒体自噬、聚集体自噬、核糖体自噬、内质网自噬、细胞核自噬、过氧化物酶体自噬、异源吞噬、溶酶体自噬、脂滴自噬、铁自噬等[2]。

基于转录组测序分析Ppp2ca条件性敲除小鼠的睾丸差异表达基因及相关通路

目的探讨蛋白磷酸酶2催化亚基α(protein phosphatase 2 catalytic subunit alpha,Ppp2ca)条件性敲除对小鼠睾丸生殖细胞差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)及相关通路的影响。方法基于Cre-loxP原理构建生殖细胞中特异性敲除Ppp2ca基因的敲除小鼠(Ppp2ca^(cKO)),通过灭活蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)催化亚基PP2Ac的功能,以研究PP2A全酶在雄性生殖系统中的作用。敲除雄鼠至8周龄时,记录体质量及睾丸质量,取小鼠睾丸和附睾行组织学检测,同时检测小鼠血清中睾酮水平。收集睾丸组织进行转录组测序、基因本体学(gene ontology,GO)分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)生物信息学分析。结果Ppp2ca^(cKO)敲除鼠与Ppp2cactrl对照组小鼠的睾丸质量分别为(0.044±0.003)与(0.119±0.008)g(t=24.550,P<0.001),血清睾酮水平分别为(0.327±0.096)与(0.567±0.050)µg/L(t=3.899,P=0.018),Ppp2ca^(cKO)敲除鼠均低于Ppp2cactrl对照组。苏木精-伊红染色结果显示,在Ppp2ca^(cKO)敲除鼠的睾丸和附睾中均未观察到精子,生精小管中生精细胞数量及层次明显减少且伴有大量的空泡结构。转录组测序结果筛选出DEG共11304个(上调7568个,下调3736个);微小RNA(microRNA,miRNA)36个(上调8个,下调28个);长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)3732个(上调1107个,下调2625个)。Ppp2ca^(cKO)敲除鼠的DEG在多项GO富集类别中具有显著差异,如精子发生、精子细胞发育、精子运动、顶体囊泡、中心体、微管和线粒体外膜。此外,KEGG功能富集结果显示,DEG多与生化代谢途径和信号转导途径相关,主要影响了胞吞作用、肌动蛋白细胞骨架的调节、cAMP信号通路、Wnt信号通路、脂代谢、细胞色素P450、鞘磷脂信号通路等。这些DEG与精子发生密切相关。结论Ppp2ca敲除可引起PP2A功能异常,影响精子发生过程及睾丸发育相关信号通路的活性,导致小鼠精子发生受损,减数分裂阻滞,睾酮水平降低。

新型冠状病毒肺炎疫情期间男科实验室生物安全

2019年12月新发现的新型冠状病毒感染的肺炎(2019冠状病毒病)疫情来势迅猛,临床发现新型冠状病毒感染者和无症状感染者均可能成为传染源。尽管经呼吸道飞沫和密切接触传播被认为是主要的传播途径,但在相对封闭的环境中存在经气溶胶传播的可能。现已发现鼻咽拭子、痰和其他下呼吸道分泌物、血液、粪便、尿液等标本中可检测出新型冠状病毒核酸,精液中是否可检出新型冠状病毒核酸尚无定论。有报道发现新型冠状病毒可能影响血管紧张素转化酶2(ACE2)高表达的睾丸,同时精液与尿液的排出有着共同通道。因此,理论上精液也有可能携带病毒。男科实验室不仅可能接触包含精液在内的以上多数的体液标本,而且男科实验室的许多操作为开放性操作,有产生气溶胶的风险。因此,在新型冠状病毒疫情期间有必要采取相应的防护措施以降低感染风险。通过参照现有的疫情认知并借鉴其他相关经验,结合男科实验室的工作特点,我们将疫情期间男科实验室工作需要注意的生物安全问题进行总结,供同行参考。

宫腔镜、腹腔镜联合手术对中重度宫腔粘连的效果

目的探讨宫腔镜、腹腔镜联合手术在诊断和治疗中重度宫腔粘连的临床效果。方法将120例有生育需求的经宫腔镜检查确诊为中重度宫腔粘连的患者随机分为2组,对照组行宫腔镜下宫腔粘连分离术,观察组行宫腔镜、腹腔镜联合手术。观察2组患者术后宫腔恢复、月经改善情况,并随访2年观察2组患者妊娠情况。结果120例患者均顺利完成手术,观察组术后1、3个月的月经改善率分别为85.0%(51/60)、76.7%(46/60),宫腔再次粘连发生率分别为14.3%(9/60)、21.7%(13/60);对照组术后1、3个月的月经改善率分别为14.3%(9/60)、21.7%(13/60),宫腔再次粘连发生率分别为28.3%(16/60)、40.0%(24/60);随访2年内对照组妊娠率为28.6%(16/56),观察组妊娠率为47.3%(26/55)。结论宫腔镜、腹腔镜联合手术治疗中重度宫腔粘连安全、有效,能够有效恢复宫腔状态,在术后月经恢复、预防粘连复发以及提高术后妊娠率方面均有显著效果。