巨噬细胞集落刺激因子对巨噬细胞极化及卵巢癌细胞侵袭、转移的影响

目的探讨卵巢癌微环境中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)促进M2型巨噬细胞的极化和浸润,及其对于癌细胞侵袭、转移的影响。方法选取卵巢癌细胞系A2780和SKOV3与THP-1来源巨噬细胞,在体外构建共培养模型,ELISA和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测培养基中M-CSF含量及其mRNA的表达水平。流式细胞术分析CD68^+CD163^+M2型巨噬细胞的极化比例。Transwell迁移试验检测2种卵巢癌细胞系与M2型巨噬细胞共培养后侵袭、转移能力的变化。免疫组化染色法检测卵巢癌(52例)及同期卵巢良性肿瘤(18例)石蜡组织切片中M-CSF、CD68^+、CD163^+和E-钙黏蛋白(E-cad)的表达及其相关性,并分析M-CSF与卵巢癌患者临床病理特征的关系。结果 A2780和SKOV3细胞与巨噬细胞共培养后,其上清中M-CSF浓度明显高于2种癌细胞单独培养组(t分别为14.315、12.338,P均<0.01)。荧光定量PCR结果显示,升高的M-CSF来源于共培养后卵巢癌细胞的分泌(t分别为29.915、36.826,P均<0.01)。CD68^+CD163^+M2型巨噬细胞在A2780和SKOV3共培养组的极化比例分别为(6.14±0.50)%和(7.32±0.67)%,明显高于单独培养组(1.82±0.34)%,差异有统计学意义(t分别为12.289、12.711,P均<0.01)。Transwell试验结果显示,2种卵巢癌细胞共培养后其侵袭能力增强(24.00±4.81 vs 75.20±6.42,t=11.058;18.40±2.31 vs 61.60±9.66,t=7.537,P均<0.01)。卵巢癌组织中M-CSF的表达与CD68^+、CD163^+阳性细胞数正相关且均高于对照组(r分别为0.690、0.596,P均<0.01),而E-cad阳性表达则与之呈负相关且低于对照组(r=-0.566,P<0.01)。M-CSF表达在不同肿瘤FIGO分期、分化程度和淋巴结转移情况组间差异有统计学意义(χ^2分别为6.240、6.612、4.544,P均<0.05)。结论卵巢癌微环境中M-CSF的表达升高诱导CD68^+CD163^+M2型巨噬细胞的极化和浸润,进而促进癌细胞的侵袭、转移。

肺癌患者血清载脂蛋白C1水平及临床意义

目的分析肺癌患者血清载脂蛋白C1(APOC1)水平,并探讨其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验检测100例健康体检者(健康对照组)、103例肺部良性疾病患者(肺良性疾病组)和360例肺癌患者(肺癌组)血清APOC1水平。采用χ^(2)检验分析血清APOC1水平与肺癌患者临床病理特征的相关性。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估APOC1单独及联合癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测对肺癌的诊断价值。结果肺癌组血清APOC1水平高于肺良性疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。根据血清APOC1中位水平对肺癌患者进行分层发现,血清APOC1≥54.46μg/mL患者中TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移和有远处转移的例数明显多于APOC1<54.46μg/mL患者,差异有统计学意义(P<0.05)。APOC1的诊断效能高于CEA、CYFRA21-1和NSE,在APOC1最佳诊断截断值为46.71μg/mL时,其诊断肺癌和早期肺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.812和0.766;灵敏度分别为70.3%和60.7%;特异度均为81.0%。4项标志物联合检测时,诊断肺癌和早期肺癌的AUC分别增加至0.902和0.860。结论肺癌患者血清APOC1水平明显升高,可能是肺癌潜在的诊断指标。血清APOC1水平对于肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移和远处转移具有潜在的预测价值。APOC1、CEA、CYFRA21-1及NSE联合检测可提高肺癌诊断的准确度。

乳腺癌组织中tRF-31的表达及其对癌细胞增殖的影响

目的目前关于tRF-31对乳腺癌的影响研究报道较少。文中旨在检测和分析乳腺癌组织中tRF-31的表达水平,探讨其对乳腺癌细胞增殖的影响。方法收集2017年11月至2019年2月南京医科大学附属肿瘤医院乳腺外科乳腺癌患者的32份肿瘤组织标本及对应的癌旁组织。从中选取6份癌组织以及对应的癌旁组织进行高通量测序,通过高通量测序,选择tRF-31(FC=6.5781,P=0.023)作为研究对象。采用RT-PCR法测定癌组织及癌旁组织的tRF-31表达量,运用ROC曲线分析tRF-31的表达对乳腺癌诊断的灵敏度和特异性。将2种人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231和MCF-7)分别分为:对照组(转染negative control)和tRF-31组(转染tRF-31抑制试剂tRF-31 inhibitor)。采用CCK-8和克隆形成实验检测转染后乳腺癌细胞增殖的情况。并测定转染后乳腺癌细胞苏氨酸激酶(AKT)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的变化,探索tRF-31与AKT/mTOR信号通路的关系。结果tRF-31在癌组织(0.103±0.207)的表达显著高于癌旁组织(0.028±0.039),差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,tRF-31检测乳腺癌的灵敏性为90.63%,特异性为53.13%。MDA-MB-231细胞中,tRF-31组tRF-31的表达量较对照组明显降低[(0.267±0.012)vs(1±0.040),P<0.01];MCF-7细胞中,tRF-31组tRF-31的表达量较对照组亦明显降低(P<0.01)。MDA-MB-231和MCF-7细胞中,tRF-31组细胞0、24、48、72 h增殖能力较对照组均降低(P<0.05)。MDA-MB-231细胞中,tRF-31组细胞克隆形成率[(43.67±3.29)%]较对照组[(100±3.74)%]明显降低(P<0.01);MCF-7细胞中,tRF-31组细胞克隆形成率[(49±2.94)%]较对照组[(100±4.89)%]明显降低(P<0.01)。MDA-MB-231和MCF-7细胞中,tRF-31组AKT和mTOR的蛋白水平较对照组明显下降。结论tRF-31在乳腺癌组织中显著高表达,并可促进乳腺癌细胞的增殖。这一结果有望为乳腺癌治疗提供新靶点。