PTD-p53融合蛋白的表达、纯化及其对肝癌细胞的转导活性

目的:原核表达野生型p53与PTD的融合蛋白,检测PTD介导p53进入肝癌细胞的效率。方法:利用RT-PCR方法从A549细胞系中分离野生型p53基因,将该基因分别克隆入pTATHA和pET32 a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)LysS内诱导表达并进行纯化。以纯化的p53蛋白经腹腔免疫BALB/c小鼠,制备高效价的抗血清。将PTD-p53融合蛋白加入HepG2细胞培养上清,利用间接免疫荧光法检测PTD-p53融合蛋白导入HepG2细胞的效率。结果:成功地构建了含有野生型p53基因的原核表达载体,表达纯化了p53融合蛋白及p53蛋白,证实PTD-p53可以高效地转入HepG2细胞。结论:PTD-p53融合蛋白的表达纯化及活性分析,为应用PTD-p53蛋白治疗肝癌的实验研究奠定了理论基础。

甲胎蛋白与原发性肝癌临床病理因素及预后的相关性研究

目的探讨肝细胞肝癌患者术前血清甲胎蛋白（AFP）浓度与临床病理因素、根治性肝癌切除术后复发的关系。方法回顾性分析2007年1月至2009年6月在我院及江苏省人民医院行根治性肝切除术的220例经病理诊断为肝细胞性肝癌患者的临床资料，分析术前血清AFP浓度与肝癌的病理分级、肿瘤大小、肿瘤包膜、肿瘤数目、门静脉癌栓、TNM分期及术后复发的关系。结果术前血清AFP浓度与患者肿瘤直径（x2=11．76，P〈0．05）、肿瘤包膜（x2=17．07，P〈0．05）、门静脉癌栓（x2=8．944，P〈0．05）、TNM分期（x2=4．929，P〈0．05）和术后早期复发率（x2=5．569，P〈0．05）有关，与病理Edmondson分级及肿瘤数目无关。结论本研究结果表明术前血清AFP浓度高的患者的肿瘤直径更大、无包膜、更易存在门静脉癌栓及更高的TNM分期，血清AFP浓度较高者更易早期复发，可作为判断肝细胞性肝癌术后预后差的一个标记物，可在临床上用于预测预后和复发。