儿童哮喘发作对肝功能指标的影响

目的了解儿童哮喘发作对肝功能指标的影响。方法选取2019年1—12月在南京医科大学附属无锡儿童医院就诊的80例哮喘急性发作住院儿童作为哮喘发作组,其中轻度组54例、中度组17例、重度组9例,选取同时期35例无过敏性和感染性疾病的体检儿童作为对照组。比较哮喘发作组和对照组及不同哮喘发作严重程度组的血清总胆红素(TBIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PALB)、碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸转氨酶(ALT)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、腺苷脱氨酶(ADA)、胆碱酯酶(CHE)、α-岩藻糖苷酶(AFU)、胆汁酸(BA)水平。结果哮喘发作组TBIL、ALB、PALB、ALP、CHE低于对照组[(7.0±2.5)μmol/L比(9.7±3.9)μmol/L,(42.2±3.5)g/L比(43.8±2.4)g/L,(160.5±44.4)mg/L比(219.0±35.7)mg/L,(230.9±73.0)U/L比(271.1±79.4)U/L,(8433±1680)U/L比(9708±2026)U/L](P<0.05或P<0.01),LDH、BA高于对照组[316(274,366)U/L比240(211,268)U/L,3.3(2.1,5.7)μmol/L比2.1(1.3,4.6)μmol/L](P<0.05或P<0.01),两组TP、ALT、GGT、AST、ADA、AFU比较差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘发作轻度组、中度组和重度组TBIL、TP、ALB、PALB、ALP、ALT、GGT、AST、LDH、ADA、CHE、AFU、BA比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论哮喘发作可能导致儿童ALB、PALB代谢异常,哮喘发作时LDH升高,但尚无充分证据证明儿童哮喘发作可引起肝细胞损伤,未发现儿童哮喘发作严重程度与肝功能指标相关。

TBX2亚家族基因在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

目的分析TBX2亚家族基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与预后的关系,对机制进行初步探讨。方法应用生物信息学平台、免疫组织化学染色分析TBX2亚家族基因在NSCLC中的表达及其与预后的关系,分析TBX2亚家族基因间的共表达情况;采用MethHC数据库分析TBX2低表达情况与其基因启动子区域甲基化的关系。结果TBX2亚家族基因在NSCLC组织中的表达水平低于正常肺组织(P<0.05),并与患者的总生存率具有相关性(P<0.05)。MethHC分析显示,TBX2亚家族基因在NSCLC中的基因启动子区域的甲基化程度明显高于正常肺组织(P<0.05)。结论TBX2亚家族基因可能成为NSCLC的新型检测标志物,其低表达是NSCLC预后不良的因素,其低表达现象可能与NSCLC患者启动子区域的甲基化程度增高相关。

抗双链DNA抗体室内质控品的制备及性能评价

目的:探讨抗双链DNA(dsDNA)抗体室内质控品的制备方法,并对其精密度和稳定性的质控性能进行评价。方法:对本实验室不同浓度抗dsDNA抗体血清标本进行选择性收集,依据目标靶值将所收集到的血清按比例调配,经灭活、离心、分装、标记、冻存等步骤制备成高值、低值质控品。各测定20管上述高值、低值质控品,确定两个质控品的初始靶值,评估其批内精密度。随后将其作为室内质控品应用于抗dsDNA抗体的日常检测中,将1年内的质控数据按季度分为4组,比较各组均值与初始靶值的差异,并绘制Levey-Jennings质控图,监测质控品的在控状态,评估质控品的稳定性。结果:自制高值、低值抗dsDNA抗体质控品批内变异系数(CV%)分别为5.148%和5.510%;1年内批间CV%分别为5.450%和7.960%,均在试剂厂家提供的CV%可接受范围内(批内≤10%,批间≤15%),Levey-Jennings质控图少有出现失控现象。结论:自制抗dsDNA抗体室内质控品的精密度较高,制备过程简便,在-20℃保存条件下自制质控品的稳定期至少1年,在目前尚未有优质商品质控供用的情况下,适合各级医院实验室推广应用。

肺炎支原体IgM和IgG抗体的时间分辨荧光免疫层析法的建立及初步应用

目的构建可快速、灵敏、定量检测肺炎支原体(MP)免疫球蛋白(Ig)M和IgG抗体的时间分辨荧光免疫层析法(TFICA)。方法基于毛细管作用,应用铕微球示踪,通过对抗原/抗体微球偶联比、微球稀释度、划膜浓度和血清稀释度进行优化,建立检测MP-IgM和IgG抗体的TFICA,并考核其方法学性能(如灵敏度、特异性、稳定性)。通过对55名健康体格检查者进行检测获得TFICA的正常参考值;采用TFICA与市售化学发光法试剂盒分别检测88名受试者(33例患者,55名健康体格检查者)的血清样本,计算结果一致性(Kappa检验)。结果反应条件为:鼠抗人IgG抗体和MP抗原与微球分别按质量比1∶20和1∶100反应,微球工作稀释度分别为1∶200和1∶100;MP抗原和羊抗人IgM的划膜浓度分别为0.5和1.0 g/L;血清稀释度均为1∶300。建立的MP-IgM和IgG TFICA测量范围分别为(0.78~70.00)×10^(3)相对单位(RU)/L和(0.17~200.00)×10^(3) RU/L,检测灵敏度分别为0.78×10^(3)和0.17×10^(3) RU/L,与甲状腺过氧化物酶抗体、心磷脂酶抗体、甲状腺球蛋白抗体均无交叉反应;相对标准偏差分别为3.7%~14.8%和2.9%~14.0%。经37℃5 d快速老化,MP-IgM和IgG TFICA试剂的平均信号降低率分别为13.7%和14.2%,提示热稳定性好。该法正常参考值分别为3.33×10^(3)和2.61×10^(3) RU/L;与市售化学发光试剂盒检测结果的Kappa值分别为0.79和0.76。结论TFICA检测MP-IgM和IgG抗体具有操作简捷、灵敏度高、特异性好、可定量的优点,具备一定的临床应用价值。

白细胞、C反应蛋白与凝血指标在哮喘发作期患儿的临床意义

目的:探讨白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)与常见凝血指标凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)、D二聚体(D-D)在哮喘发作期儿童的临床意义。方法:选取发作期哮喘儿童,根据发作严重程度分为轻度、中度、重度3组。比较指标的组间差异,Pearson相关计算WBC、CRP与凝血指标的相关性,Logistic评估中度或重度哮喘发作期的影响因素。结果:全血WBC在中度组(12.02×10^(9)/L±4.61×10^(9)/L)显著高于轻度组(9.56×10^(9)/L±3.21×10^(9)/L,P<0.05),重度组(12.91×10^(9)/L±3.14×10^(9)/L)显著高于轻度组(9.56×10^(9)/L±3.21×10^(9)/L,P<0.05);重度组抗凝血酶ATⅢ(10^(9)%±13%)高于轻度组(99%±13%,P<0.05)。WBC与FIB正相关(r=0.297,P=0.018),CRP与TT(r=-0.330,P=0.008)、ATⅢ(r=-0.375,P=0.002)负相关,与FIB(r=0.496,P=0.001)、D-D(r=0.326,P=0.009)正相关。Logistic回归显示校正性别年龄的WBC影响重度组的比值比(OR)为1.602。结论:WBC和儿童哮喘发作严重程度有关,哮喘发作期儿童体内炎症状态与凝血指标存在一定关联。

支气管哮喘患儿外周血CRP、NLR和PCT水平变化及临床意义

目的探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)患儿急性发作期外周血常规指标和C-反应蛋白(C-reaction protein,CRP)的变化及其临床价值。方法选取2019年1月至2020年8月南京医科大学附属无锡儿童医院呼吸科确诊的哮喘患儿157例作为研究对象,并按其入院病情分为哮喘缓解期组67例和发作期组90例,并选择年龄、性别等相近的健康儿童59人作为对照组。采用医院电子病历系统收集研究对象的年龄、性别、血常规检查结果,并计算中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR),后比较三组年龄、性别等一般情况、血细胞计数、CRP、NLR和PLR等指标,采用多元logistic回归分析筛选哮喘发作的相关因素,并采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价其对哮喘发作的诊断价值。结果三组间白细胞计数(white blood cell,WBC)、淋巴细胞计数(lymphocyte,LY)、中性粒细胞计数(neutrophil,NE)、血小板计数(platelet,PLT)、血小板压积(platelet hematocrit,PCT)、血小板分布宽度(platelet distribution width,PDW)、CRP、NLR、PLR等指标比较,差异有统计学意义(P<0.05);而嗜酸性粒细胞计数(eosinophil,EO)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)和红细胞分布宽度(red blood cell distribution width,RDW)比较,差异无统计学差异(P>0.05);哮喘发作期患儿与对照组受试者WBC、LY、NE、PLT、PCT、PDW、CRP、NLR、PLR比较,差异有统计学意义(P<0.05);哮喘发作期与缓解期LY、NE、PLT、PCT、PDW、CRP、NLR比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析发现,年龄、PCT与哮喘急性发作呈负相关,是保护因素;而CRP和NLR是哮喘急性发作的危险因素。ROC曲线发现CRP、NLR和PCT对哮喘急性发作具有诊断价值,其曲线下面积(AUC)分别为0.826、0.813和0.737。结论CRP及外周血常规指标NLR、PCT可作为儿童哮喘急性发作的预测评价指标。

尘螨过敏原Der p 1、Der p 2特异性IgE化学发光免疫检测方法的建立及其性能评估

目的采用纳米磁微粒化学发光免疫技术建立尘螨过敏原第1、2组分(Der p 1、Der p 2)特异性免疫球蛋白E(sIgE)的定量检测方法。方法通过优化试剂组份和反应模式,评估纳米磁微粒化学发光免疫技术检测Der p 1、Der p 2 sIgE的各项性能指标。同时检测50例疑似尘螨过敏患者血清Der p 1、Der p 2 sIgE水平,与Phadia系统测定结果为标准进行比较,其一致性的比较采用Kappa检验。结果最佳实验体系为:磁微粒用量25μg,反应缓冲液(pH值7.4)含0.1 mol/L Tris-HCl、质量分数0.25%酪蛋白,包被液含20 mmol/L磷酸缓冲液(PB)、质量分数1%牛血清白蛋白(BSA),发光增强液含体积分数0.05%Triton X-100,采用两步法免疫反应,样本量为20μl,反应温度为37℃。检测体系最低检出限小于0.01 kU/L,线性范围0.2~100.0 kU/L,批内、批间精密度分别小于5%、7%,Der p 1和Der p 2交叉污染率分别为0.19%、0.21%。与Phadia系统测定结果比较,Der p 1阳性、阴性符合率分别为78.0%(32/41)、9/9,一致性较好(Kappa=0.65,P=0.008);Der p 2阳性、阴性符合率分别为93.3%(28/30)、85.0%(17/20),一致性也较好(Kappa=0.79,P=0.003)。结论成功建立了尘螨过敏原Der p 1、Der p 2 sIgE纳米磁微粒化学发光免疫检测方法,其各项性能指标良好,与Phadia系统有较好的一致性。