自噬在拓扑替康诱导卵巢癌细胞OVCAR3死亡中的作用

目的研究自噬在拓扑替康诱导卵巢癌OVCAR3细胞死亡中的作用。方法采用不同浓度的拓扑替康处理卵巢癌OVCAR3细胞,MTT法测定拓扑替康对OVCAR3细胞增殖的抑制作用,单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察给药后OVCAR3细胞的自噬征象,LDH漏出率法检测拓扑替康联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对拓扑替康诱导OVCAR3细胞毒性的影响,MTT法测定拓扑替康联合自噬诱导剂雷帕霉素对OVCAR3细胞增殖抑制的影响,金氏公式分析联合作用效果。结果拓扑替康对OVCAR3细胞的生长有显著的抑制作用,呈明显的剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为0.057μg/ml。MDC荧光染色显示拓扑替康可诱导OVCAR3细胞产生自噬囊泡,3-MA可以抑制拓扑替康诱导的自噬产生,雷帕霉素可以增强拓扑替康诱导的细胞自噬。细胞培养24h后,拓扑替康组LDH漏出率为22.5%,3-MA+拓扑替康组为16.8%;48h后拓扑替康组LDH漏出率为47.4%,3-MA+拓扑替康组为32.6%。雷帕霉素联合各浓度拓扑替康用药组的抑制率较拓扑替康单药组增加,按金氏公式计算,除最高浓度组(拓扑替康0.2μg/ml)外,其他各组q值均>1.15。结论拓扑替康对OVCAR3细胞有显著抑制作用并能够诱导其发生自噬,诱导自噬性细胞死亡可以提高拓扑替康对OVCAR3细胞的抗肿瘤作用。

拓扑替康诱导卵巢癌细胞自噬的实验研究

目的:检测拓扑替康(TPT)对卵巢癌OVCAR3细胞的增殖抑制作用,观察TPT诱导OVCAR3细胞自噬现象,初步探讨其发生的可能机制。方法:采用不同浓度的TPT处理卵巢癌OVCAR3细胞,MTT法测定TPT对OVCAR3细胞增殖的抑制作用,吖啶橙(AO)染色观察酸性小体(AVO)形成,MDC荧光染色检测自噬囊泡。免疫印迹法检测TPT对OVCAR3细胞LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白的影响。结果:TPT对OVCAR3细胞生长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的剂量依赖性,IC50为0.057μg/mL。TPT可诱导OVCAR3细胞产生AVO。MDC荧光染色显示,TPT可诱导OVCAR3细胞产生自噬囊泡。采用0.05μg/mL TPT处理OVCAR3细胞24h后,免疫印迹法显示,随着时间的推移LC3-Ⅱ和Beclin1蛋白水平表达个逐渐增加,提示TPT诱导的OVCAR3细胞自噬可能与Bec-lin1蛋白有关。结论:TPT对OVCAR3细胞有显著的抑制作用,TPT可以诱导OVCAR3细胞发生自噬,TPT诱导OVCAR3细胞自噬可能与Beclin1蛋白上调有关。

宫颈癌根治术中卵巢移位的临床意义

目的探讨宫颈癌根治术中卵巢移位的临床意义。方法 57例Ⅰb～Ⅱa期宫颈癌患者分两组:A组23例,术后进行补充放疗;B组34例无补充放疗作为对照。用性激素检测及Kup-perman评分法比较两组疗效。结果 A组17例(73.9%)发生卵巢功能衰竭,明显多于B组的9例(26.5%);其卵巢功能持续的时间也短于B组(13.7个月vs.21.4个月)(P<0.05)。A组生存质量也较B组差。结论卵巢移位可以有限地保留卵巢功能。补充放疗是影响移位卵巢功能的主要因素。